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CONSERVATOIRE NATIONAL DES ARTS ET METIERS DE
PARIS
Mémoire de l'examen « communication pour
l'ingénieur »
BLG 111
Spécialité : Sciences et techniques du
vivant
Option : génie biologique
ANALYSE DES BACTERIES NON CULTIVABLES
Présenté par
David LECHAUDEE
Soutenu le lundi 25 mai 2009
Membres du jury :
Monsieur Ali Saib, Professeur titulaire de la chaire de Biologie
Monsieur Robert Morfin, Professeur des universités
Monsieur Philippe Pochart, Professeur des universités
Madame Antonia Suau-Pernet, Maître de conférences Madame
Marie-Irène Malewiak, Maître de conférences Monsieur Fabien
Magne, Maître de conférences Monsieur Olivier Hennebert,
Maître de conférences
SOMMAIRE
Pages
INTRODUCTION 3
1. LES BACTERIES NON CULTIVABLES, CONTEXTE ET IMPACT SUR
LA SANTE PUBLIQUE. 4
1.1 Caractéristiques physiologiques et
morphologiques des bactéries non cultivables. 4
1.1.1 Caractéristiques des bactéries non
cultivables et non viables. 4
1.1.2 Caractéristiques des bactéries viables
non cultivables (VNC). 5
1.2 Les facteurs induisant l'état non cultivable.
7
1.2.1 Facteurs entraînant la mort cellulaire.
7
1.2.2 Les facteurs de stress cellulaire, induction de
l'état viable non cultivable. 7
1.2.3 Induction expérimentale de l'état viable
non cultivable. 8
1.3 Bactéries VNC dans les denrées
alimentaires, impact et enjeux. 8
1.4 Les bactéries viables non cultivables dans
l'environnement. 9
2. ANALYSES ET METHODES DE RECHERCHE DES BACTERIES NON
CULTIVABLE. 10
2.1 Analyse par fluorimétrie. 10
2.1.1 Double coloration CTC / DAPI. 11
2.1.2 LIVE/DEAD® BacLightTM. 12
2.1.3 Cytométrie de flux. 13
2.2 Direct Viable Count (DVC). 15
2.3 Analyse en Biologie Moléculaire par RT-PCR.
18
3. ETUDES SUR LA VIABILITE, L'ETAT VIABLE NON CULTIVABLE
ET LA RESSUSCITATION. 20
3.1 La ressuscitation. 20
3.2 Les facteurs de ressuscitation : les protéines
Rpf et Sps. 22
CONCLUSIONS 24
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 25
LISTE DES ABREVIATIONS 29
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