étude des polysaccharides des macro-algues alginophytes: caractérisation et dosage des alginates

UNIVERSITE CADI AYYAD FACULTE DES SCIENCES SEMLALIA MARRAKECH

Projet de fin d'études - Semestre 6

Parcours biologie appliquée à la production végétale (BAPV)

Département de biologie

DATE DE SOUTENANCE : Le 03/06/ 2013

Intitulé du mémoire :

Étude des Polysaccharides des Macro-algues Alginophytes:
Caractérisation et Dosage des Alginates.

Candidat : AHNICH Abdelilah Membres du jury :

Pr. BOUARAB Lahcen (Encadrant)

Pr. OUAZZANI Naaila

Pr. YASSIR Abdellah

Pr. BENICHOU Mohamed

Remerciements

je tient tout d'abord à remercier les différentes personnes qui ont accepté de faire partie du jury de ce mémoire :

Mr YASSIR Abdellah en tant que responsable du module ainsi que Mr BENICHOU Mohamed et Mme OUAZZANI Naaila en tant qu'examinateurs.

Un grand merci à mon encadrant, Mr Lahcen BOUARAB pour m'avoir permis de mener à bien ce mémoire, merci pour votre disponibilité, vos précieux conseils et votre sympathie. J'ai eu beaucoup de plaisir à travailler avec vous durant ce travail.

je souhaite également remercier Mr Badr Eddine RGANI l'étudiant en Master Biotechnologies Microbiennes qui m'a aidé dans la préparation des réactifs et du matériel dont j'avais besoin pour la réalisation de ce travail.

Que ceux qui ne sont pas nommées ici nous pardonnent, s'ils ont été oubliés, ce n'est que par l'écrit ...

Merci à Tous.

Sommaire

INTRODUCTION PARTIE BIBLIOGRAPHIE			1 2
I)	Algues :		2
	1) Classification		2
		Utilisations	3
II)		Les polysaccharides (phycocolloïdes)	4
	1)	Classes	5
	a)	les carraghénanes	5
	b)	Les agars	6
	c)	les alginates (Qui seront traités et détaillés dans ce mémoire.)	6
	2)	Les alginates	7
	a)	Définition et Formule chimique	7
	a)	Intérêts et valorisation des alginates	7
b)	Espèces alginophytes	7
c)	Méthodes de dosage	9
		i. Méthodes colorimétriques	9
	ii. Méthode gravimétrique	9

PARTIE PRATIQUE : 10

I) Matériel et méthodes 10

1) Matériel et produits nécessaires 10

a) Produits 10

b) Matériels 10

2) Matière première : 11

a) Laminaria digitata : 11

b) Fucus vesiculosus 12

3) Préparation de la matière sèche : 13

a) Prétraitement : 13

b) Principe 14

c) Extraction et purification des alginates: 15

4) Calcul des teneurs en alginates (%) 18

5) Résultats 18

6) Discussion 19

CONCLUSION ET PERSPECTIVES 20

BIBLIOGRAPHIE WEBOGRAPHIE ANNEXES

Liste des figures

Fig1 : Les Chlorophycophytes Fig2 : Les Phéophycophytes Fig3 : Les Rhodophycophytes 2

Fig4 : Marchés mondiaux: familles d'application. [9] [17] Erreur ! Signet non défini.

Fig4 : Marchés mondiaux: familles d'application. [9] [17] 4

Figure 5 : Principaux colloïdes présents dans chaque famille d'espèce [9] [17] 5

Figure 6: Motif structural du é-carraghénane [20] 5

Figure 7: Structure du modèle agarose [15] [16] 6

Fig 8: Place des phycocolloïdes parmi les produits utilisés pour épaissir ou gélifier les

solutions aqueuses. 6

(Source : R. Perez, 1997.) [9] [17] 6

Figure9 : unité structurale d'alginates [16] 7

Figure10 : Principales zones de récolte des alginophytes dans le monde. [1] 8

Figure10 : Morphologie externe et cycle digénétique hétéromorphe de L. digitata. (Source

Pearson éducation 2008) 11
Figure11 : Morphologie externe et cycle digénétique hétéromorphe de F. vesiculosus.

(Source l.kautsky, siteweb : www.azote.se, consulté le 23-5-2013) 12

Fig 12 : Lavage et nettoyage des algues à l'eau courante 13

Fig 15 : Pesée du poids de la matière sèche 13

Fig 14 : Séchage à l'étuve 80°C pendant trois jours 13

Fig 13 : Pesée du poids de la matière fraiche 13

Fig 16 : découpage d'une quantité de biomasse de l'algue sèche (tableau 4) en très petits

morceaux dans un erlenmyer et ajout de 400 ml d'eau 15

Fig 18 : chauffage à 90°C et agitation du mélange pendant 2h 15

Fig 17 : réglage du pH du milieu à 10,5 avec 2 ml de (NaHCO3- 0,5M) 15

Fig 19 : récupération du filtrat 15

Fig 20 : récupération du volume de la suspension 16

Fig 21 : incorporation de l'éthanol ou de l'alcool commercial avec agitation 16

Fig 22 : Apparition des alginates, sous forme d'un gel visqueux et fibreux translucide 16

Fig 25 : récupération du surnageant dans une boite de pétri déjà pesée 16

Fig 24 : Centrifugation de la solution de Fucus vesiculosus à 60tour/15min 16

Fig 23 : Filtration et récupération des filaments de Laminaria digitata 16

Fig 26 : utilisation du papier filtre déjà pesé pour les faibles quantités 17

Fig 27 : Séchage du filtrat et du surnageant à l'étuve et le peser chaque fois jusqu'à

stabilisation du poids 17

Fig 28 : Pesée du filtrat et du surnageant après séchage complet et stabilisation du poids 17

Fig 29 : Teneurs en alginates (%) en fonction du poids de la matière sèche en g de Laminaria

digitata et Fucus vesiculosus 19