2.2.4. Lipides
Les lipides ont été dosés par la
méthode d'extraction au Soxhlet (BIPEA, 1976). Cinq
grammes de matière sèche d'échantillon (M0) ont
été pesés dans une cartouche d'extraction Wattman et
fermés par du coton cardé. Un ballon d'extraction a
été pesé (M1) dans lequel 60 mL d'hexane sont introduits.
L'ensemble (cartouche et ballon) était monté sur l'extracteur
Soxhlet (TECATOR, Höganäs, Suède) et la
matière grasse a été extraite par un système de
flux et de reflux pendant 6 h. Le ballon d'extraction a été par
la suite retiré et placé à l'étuve à 130
°C pendant 30 min pour l'évaporation de traces de solvant.
Après refroidissement pendant 5 min au dessiccateur, le ballon
était pesé (M2) et l'équation 5 a permis de
déterminer la teneur en lipides.
M2 - M1
Lipides (%) = M0 X 100
|
Equation 5
|
M0 : masse (g) de l'échantillon,
M1: masse (g) du ballon d'extraction à vide
; M2 : masse (g) (ballon + matière grasse)
KOUAKOU Koffi Jean-Michel/Mémoire Master 2
BTA/ UFR STA/ Année universitaire 2015-2016
2.2.5. Protéines
La teneur en protéines (TP) a été
déterminée à partir du dosage de l'azote total suivant la
méthode de Kjeldhal (AOAC, 1990). Cette méthode
a consisté à doser l'azote total contenu dans
l'échantillon par une solution d'acide chlorhydrique (HCl) en
présence d'indicateur de fin de réaction. Après la
minéralisation, la distillation et le titrage, le taux de
protéines a été déterminé grâce
à un facteur de conversion (GLOWA, 1974). Environ 0,5 g
d'échantillon sec des aliments a été introduit dans un
matras et minéralisé en présence de 10 ml de H2SO4
concentré et de 0,5 g de catalyseur de minéralisation Dumazert.
La minéralisation a été réalisée à
chaud durant une heure sur une rampe de minéralisation (TECATOR,
2006, Höganäs, Suède). Après
minéralisation et refroidissement des échantillons, 50 ml d'eau
distillée ont été ajoutés dans chaque matras
contenant le minéralisât. Celui-ci a alors été
positionné dans une unité de distillation (TECATOR,
Kjeltec System 1002 Distilling Unit) et environ 50 ml de NaOH 40% ont
été introduits dans le matras. La distillation a
été effectuée et environ 175 ml de distillât
collectés dans un erlenmeyer contenant 25 ml d'acide borique 4 % et 3
gouttes de l'indicateur rouge méthyle-bleu méthyle. Le
distillât obtenus ci-dessus a par la suite été titré
sous agitation avec une solution de H2SO4 à 0,1 N jusqu'à ce que
la couleur vire du vert au pourpre. Un blanc (V blanc) contenant l'ensemble des
réactifs à l'exception de l'échantillon a
été réalisé parallèlement et la teneur en
protéine a été calculée à partir de
l'équation 6.
(VH2SO4 - Vblanc) X 0,1 X 14,01 X 6,25
TP = X Echantillon (g)
|
100
|
MS(%)
|
Equation 6
où V H2SO4 Volume de l'acide sulfurique (mL) ; est le
facteur de conversion de l'azote en protéine,
14,01 l'azote équivalent à 0,1 N de H2SO4 en g/mole
d'azote et MS le taux de matière sèche de
l'échantillon.
17
|