Memoire Online - Evaluation in vitro des propriétés antifalcémiantes et antihémolytiques de l'extrait aqueux de spirulina platensis (oscillatoriaceae) du Cameroun

M . T C H O U L E G H E U F r a n ç o i s E m i l e e t M m e T C H O U L E G H E U Jeannette

L a réalisation d e c e t r a v a i l n ' a u r a i t p a s été possible sans l'aide d e plusieurs personnes à qui j'adresse mes sincères rem e r c i e m e n t s .

+ l e P r . M O U N D I P A FEW O U Paul, Chef d e D é p a r t e m e n t d e Biochimie e t tous les

enseignants, pour l ' e n c a d r e m e n t e t l e s enseignements d e qualité reçus p e n d a n t m a formation ;

+ l e P r . P I E M E Constant Anatole pour m'avoir intégré dans l e Laboratoire d e

Biochimie d e l a Faculté d e M é d e c i n e e t des Sciences B i o m é d i c a l e s , d ' a v o i r accepté d e diriger c e travail, pour s a rigueur scientifique, ses conseils, s a disponibilité, son enthousiasme, s a patience e t son attention apportées à m e s s o l l i c i t a t io n s p e n d a n t c e t r a v a i l , t r o u v e z i c i p r o f e s s e u r l'expression d e m a profonde gratitude ;

+ l e P r . B I A P A N Y A Prospère pour son e n c o u r a g e m e n t e t son expertise apporté pour

+ l e D r . K O TUE T A P T U E Charles e t l e D r . G U E G U I M Cédric d e m'avoir orienté

chez u n encadreur b i e n v e i l l a n t , p a s s i o n n é par l a recherche, par u n t r a v a i l p o i n t i l l e u x e t aussi pour leurs e n c o u r a g e m e n t s quotidien tout a u long d e c e travail ;

+ l e D r . C H E T C H A Bernard pour avoir facilité mon autorisation administrative d e

recherche a u service d ' H é m a t o - O n c o l o g i e d e l ' H ô p i t a l C e n t r a l d e Yaoundé ;

+ l e personnel d u Laboratoire d e Biochimie d e l a Faculté d e M é d e c i n e e t des Sciences

B i o m é d i c a l e s d e l'Université d e Yaoundé 1 dans lequel l'ensemble d e nos tests a été effectué ;

+ tous mes aînés d e laboratoire principalement, N Y A N K W I K E U Prudence,

Y E M BEAU L é n a Natacha, K E N G N E F O T S I N G Christian, T C H O U P O Arnaud, F E U D J I O A l f l o d i t t e Flore, N A N F A C K Pauline, N GONG A N G B e a t r i c e , dont les conseils, les critiques e t les e n c o u r a g e m e n t s m ' o n t é t é d'une aide précieuse ;

+ tous mes camarades d e promotion, merci pour votre solidarité e t votre contribution à

M e s sincères rem e r c i e m e n t s e t gratitudes vont é g a l e m e n t à l'endroit d e :

+ mes parents pour l ' é d u c a t i o n , l e s e n c o u r a g e m e n t s , l e soutien quotidien d e toute nature

+ m e s a î n é s S A N K O T C H O U L E G H E U C h i m è n e , W E P E Y O U T C H O U L E G H E U Willy, T C H A M D J O U T C H O U L E G H E U Hermance, TATA T C H O U L E G H E U H y p p o l i t e , N O U B E Y O U T C H O U L E G H E U G a ë l l e , K A M D O U M T C H O U L E G H E U Prince, N G U E U D J I T C H O U L E G H E U V a l è r e , qui ont toujours été l à pour m e soutenir

f i n a n c i è r e m e n t e t m a t é r i e l l e m e n t , m ' encourager dans les moments les plus difficiles q u i f u r e n t pour m o i l e s gages d e réussite ;

+ mes t a n t e s M m e N G A M E N I E v o d i n e , T A P O K O Angèle p o u r l ' a m o u r , l e soutien e t

+ l a famille G O Y A P Roger e t l a f a m i l l e K A M P C H I M i c h e l , p o u r l ' a c c u e i l c h a l e u r e u x ,

l e soutien qu'elle m ' a accordé d e m a p r e m i è r e année à l'Université jusqu'à nos jours ;

