Chap. III. MATERIELS ET METHODES
3.1. MATERIELS
Pour atteindre nos objectifs et vérifier nos
hypothèses, les matériels ci-dessous nous ont été
indispensables :
. Un laboratoire de bactériologie pour les analyses des
selles et de l'eau
· Un questionnaire d'enquête adressé aux
malades
· Une grille d'observation fait au niveau des sources
d'eau
· Le logiciel Word et Excel pour la saisie du texte et la
récolte des données.
· Logiciel Epi Info, version 3.4.1. de 2007 pour l'analyse
des données
· Logiciel Power point pour la présentation des
résultats.
3.2. METHODE
3.2.1. Types d'études
Il s'agit d'une étude analytique transversale. Afin de
pouvoir identifier les différents facteurs de l'endémicité
du choléra à Bukavu, l'étude se base sur l'analyse
bactériologique des selles et des eaux consommées par les malades
internés aux Pavillons des maladies infectieuses de l'hôpital
Provincial de référence de Bukavu, et se complete d'une
enquête par questionnaire auprès desdits malades. En outre, une
descente sur terrain avait été faite pour observer
les susceptibilités des sources à la contamination.
3.2.2. Présentation du milieu
La ville Bukavu chef lieu de la province du Sud-Kivu, est
située à l'est de la RDC sur la rive sud ouest du Lac Kivu. Sa
population totale en 2007 était estimée à environ 623 000
habitants (3). Cette ville compte trois zones de santé urbaines :
Kadutu, Bagira-Kasha et Ibanda, constituant le district sanitaire de Bukavu,
étendues sur une superficie d'environ 60
km2.
Cette étude s'est déroulée dans le Centre
de Traitement de Choléra (CTC) de l'Hôpital Provincial
Général de Référence de Bukavu (HPGRB), structure
la plus importante qui accueille la majorité des cas de choléra
des trois zones de santé de la ville de Bukavu.
3.2.3. Echantillonnage
a. Echantillon
Notre échantillon est exhaustif. La population cible,
sont les malades admis au CTC de l'HPGRB entre la période du 01/05 au
30/06/2010. Après la réponse à notre questionnaire, un
échantillon des selles était prélevé chez tout
malade avant la mise en route du traitement de réhydratation.
Ensuite 4 échantillons d'eau par source était
fait au lieu de puisage du malade à raison de deux échantillons
dans un intervalle de deux jours. Les échantillons étaient
acheminés au laboratoire d'application de l'ISTM - BUKAVU à
l'aide d'une boite isotherme dans lequel on accumulait des vessies de glace.
Aussitôt au laboratoire, les échantillons était directement
mis en culture.
. Les selles étaient ensemencées sur le milieu
Thiosulfate Citrate Bile
Saccharose (TCBS) et incuber à 37°C pendant 24
heures.
Puis, les colonies jaunes étaient observées, sur
lesquelles nous faisions le test d'Oxydase. Seules les colonies oxydase
positive nous intéressées.
Celles - ci étaient repiquées sur milieu Brean
Heart pour la purification. C'est alors qu'on observait des colonies pure,
identique et uniforme, sur lesquelles nous faisons le sérotypage et le
test d'antibiogramme sur milieu Muller Hinton.
? Quant aux échantillons d'eau, une fois au laboratoire,
ils sont
directement enrichis dans le milieu Eau peptonée
alcaline hyper saline (3%), et incuber à 37°C pendant 24 h.
Après incubation, l'isolement est fait sur TCBS suivi de la purification
et le sérotypage et l'antibiogramme.
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