II.2.3.2.2 Mode opératoire.
Les réactifs et les échantillons sont maintenus
à la température ambiante pendant 10 à 20 min avant la
manipulation:
Flacon 1 (R1) : il est constitué d'hydroxyde de
sodium de concentration égale à 0.2mol/l
Flacon 2 (R2) : il est constitué d'acide picrique de
concentration égale à 20mmol/l.
Flacon 3 (Std) : le standard est constitué de
créatinine à une concentration de 2mg/dl.
(BIOLABO, 2011).
Le dosage nécessite :
- Le Blanc du réactif constitué de 500ul de R1
+ 500ul de R2 ,
- Le Standard, constitué de (500ul de R1 + 500ul de
R2) + 100ul d'Etalon ,
- L'Echantillon, constitué de (500ul de R1 + 500ul
de R2) + 100ul de Sérum
Le tableau 3 montre les volumes indiqués pour le
dosage.
Tableau 3: Mode opératoire du dosage de
la créatinémie (BIOLABO, 2011).
|
Blanc réactif
|
Standard
|
Echantillon
|
|
Soude 0,75 N (R1)
|
500ul
|
500 ul
|
500 ul
|
|
Acide picrique (R2)
|
500 ul
|
500 ul
|
500 ul
|
|
Etalon
|
-
|
100ul
|
-
|
|
Sérum
|
-
|
-
|
100ul
|
Mémoire de Master en Biologie Clinique
rédigé par: MIMBOE BILONGO CELINE SYLVIE
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Filtration glomérulaire chez des patients
diabétiques et/ou hypertendus suivis à l'Hôpital de
district de la Cité Verte:
dosages de la créatinémie,
protéinurie et urémie
Après calibration, par l'étalon du coffret (R3)
ou tout calibrant traçable sur une méthode standardisée et
introduction du sérum de contrôle fourni par le fabriquant ; les
échantillons homogénéisés sont passés au
spectrophotomètre en deux essais et lues à 520 nm (BIOLABO,
2011).
II.2.3.3 Détermination de la Clairance de la
Créatinine (ClCr).
La clairance de la créatinine est le volume virtuel de
sang ou de plasma complètement épuré de la
créatinine par unité de temps ; c'est un volume théorique
(120ml/min) qui permet de d'apprécier la filtration glomérulaire
(TRAWALE, 2013).
Le Débit de Filtration Glomérulaire (DFG) est le
volume de liquide filtré par le rein par unité de temps. C'est la
valeur qui permet de quantifier l'activité du rein.
Le DFG en ml/min standardisé pour 1,73m2 de
surface corporelle a été estimé par la clairance (Cl)
calculée de la créatinine (Cr) sanguine (ClCr), obtenue à
partir de la formule MDRD (Modification of the Diet in Renal Disease),
simplifiée et proposée par LEVEY et al (2000). Celle-ci
tient compte de la créatinine sérique, de l'âge, du sexe et
de la race du patient. Elle a été calculée automatiquement
grâce au logiciel eGFR calculator et consignée par de
nombreux laboratoires chaque fois que la mesure du taux de créatinine
sérique est demandée (TSINALIS et BINET, 2006 ; LEVEY et al.,
2000).
DFG (ml/min/1,73m2) = 186,3 x
(créatinémie / 88,4) -1,154 x (âge)
-0,203x (0,742 si femme) x (1,212 si sujet noir)
- Age en année, poids en Kg, créatinémie en
umol/l.
- Pour convertir la créatinine plasmatique de umol/l en
mg/dl, il est nécessaire de diviser par 88,4 qui est le facteur de
conversion.
- Si créatinémie en mg/l, diviser la
créatinémie par 10.
Trois groupes de patients ont été définis
selon le DFG comme suit :
Groupe 1 : DFG abaissé ClCr< 90ml/min/1,73m2
;
Groupe 2 : DFG normal 90 = ClCr = 140
ml/min/1,73m2;
Groupe 3 : Hyper filtration glomérulaire ClCr>
140ml/min/1,73m2
L'insuffisance rénale est définie par une ClCr<
60ml/ min / 1,73m2 (ATEBA, 2012).
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