+ l a grande f a m i l l e T C H O U L E G H E U , K E M ENI, N D J I L E pour l e soutien d e tous les

+ mes amis S I E W E T C H I E N C H E U Rosine, N G O U A M O U D J O N G O U Stafford, L E U S S I Franck, Y E M BEAU Sylvie, N O U D J A T C H E U B I A W A S t è v e , T A D I E U Christian, C H U I S S E U Hans, D A D E W O U Paul, D J U I K O U Aim é r a n c e , D O U A N G U E Stéphanie, K O N L A C K O r n e l l a , Z O A Thierry Alexis, F A A B E C O Isaac, N G A M E N I Adrien, N K E N M ENI Célestin qui ont toujours été l à pour m e soutenir e t m'encourager dans les moments difficiles ;

+ tous les patients d r é p a n o c y t a i r e s d u service d ' H é m a t o - O n c o l o g i e d e l ' H ô p i t a l C e n t r a le

d e Yaoundé pour l e don d e sang u t i l i s é p o u r l a réalisation d e c e travail ;

+ tout l e personnel d u service d ' H é m a t o - Oncologie d e l'Hôpital Central d e Y a o u n d é pour

leur e n c o u r a g e m e n t e t assistance pour les p r é l è v e m e n t s d e nos échantillons

+ tous ceux dont les noms n e figurent pas ici e t qui ont d'une manière o u d'une autre

contribué à l a réalisation d e c e travail, veuillez accepter mes sincères excuses e t toute m a reconnaissance e n votre égard;

I .1 .1 . D é f i n it i o n e t historique d e la d r é p a n o c y t o s e 4

I .1 .3 . E p i d é m i o l o g i e e t étiologie d e l a d r é p a n o c y t o s e 8

I .2 .1 . Fonction des globules rouges e t rôle d e l a membrane é r y t h r o c y t a i r e 1 8

I I .3 .2 . Collecte des échantillons d e sang chez les sujets d r é p a n o c y t a i r e s 2 9

I I .3 .3 . Evaluation i n vitro des propriétés a n t i f a l c é m ia n t e s d e l'extrait aqueux d e S p i r u l i n a

I I .3 .4 . Evaluation i n vitro d e l'activité a n t i h é m o l y t i q u e d e l'extrait aqueux d e S p i r u l i n a

I I .4 . A N A L Y S E S STATISTIQUES E T EXPRESSION DES R E S U L T A T S 3 5

I I I .1 .2 . Effet d e L ' extrait aqueux d e S p i r u l i n a p l a t e n s i s à différentes concentrations sur l a

Figure 1 : Distribution historique e t c o n t e m p o r a i n e d e la d r e p a n o c y t o s e 9

Figure 3 : Schéma physiopathologique d e l a d r é p a n o c y t o s e 1 2

Figure 4 : E c h a n g e s d e l a membrane é r y t h r o c y t a i r e . 2 0

F i g u r e 5 : Photographie d e l a ferme d e production d e spiruline d e N o m a y o s - C a m e r o u n . 2 6

Figure 7 : Pourcentage d'induction d e l a f a l c i f o r m a t i o n e n fonction d u temps d'induction des

Figure 8 : Pourcentage d e l a f a l c i f o r m a ti o n e n fonction d e l a concentration e n extrait e t d e l a

Figure 9 : Etat morphologique des hématies d'un d r é p a n o c y t a i r e observées a u microscope

Figure 1 0 : T aux d'inhibition d e l a f a l c i f o r m a t io n e n fonction d e l a concentration d'extrait e t

Figure 1 1 : T aux d e réversibilité d e l a f a l c i f o r m a t i o n après 2 h e n fonction d e l a concentration.

Figure 1 2 : T aux d e réversibilité d e l a f a l c i f o r m a t i o n après 4 h e n fonction d e l a concentration.

Figure 1 3 : Taux d e réversibilité de la f a l c i f o r m a t i o n a p r è s 2 4 h e n fonction d e l a concentration.

F i g u r e 1 4 : T a u x d e r é v e r s i b i li t é e n f o n c ti o n d u t e m p s à l a c o n c e n t r a t i o n 8 0 0 u g / m L . 4 1

F i g u r e 1 5 : T a u x d e r é v e r s i b i li t é e n f o n c ti o n d u t e m p s à l a c o n c e n t r a t i o n 1 6 0 0 u g / m L . 4 2

Figure 1 6 : Pourcentage d ' h é m o l y s e induite par différentes concentrations d'aspirine . 4 3

Figure 1 7 : Pourcentage d ' h é m o l y s e induite par l'aspirine ( 0 ,7 m g / m L ) e n présence d e l'extrait.

