2. COLORATION PANOPTIQUE
a) Coloration MGG
La coloration permet de réaliser la formule sanguine et
médullaire. Le principe de cette coloration repose sur l'action
combinée de deux colorants neutres: le May-Grünwald (contenant un
colorant acide, l'éosine, et un colorant basique, le bleu de
méthylène) et le Giemsa dilué au 1/10 (contenant lui
aussi de l'éosine, et un colorant basique, l'azur de
méthylène). Il existe deux colorants de Giemsa : le Giemsa rapide
(Giemsa R) et le Giemsa lent (Giemsa L). Le Giemsa R est préparé
de façon à permettre une action colorante en 10 minutes. Il est
utilisé pour les frottis secs et les gouttes épaisses. Le Giemsa
L est préparé de façon à permettre une action
colorante en 20 minutes. Il est utilisé pour les frottis humides et les
coupes.
Le May-Grünwald et le Giemsa anges neutres aux
propriétés bien distinctes. Ils ne sont pas actifs en milieu
alcoolique et n'agissent de façon sélective qu'au moment de leur
libération en solution aqueuse tamponnée de PH=7.
Cette libération provoque la précipitation des colorants neutres.
Le May-Grünwald colore les éléments acidophiles ainsi que
les granulations neutrophiles des leucocytes. Le Giemsa colore le cytoplasme
des monocytes, des lymphocytes et la chromatine des noyaux.
Mode opératoire
Il existe en général deux technique pour faire la
coloration du frottis sanguin. Ces deux techniques de
colorations se présentent comme suit :
· Technique de Coloration par
recouvrement
Elle consiste à :
- Couvrir le frottis avec l ml de May-Grünwald pur pendant 3
minutes
- Ajouter avec précautions 1 ml de solution tampon et
réaliser le mélange sans débordement
- Eliminer l'excès de colorant par égouttage ou
rinçage rapide.
- Couvrir le frottis avec la solution de Giemsa R dilué
dans une solution tampon au 1/30
- Laver rapidement à l'eau courante ou dans une solution
tampon
- Laisser la lame sécher à l'air.
- Attendre le séchage complet avant observation au
microscope.
· Technique de Coloration par bain
Elle consiste à :
- Faire un bain de May-Grünwald pur
- Faire un bain de Solution tampon
- Faire un bain de Giemsa R dilué dans une solution tampon
au 1/20
- Laver rapidement le frottis à l'eau courante ou dans une
solution tampon
- Laisser la lame sécher à l'air.
- Attendre le séchage complet avant observation au
microscope.
b) Les résultats de coloration
panoptique
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