5.2. Le diagnostic cellulaire :
Il repose d'une manière générale sur
la mise en évidence des conséquences cellulaires et/ou
biochimiques de l'état inflammatoire de la mamelle. (Jean Duval
2008)
5.2.1. Le dénombrement des
cellules du lait :
Les cellules présentes dans le lait sont pour la
majorité d'entre elles d'origine sanguine. Elles sont
représentées par les globules rouges (rares), les leucocytes
polymorphonucléaires neutrophiles surtout, acidophiles (rares),
basophiles (très rares), les leucocytes mononucléaires tels les
lymphocytes et les monocytes, les histiocytes, les macrophages et enfin les
cellules épithéliales, résultant de l'abrasion de
l'épithélium galactophore débris cellulaires ou les
bactéries par phagocytose.
Le comptage direct au microscope a été
délaissé au profit du comptage électronique plus rapide
réalisé sur le lait de mélange des quatre quartiers de
chaque vache du troupeau (CCI : Comptage Cellulaire Individuel),
réalisé dans le cadre du contrôle. (Hanzen
,2008)
5.2.2. Le système
Fossomatic :
Le système Fossomatic suppose la coloration
préalable de l'ADN des noyaux au moyen d'un colorant fluorescent, le
bromure d'éthidium,. La fluorescence rouge ainsi émise
après éclairement de la préparation au moyen d'une lampe
au xénon, est proportionnelle à l'ADN du noyau. Un
photomultiplicateur capte le signal fluorescent émis par les cellules et
le transforme en signal électrique. Ce système ne détecte
à peu près que les cellules inflammatoires puisque les amas de
caséine et les particules inertes ne fixent pas le bromure
d'éthidium. Les bactéries ont un ADN plus diffus qui émet
une lumière moins intense.L'appareil est calibré pour ne pas
enregistrer ces signaux de plus faible intensité. Ce système
permet l'analyse de 180 prélèvements par heure qui au
préalable doivent être homogénéisés par
agitation. (Schalm O.M et Lasmanis, 2008)
5.2.3 .Le test de la catalase :
L'action de la catalase des leucocytes et des
bactéries du lait sur le peroxyde d'hydrogène induit l'apparition
d'oxygène. La formation de 20, 30 et 40% de gaz correspondant
respectivement à la présence de 500000, 1.10 6 et 2 à 3.10
6 cellules par ml de lait. Cette méthode requiert assez bien de temps (3
heures environ) et un matériel assez coûteux. Par ailleurs,
après 24 heures de conservation, la formation de gaz
s'accroît. (Hanzen ,2008)
5.2.4. Le Californian Mastitis
test :
C'est une méthode sensible et rapide de
détection de lait anormalement riche en cellules. Elle a
été mise au point par SCHALM O.W et NOORLANDER D.O en 1957. C'est
une méthode simple qu'on peut pratiquer dans l'étable sur le lait
provenant d'un quartier, du mélange de lait des quartiers ou
mélange du lait de troupeau ,le principe consiste en un mélange
de lait et de teepol (détergent) en quantité égale pour
faire éclater les cellules dont les ADN nucléaires se
gélifient au contact de ce dernier. L'importance du gel est directement
proportionnelle au taux cellulaire du lait. Le pourpre de bromocrésol
(indicateur de pH) est souvent mélangé au réactif pour
faciliter la lecture. L'intensité de la réaction est notée
de- à +++ ou de 0 à 4. (Tableau 10). (Schalm et
Noorlander , 1957).
Tableau 10: Lecture de
notation du CMT et relation entre notation, comptage et lésions
mammaires (Schalm et Noorlander , 1957).
|
Réaction
|
Couleur
|
Notation
|
Résultats
|
Mamelle
|
|
PH
|
Taux cellulaire/ml (103)
|
Intensité de l'inflammation
|
Lésions
|
|
Aucun floculat
|
Gris
|
O ou -
|
6.5 - 6.5
|
200
|
Néant
|
Mamelle saine ou infection latente
|
|
Léger floculat transitoire
|
Gris
|
1ou+/-
|
6.6 - 6.7
|
200-500
|
Inflammation légère
|
Mamelle normale chez une vache à 7éme lactation
|
|
Léger floculat persistant
|
Gris violet
|
2 ou +
|
6.7 - 6.8
|
500-1000
|
Inflammation
D'origine traumatique ou infectieuse
|
Mammite sub clinique
|
|
Floculat épais adhérent
|
Violet
|
3 ou ++
|
6.8 - 7.0
|
1000-5000
|
Inflammation étendue
|
Mammite sub clinique et infection bien installée
|
|
Floculat type blanc d'oeuf, gélification
|
Violet foncé
|
4 ou +++
|
Plus de 7.0
|
Plus de 5000
|
Inflammation intense
|
Mammite clinique
|
| 