Figure 1 8 : T aux d'inhibition d e l'extrait sur l ' h m o l y s e induite par l'aspirine 0 ,7 m g /m L . 4 4

Figure 1 9 : Pourcentage d'hémolyse e n fonction d e l a concentration e n N a C l . 4 5

Figure 2 0 : T aux d'inhibition d e l'extrait sur l ' h é m o l y s e induite par l e milieu hypotonique

Figure 2 1 : Pourcentage d'hémolyse e n fonction d e l a concentration d u triton-100 . 4 7

Figure 2 2 : Taux d'inhibition d e l'extrait sur l'hémolyse induite par l e triton-100 à l a

Figure 2 3 : Pourcentage d'hémolyse e n fonction d e l a concentration e n peroxyde d'hydrogène.

Figure 2 4 : Taux d'inhibition d e l ' e x t r a i t s u r l'hémolyse induite par le p é r o x y d e d'hydrogène

T a b l e a u 2 : Classification taxonomique d e S p i r u li n a p l a t e n s is 2 6

A F S S A P S : Agence Française d e Sécurité Sanitaire des Produits d e Santé

C R E R S H : Com i t é Régionale d ' E t h i q u e d e l a Recherche pour l a Santé Hum aine d u Centre

I E C D : I n s t i t u t E u r o p é e n d e Coopération e t d e Développement

N A D P H : N i c o t i n a m i d e A d é n i n e D i n u c l é o t i d e Phosphate ( réduit)

L a d r é p a n o c y t o s e est une maladie génétique très répandue e n Afrique, à laquelle s'associe une anémie hémolytique chronique e t des complications v a s o - o c c l u s i v e s e t infectieuses. Les moyens d e prise e n charge e t traitements usuels les plus utilisés, les transfusions sanguines, l ' a l l o g r e f f e sont c o u t e u x e t prédisposent les malades aux risques d'infections. C'est dans l e cadre d'optimiser l a prise e n charge d e cette maladie par les substances naturelles que cette étude a été réalisée e n vue d e d é t e r m i n er l'activité a n t i f a l c é m i a n te e t a n t i h é m o l y t iq u e d e l'extraits aqueux d e S p i r u l i n a p l a t e n s i s d u C a m e r o u n . L a spiruline récoltée à Nom a y o s - Y a o u n d é a été séchée, broyée e t macérée pendant 2 4 h dans d e l'eau distillée e t l e filtrat a été lyophilisé. L a détermination des taux d'inhibition d e l a f a l c i f o r m a t io n induite par le m é t a b i s u l f i t e d e sodium ( M B S ) 2 % e t d u taux d e réversibilité a été effectuée à des concentrations d e 1 0 0 , 2 0 0 , 4 0 0 , 8 0 0 e t 1 6 0 0 u g / m L d'extrait d e spiruline e t à différents temps ( 2 h , 4 h e t 2 4 h ) . L ' activité a n t i h é m o l y t i q u e induite d e l'extrait a été étudiée à l a concentration 8 0 0 u g / m L e t 1 6 0 0 u g / m L , par l a méthode c o l o r i m é t r i q u e avec différents inducteurs tels que l'aspirine, l a solution hypotonique, l e triton X - 1 0 0 e t l e peroxyde d'hydrogéné. L e rendement d'extraction était d e 1 4 ,0 1 5 % . L a durée maximale d e f a l c i f o r m a t io n induite était d e 2 h 3 0 e t l e pourcentage d e f a l c i f o r m a t io n est passé d e 2 7 ,9 9 #177; 3 ,1 5 % ( a u temps initial) à 9 1 ,4 4 #177; 3 ,7 0 % soit u n taux d e 6 9 ,3 % d'induction d e l a f a l c i f o r m a t io n . L e taux d'inhibition d e l a f a l c i f o r m a ti o n après 2 h 3 0 variait d e 1 5 ,1 0 #177; 0 ,6 0 % à 6 6 ,0 9 #177; 4 ,6 9 % pour l a concentration d e 1 0 0 u g / m L à 1 6 0 0 u g / m L d ' e x t r a i t d e s p i r u l i n e . C e taux d'inhibition d e l a f a l c i f o r m a t io n s'est révélé dose-dépendant. L a meilleure concentration d e l'extrait était d e 1 6 0 0 u g / m L . Concernant les résultats d e taux d e réversibilité d e l a f a l c i f o r m a t io n à des concentrations d e 8 0 0 u g / m L e t 1 6 0 0 u g / m L , i l s v a r i a i e n t d e 3 7 ,5 4 #177; 6 ,3 5 % à 8 2 ,3 4 #177; 5 ,6 3 % e n fonction d u t e m p s . L a concentration 1 6 0 0 u g / m L d'extrait d e spiruline était l a plus active après 2 4 h . E n outre, l'extrait a d é m o n t r é u n effet a n t i h é m o l y t i q u e significatif ( p < 0 ,0 5 ) par rapport a u contrôle négatif sur tous les inducteurs. E n fonction d e chaque i n d u c t e u r , n o u s avons obtenu r e s p e c t i v e m e n t p o u r l e s c o n c e n t r a t i o n s 8 0 0 u g / m L e t 1 6 0 0 u g / m L

