IV- LA SEROLOGIE
? Obtention du sérum
Les examens sérologiques sont les examens
effectués sur le sérum. Après réaction, il y a
formation des complexes Ag-AC sous forme d'agglutination, de
précipitation ou formation du complément. L'obtention du
sérum se fait après centrifugation du sang recueilli dans un tube
sec.
? Principe de la centrifugation
Les constituants du mélange sont soumis à la
gravité, à la poussée d'Archimède et à
l'agitation moléculaire. Lorsque la centrifugeuse est mise en marche, la
force centrifuge imprime une vitesse de sédimentation à chaque
constituant du mélange. Les constituants du mélange
sédimentent en fonction de leur densité et leur poids
moléculaire. L'intérêt de la centrifugation dans un
laboratoire est de permettre la séparation des échantillons
biologiques afin d'obtenir le culot ou le surnageant pour l'analyse.
A- TESTS DE SEROLOGIE HIV
1- Dépistage rapide du VIH
Le SIDA est une maladie causée par le VIH et se
caractérise par une diminution de la population de lymphocytes T. Chez
les personnes infectées, le virus détruit les cellules T-Helpers,
exposant ainsi le patient aux infections opportunistes et aux cancers. Le VIH-1
et le VIH-2 sont responsables de la maladie et leur présence dans le
sang induit la production des anticorps spécifiques dirigés
contre eux. Le dépistage rapide se fait sur la bandelette Abbott
détermine VIH-1 /2 dont la description sera fait.
2- Principe de la méthodologie
Le kit Abbott Détermine VIH-1/2 est un test
Immuno-chromatographique pour la détection qualitative des anticorps
antiVIH1 et antiVIH2. L'échantillon déposé sur la zone de
dépôt migre vers la zone de dépôt du conjugué,
il se reconstitue et se mélange avec le conjugué colloïde de
sellenium-d'antigène. Ce mélange continue à migrer sur la
phase solide
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jusqu'aux antigènes recombinants immobilisés et
aux peptides synthétiques au niveau de la zone du patient.
B- TEST DE CHLAMYDIA IG
Le chlamydia est une infection bactérienne
causée par une multitude de bactérie donc le plus connu est
Chlamydiae trachomatis. La maladie se manifeste par une miction
douloureuse, des douleurs de bas ventre chez la femme et un écoulement
génital inhabituel. Le dépistage est basé sur les
réactions Ag-AC dont nous allons décrire celle qui se passe dans
la trousse Immunocomb.
1- Principe
Lorsque les anticorps anti Chlamydiae
trachomatis contenus dans le sérum sont introduits dans la
phase mobile (bac de développement), ils migrent vers les spots
correspondants de la phase stationnaire (dents de peignes) à la surface
desquels sont sensibilisés les antigènes de la chlamydiae
trachomatis et forment des complexes Ag-AC qui sont visibles
après révélation.
2- Mode opératoire
Le test débute par la distribution de 10 ul de
sérum dans le puits A du bac de développement (phase mobile). La
dent du peigne (phase stationnaire) est ensuite introduite dans ce puits, puis
transférée successivement dans les autres puits allants
jusqu'à F en respectant la durée indiquée sur la notice
dont voici le résumé (tableau 4) :
Tableau 4: Mode opératoire du test de
chlamydia
ETAPE COMPARTIMENT OPERATION
Réaction Ag-AC A Homogénéiser, incuber 10
min, absorbé
Lavage B Agiter, incuber 2 min, absorbé
Conjugué C Homogénéiser, incuber 20 min,
absorbé
Lavage D Agiter, incuber 2 min, absorbé
Lavage E Agiter, incuber 2 min, absorbé
Révélation F Homogénéiser, incuber 10
min, absorbé
Réaction d'arrêt G Incuber 1 min, sécher
à l'air
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TROISIEME PARTIE :
METHODES DE DIAGNOSTIC
DES MALADIES
PARASITAIRES
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