4.6.2 Prélèvements des
échantillons tissulaires
Trois prélevements systématiques étaient
réalisés sur chaque piece de salpingectomie pour les GEU :
- Un prélevement de la muqueuse macroscopiquement saine
- Un prélevement de la zone de transition
- Un prélevement de la muqueuse lésée
Un prélevement systématique homogene de la
muqueuse tubaire était réalisé pour les trompes des
patientes constituant le groupe contrôle, obtenues lors des
hystérectomies d'hémostase, et des stérilisations
tubaires.
4.6.3 Prise en charge technique proprement dite :
Chaque piece a été traitée de la maniere
suivante : 4.6.3.1 La première étape est macroscopique
:
Apres la macroscopie, les pieces ont été
découpées en trois fragments pour les pieces de GEU et en un
fragment homogene pour les pieces de salpingectomie pour le groupe
témoin.
4-
Patiely Prince Darel Ray
Les fragments obtenus ont été placés dans
des cassettes portant un numéro d'enregistrement suivant l'ordre de
découpage, ainsi trois cassettes ont été
réalisées pour les trompes de GEU, et une cassette pour les
trompes des témoins.
4.6.3.2 Déshydratation
Les fragments obtenus ont été
déshydratés manuellement dans des bains d'alcool de concentration
croissante, alcools à 60°, 80°, 95°, 100° (alcool
absolu). Ils ont ensuite été éclaircis dans le
toluène puis protégés dans la paraffine.
4.6.3.3 Inclusion en paraffine
Apres la déshydratation les pièces ont
été incluses dans le bain de paraffine à 45° pendant
45 minutes. Pour créer une homogénéité de
consistance favorable pour les coupes au microtome et le maintien en place des
divers fragments prélevés. L'ensemble a été ensuite
déposé sur la plaque refroidissante pendant une heure. Les blocs
de paraffine obtenus étaient conservés à
température ambiante.
4.6.3.4 Coupes au microtome
Les fragments inclus en paraffine ont été
découpés avec le microtome de marque SHANDON, AS série
9305733; type 0325R) afin d'obtenir les rubans de paraffine de 3 à
5 microns dans lesquels un ou plusieurs tissus ont été choisis et
étalés sur lame.
4.6.3.5 Obtention des lames
Le ruban obtenu après microtomie a été
déposé sur un mélange d'eau albuminée
préalablement déposé sur une lame propre de type super
Frost + ou sur les lames classiques, ensuite les lames ont
été séchées et posées sur une plaque
chauffante pendant 5 minutes. Ainsi ont été obtenues les
lames.
4.6.3.6 Coloration à l'hémalun
éosine
La coloration à l'hémalun éosine a
été faite sur les lames classiques afin d'établir le
diagnostic histologique de la pièce sur les critères
histologiques standards. La lecture a été faite par un
anatomopathologiste assisté par un médecin
généraliste et de deux étudiants : un en
instance de soutenance pour l'obtention de la lilence en laboratoire et l'autre
en instance de soutenance pour l'obtention du diplôme de doctorat en
médecine. Cette coloration a l'hémalum nous a également
permis de selection des lames destinées à l'immuno
histochimie.
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