d'extrait d e spiruline les taux d'inhibition d e l'hémolyse suivants : 5 3 .0 3 #177; 9 ,4 6 % e t
9 6 ,6 7 #177; 5 ,7 7 % ( l'aspirine) ; 8 0 #177; 8 ,6 6 % e t 7 1 ,2 5 % ( l a solution hypotonique) ; 3 6 ,5 6 #177; 9 ,5 3 % e t 4 5 ,6 7 #177; 2 2 ,5 5 % ( l e triton-100) ; 2 4 ,2 6 #177; 9 ,5 5 % e t 3 6 ,7 6 #177; 1 ,2 7 % ( l e peroxyde d'hydrogéné).

M o t s clés : D r é p a n o c y t o s e , S p i r u l i n a p l a t e n s i s , activité a n t i f a l c é m i a n t e , activité

Sickle-cell anaemia i s a widespread genetic disease i n Africa, which i s a s s o c i a t e d w i t h chronic haemolytic anaemia and v a s o - o c c l u s i v e and infectious complications. The most commonly used means o f m a n a g e m e n t a n d t r e a t m e n t , b l o o d transfusions and a l l o g r a f t i n g are expensive and predispose patients t o the risk o f infection. I t i s within the framework o f optimising the m a n a g e m e n t o f t h i s disease b y natural substances that this study was conducted t o d e t e r m ine the a n t i f a l c e m i c and a n t i h e m o l y t i c activity o f aqueous extracts o f S p i r u l i n a p l a t e n s i s from Cameroon. The S p i r u l i n a harvested i n N o m a y o s - Y a o u n d é was dried, crushed and m a c e r a t e d for 2 4 hours i n distilled water and the filtrate was freeze-dried. Determination o f the inhibition rates o f f a l c i f o r m a t i o n induced b y sodium m e t a b i s u l f i t e ( M B S ) 2 % and the reversibility rate was carried out a t concentrations o f 1 0 0 ,2 0 0 ,4 0 0 ,8 0 0 and 1 6 0 0 u g / m L o f

s p i r u l i n a extract and a t d i f f e r e n t t i m e s ( 2 h , 4 h and 2 4 h ) . The induced a n t i h e m o l y t i c activity o f the e x t r a c t w a s studied a t 8 0 0 u g / m L and 1 6 0 0 u g / m L c o n c e n t r a t i o n , b y the c o l o r i m e t r i c m e th o d w i t h different inducers such a s aspirin, h y p o t o n i c solution, triton X - 1 0 0 and hydrogen p e r o x i d e . The extraction y i e l d w a s 1 4 .0 1 5 % . The maximum duration o f i n d u c e d f a l c i f o r m a t i o n w a s 2 h 3 0 and the percentage o f f a l c i f o r m a t i o n increased from 2 7 .9 9 #177; 3 .1 5 % ( a t the initial time) t o 9 1 .4 4 #177; 3 .7 0 % , giving a f a l c i f o r m a ti o n induction rate o f 6 9 .3 % . The f a l c i f o r m a t io n inhibition rate a f t e r 2 h 3 0 ranges from 1 5 .1 0 #177; 0 .6 0 % t o 6 6 .0 9 #177; 4 .6 9 % for the concentration o f 1 0 0 u g / m L

