2.3.1.1. Préparation des extraits de plante
Les extraits aqueux et éthanolique de chaque plante ont
été repris dans de l'eau distillée à raison de
100 mg pour 1 ml. La stérilité des solutions
mères d'extraits a été vérifiée en
ensemençant deux (02) aliquotes de chaque solution sur le milieu Mueller
Hinton et incubée à 37 °C pendant 24 heures.
L'absence de colonies sur le milieu Mueller Hinton après 48 heures
a confirmé la stérilité de ces solutions mères
d'extraits (Agbankpe et al., 2016).
2.3.1.2. Rendement à l'extraction
Le rendement de l'extrait brut est défini comme
étant le rapport entre la masse de l'extrait sec obtenue et la masse du
matériel végétal traité (Baxter et
al.,1998). Ce rendement a été calculé via
l'équation :
R(%) : Rendement en %
Me : Masse de l'extrait après l'évaporation
du solvant
Mv : Masse de la matière végétale
utilisée pour l'extraction
2.3.2.
Tests de cytotoxicité
L'effet cytotoxique des extraits a été
évalué suivant une adaptation de la méthode décrite
par Dougnon (2013). Les tests ont été réalisés sur
des larves obtenues par éclosion de 10 mg d'oeufs de Artemia
salina (ARTEMIO JBL GmbH D-67141 Neuhofem) sous agitation continue dans
1 l d'eau de mer pendant 72 h. A 1 ml de chaque dilution en
série géométrique de raison ½ d'extrait
préparé à partir d'une solution mère de
20 mg/ml, dans l'eau de mer, a été ajouté 1 ml
d'eau de mer contenant 16 larves. Le nombre de larves survivantes a
été dénombré après 24 h d'incubation.
La CL50a été déterminée
à partir de la droite de régression obtenue de la courbe
représentative du nombre de larves survivantes en fonction de la
concentration des extraits. Chaque essai a été
réalisé en double, suivi d'un témoin contenant 1 ml
d'eau de mer contenant 16 larves à laquelle est ajouté
1 ml d'eau distillée.
Pour interpréter ces résultats, des grilles de
corrélation associant le degré de toxicité à la
CL50 ont été proposées -(Moshi et al., 2004).
Tableau XI : Correspondance entre
CL50 et toxicité
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CL50
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Toxicité
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CL50 > 0,1 mg/ml
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- (Non-toxique)
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0,1 mg/ml > CL50 _
0,050 mg/ml
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+ (moins toxique)
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0,050 mg/ml > CL50_0,01 mg/ml
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++ (Toxicité
modérée)
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CL50 < 0,01 mg/ml
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+ + + (Forte toxicité)
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