t o 1 6 0 0 u g / m L o f s p i r u l i n a extract. This rate o f inhibition o f f a l c i f o r m a ti o n was found t o b e dose-dependent. The best concentration o f the extract i s 1 6 0 0 u g / m L . The results for the reversibility rate o f f a l c i f o r m a t io n a t c o n c e n t r a t i o n s o f 8 0 0 u g / m L and 1 6 0 0 u g / m L varied from 3 7 .5 4 #177; 6 .3 5 % t o 8 2 .3 4 #177; 5 .6 3 % a s a function o f t i m e . T h e 1 6 0 0 u g / m L concentration o f s p i r u l in a

extract was the most active after 2 4 hours. I n a d d i t i o n , t h e extract demonstrated a significant a n t i h e m o l y t i c effect ( p < 0 .0 5 ) compared t o the negative control o n all inducers. According t o each inducer, w e obtained respectively for the concentrations 8 0 0 u g / m L and 1 6 0 0 u g / m L o f
s p i r u l i n a e x t r a c t t h e following rates o f i n h i b i t i o n o f h e m o l y s i s : 5 3 . 0 3 #177; 9 .4 6 % and 9	6 .6	7 #177; 5	.7 7	%
( t h e a s p i r i n ) ; 8 0 #177; 8 .6 6 % a n d 7 1 .2 5 % ( t h e h y p o t o n i c s o l u t i o n ) ; 3 6 .5 6 #177; 9 .5 3 % a n d 4 5	.6 7	#177; 2 2	.5 5	%
( the triton X - 1 0 0 ) ; 2 4 .2 6 #177; 9 .5 5 % and 3 6 .7 6 #177; 1 .2 7 % ( the hydrogen peroxide).

Key words: Sickle cell disease, S p i r u l i n a p l a t e n s i s , a n t i f a l c e m ic activity, a n t i h e m o l y tic activity.

L a d r é p a n o c y t o s e est une affection génétique héréditaire grave à transmission a u t o s o m ale récessive dans laquelle les globules rouges prennent l a form e d e faucille a u lieu d e leur forme normale d e disque. C ' e s t une h é m o g l o b i n o p a t h i e qui est due a u r e m p l a c e m e n t d e l'acide glutamique hydrophile par l a valine hydrophobe e n position six d e l a chaîne J d e l'hémoglobine. Cette substitution modifie son affinité pour l'oxygène e t s a solubilité dans les conditions d e faible pression e n oxygène. I l s'en suit une p o l y m é r i s a t i o n e n t r a i n a n t l a f a l c i f o r m a t io n des globules ( H u y n h - M o y n o t , 2 0 1 1 ) . Une fois f a l c i f o r m é s ces globules rouges contenant l'hémoglobine S ( H b S ) acquièrent une structure rigide qui n e leur permet pas d e circuler facilement dans les petits vaisseaux, c e qui cause une v a s o - o c c l u s i o n e t les complications diverses d e l a maladie ( N a y a l e x , 2 0 1 4 ) . I l s ' a g i t e n effet des crises douloureuses, d e l a susceptibilité accrue aux infections, d e l ' h y p e r h é m o l y s e provoquant l'anémie, d e l a production accrue des radicaux libres e n d o g è n e s , p r i n c i p a l e m e n t l e radicale ° O H qui est l e plus abondant chez les d r é p a n o c y t a i r e s ( K a u r e t a l ., 2 0 1 3 ) .

Selon l ' O M S , dans l e monde, cette h é m o g l o b i n o p a t h i e touche plus d e 5 0 millions d e personnes sous l a form e h o m o z y g o t e s S S , e t 2 5 0 millions des porteurs hétérozygotes A S . S e l o n l'organisation mondiale d e l a lutte contre l a d r é p a n o c y t o s e , 5 0 0 milles enfants d r é p a n o c y t a i re s n a i s s e n t c h a q u e année d o n t 4 0 0 milles e n Afrique ( O M S , 2 0 1 1 ) . L a d r é p a n o c y t o s e c o n n a î t u n e p r é v a l e n c e maximale e n Afrique sub-saharienne e t constitue aujourd'hui u n r é e l p r o b l è m e d e santé publique pour l a plupart des pays noirs a f r i c a i n s . E n Afrique centrale e t d e l'Ouest, 2 0 à 4 0 % des sujets sont porteurs d u trait d r é p a n o c y t a i r e . A u Cam e r o u n , l a p r é v a l e n c e d u trait d r é p a n o c y t a i r e e s t e s t i m é e à 2 5 - 3 0 % dans s a forme hétérozygote A S , e t d e 2 % dans s a forme homozygote S S ( I E C D , 2 0 1 6 ) . E n Afrique e n général e t a u Cam e r o u n e n particulier, cette h é m o g l o b i n o p a t h i e est u n réel problème d e santé publique car, l a d r é p a n o c y t o s e S S reste très meurtrière: 5 0 % à 9 0 % des enfants d r é p a n o c y t a i r e s décèdent avant leur 5 è m e anniversaire s'il n e s o n t p a s pris e n charge ( M c G a n n e t a l ., 2 0 1 7 ) .

L a prise e n charge a u Cam e r o u n s e fait dans quelques centres hospitaliers. M ais l e nombre reste très limité par rapport à l a p r é v a l e n c e d e cette pathologie e t l'accès même à ces centres n'est pas aisé pour l a population rurale. L a prise e n charge prend e n compte l'aspect p r é v e n t i f p a r l a s u p p l é m e n t a t i o n e n f o l a t e s , l a prévention des infections, l'hydratation orale par l'eau alcaline, l e repos, l a mise sous oxygène, l e maintien à chaud, l a prescription des

antalgiques, l a transfusion sanguine lorsque l e taux d ' h é m o g l o b i n e est bas e t l e volet curatif consiste à l a greffe d e l a moelle osseuse e t l a thérapie génétique ( P i e l e t a l ., 2 0 1 7 ) .

Cependant, les différents t r a i t e m e n t s préconisés aux malades présentent d e nom b r e u s e s limites tant a u niveau d u coût que des risques liés aux problèmes d'incompatibilités e t d e toxicité médicamenteuse. Face à tout ceci, les patients s e tournent vers les plantes pour s e soigner. E n e f f e t , d e p u i s des m i l l é n a i r e s , l ' h o m m e utilise les plantes à des fins thérapeutiques. Les travaux d e Ram dé-Tiendrébéogo e t a l . ( 2 0 1 8 ) ont montré que 2 m g / m L d u macéré h y d r o é t h a n o l i q u e des feuilles d e Ficus s y c o m o r u s ( utilisées e n médecine traditionnelle a u B u r k i n a F a s o dans l e t r a i t e m e n t d e l a d r é p a n o c y t o s e ) avait une activité d e inhibition d e 3 1 ,0 2 #177; 0 ,0 0 % tandis que celle d e 3 m g / m L d u décocté aqueux des feuilles était d e 2 2 ,5 #177; 0 ,0 0 % . T hep h i n l a p e t a l ., ( 2 0 1 3 ) ont révélé que 3 1 2 5 11 g / m L d'extrait d e feuille d e P a n d a n o u s o d o r u s p a n d a n u s peut inhiber 8 3 ,2 5 % d'hémolyse induite par l'ion ferreux. K o t u e e t a l ., ( 2 0 1 4 ) ont mis e n exergue que 2 7 4 0 11 g / m L d'extrait d ' H e m o d y a avait une activité d e 7 2 ,4 1 % d'inhibition

d e l a f a l c i f o r m a t i o n , 6 4 ,4 7 % d e réversibilité, 5 5 ,3 7 % d'inhibition d e l'activité d u lactate déshydrogénase e t 3 5 ,2 4 % d'amélioration d u r a p p o r t F e 2 + / F e 3 + . U n e étude m e n é e p a r N a n f a c k

e t a l . ( 2 0 1 3 ) avec les extraits aqueux d e Z a n t h o x y l l u m h e i t z i i montre que cette dernière inhiberait 3 9 ,5 % d e f a l c i f o r m a t io n e t aurait aussi des propriétés reverses. Par ailleurs i l a été d é m o n t r é que 5 3 u g / m L d'extrait d e composés phénoliques d e P h a s e o lus v u l g a r u s L ont des

propriétés a n t i f a l c é m i a n te s , a n t i o x y d a n t e s e t d e stabilité m e m b r a n a i r e avec

8 2 ,2 6 #177; 2 ,0 % d'inhibition d e l a f a l c i f o r m a t i o n e t 6 9 ,8 6 #177; 3 ,5 % d e réversibilité d e l a

f a l c i f o r m a t io n ( N k e n m e n i e t a l ., 2 0 1 9 ) . C ' e s t fort d e tout c e qui précède que l e présent travail, dans l e b u t d e c o n t r i b u e r à l ' a m é l i o r a t io n d e l a p r i s e e n charge d e l a m a l a d i e , n o u s n o u s sommes proposés d'étudier les propriétés a n t i f a l c é m i a n t e s e t a n t i h é m o l y t i q u e s d e S p i r u l i n a p l a t e n s i s .

S p i r u l i n a p l a t e n s i s , p l u s couramment appelée l a spiruline est une algue bleu-verte d e l a f a m i l l e des c y a n o b a c t é r i e s faisant partie des plus anciennes form e s d e vies terrestres ( D o u d o u , 2 0 0 8 ) . Elle est douée des vertus nutritionnelles e t thérapeutiques. Elle est utilisée dans l a réhabilitation n u t r it i o n n e l l e , p o u r l e r e n f o r c e m e n t d u s y s t è m e immunitaire, e t dans l a protection contre l e cancer e t l'hypertension artérielle ( H T A ) ( G i r a r d i n , 2 0 0 5 ; F a l q u e t e t H u r n i , 2 0 0 6 ; A m a e t a l ., 2 0 1 6 ) . Plusieurs raisons j u s t i f i e n t l ' i n t é r ê t p o r t é sur l a Spiruline dans notre étude. E n effet l'extrait aqueux d e S p i r u l i n a p l a t e n s i s d u Cam e r o u n est riche e n m a c r o n u t r i m e n ts , m i c r o n u t r i m e n ts e t composés p h y t o c h i m i q u e s b i o a c t i f s p a r m i s lesquels les p o l y p h é n o l s , les f l a v o n o ï d e s , l a bêta carotène, l a p h y c o c y a n i n e , les acides phénoliques e t l e calcium s p i r u l a n doués d'activités a n t i o x y d a n t e s ( A m a e t a l ., 2 0 1 6 ) . Par ailleurs une étude ressente révèle que

l a s u p p l é m e n t a t i o n e n spiruline perm e t d e réduire l e nombre d e crise, d e transfusion sanguine e t d'hospitalisation chez les enfants d r é p a n o c y t a i r e s ( M a l a m e t a l ., 2 0 1 7 ) . Cependant aucune étude n ' a mis e n exergue i n vitro l e mode d'action d e l a spiruline sur les hématies des d r é p a n o c y t a i r e s . P o u r m e n e r c e t t e é t u d e , n o u s avons é m i s h y p o t h è s e selon laquelle :

L'extrait aqueux d e S p i r u l i n a p l a t e n s i s a des propriétés a n t i f a l c é m i a n t e s e t

Pour vérifier cette hypothèse nous nous sommes fixés pour o b j e c t i f g é n é r a l d'étudier i n vitro les propriétés a n t i f a l c i m ia n t e s e t a n t i h é m o l y t i q u e s d e l'extrait aqueux d e S p i r u l i n a platens i s .

? d é t e r m i n er i n vitro l'effet d e l'extrait aqueux d e S p i r u l i n a p l a t e n s i s sur l a f a l c i f o r m a tio n

des hématies ( l'inhibition e t l a réversibilité d e l a f a l c i f o r m a t io n des hématies) ;

? d é t e r m i n er i n vitro l'activité a n t i h é m o l y t i q u e d e l'extrait aqueux d e S p i r u l i n a p l a t e n s is

sur les g l o b u l e s r o u g e s e n présence des différents inducteurs d'hémolyse ( milieu hypotonique, triton X - 1 0 0 , peroxyde d'hydrogène e t l'aspire).

Evaluation in vitro des propriétés antifalcémiantes et antihémolytiques de l'extrait aqueux de spirulina platensis (oscillatoriaceae) du Cameroun

CHAPITRE I : R E V U E D E L A LITTÉRATURE