Annexes
Annexes A
1. Praparation du Kit Biuret
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>
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Sulfate de cuivre II CuSO4
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1.92 g
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>
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Tartrate sodique potassique
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9.03 g
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>
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Hydroxyde de sodium
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2.4 g
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>
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Iodide de potassium KI
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4.98 g
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2. Préparation du gel
> On pèse 0.24g d'agarose.
> On la met dans un bécher.
> On ajoute 12 ml de PBS tampon.
> Et on ajoute 30 ìL de noir amido.
> On mélange et le met sur la plaque chauffante.
> Apres qu'il se dissous on laisse refroidir à
56°c.
> Puis on ajoute 30 ìL d'anticorps .
> On mélange et on coule les boites (3 boites chacune
contient un anticorps spécifique). > Apres séchage du gel on
met des puits puis on les rempli par 8 ìL du sérum.
> On incube pendant 72 heures au contact de l'humidité
et on mesure le diamètre .
3. Bouillon Coeur-Cerveau (BHIB) G/L
> Protéose -peptone 10
> Infusion de cervelle de cervelle de veau 2.5
> Infusion de cur de buf 5
> Glucose 2
> Chlorure de sodium 5
> Hydrogenophosphate de sodium 2.5
pH : 7.5
4. Gélose Chapman
> Peptone 11
> Extrait de viande 01
> Chlorure de sodium 15
> Manitol 10
> Agar 15
> Rouge de phénol 0.025
5. Gélose nutritive
> Peptone 15
> Extrait de viande 10
> Extrait de levure 02
> Chlorure de sodium 05
> Agar 20
6. PBS tampon
> Na Cl 2 g
> KH2PO4 0.05
> NaHPO4 0.72
> KCL 0.05
Annexes B
Matériels biologiques
Milieux de cultures solides
Gélose nutritive Gélose Chapman
Milieux de culture liquides
Bouillon cur cerveau (BHIB) Eau physiologique
Equipements
Boites de pétri Tubes à essai Micropipette
Tube à hémolyses
Plasma
Eau oxygénée
Oxacilline en poudre (Ox)
Plaque API Staph (Biomereux)
Calculs des protéines totales
Les résultats sont calculés directement par
l'analyseur selon la formule suivante:
Absorbance de l'inconnu
Protéines totales = x Valeur de l'étalon
Absorbance de l'étalon
EFFETS DE LA SUPPLEMENTATION EN SELENIUM SUR LA REPONSE
IMMUNITAIRE AU COURS
DE L'INFECTION A SARM
Effects of selenium supplementation on immune
response during MRSA infection
Amina BENDIMERAD. Master 2 BMC,
Microbiologie, UABB-TLM, 2010
RESUME
Introduction
Objectif
Matériels et méthodes
Résultats
Conclusion
Mots clés
ABSTRACT
Plusieurs données récentes ont rapporté les
effets du sélénium sur l'amplification de la réponse
immune et l'induction de la prolifération lymphocytaire.
Essayer d'étudier l'effet de la supplémentation en
sélénium sur la réponse immunitaire au cours de
l'infection à Staphylococcus aureus résistant à
la méthicilline (SARM).
Dix (10) Hamsters infectés par SARM, répartis en
deux groupes (groupe 1 ; supplémenté en sélénium
[Se+], n = 5, sexe ; 4 males/1 femelle, âge ; 21 jours, poids ; 68.51 g
#177; 5.17, groupe 2 ; non supplémenté en sélénium
[Se-], n = 5, sexe ; 3 males/2 femelle, âge ; 21 jours, poids ; 64.06 g
#177; 1.7) et de 5 hamsters sains (5 males), ont été soumis
à une étude rétrospective cas/témoins.
Les taux sériques des protéines totales, des
alpha-1, des alpha-2 et des gamma globulines ont été similaires
chez les Hamsters infectés par SARM, supplémentés en
sélénium (Se+) et chez les non supplémentés en
sélénium (Se-) (p > 0,05). Cependant, les
concentrations sériques en albumine et le rapport albumine/globulines
ont été significativement diminués chez les Hamsters Se-
comparés aux Hamsters Se+ (p < 0,01). A l'inverse, les
concentrations des beta globulines et des globulines totales ont
été significativement élevées chez les Hamsters
Se-par rapport aux Hamsters Se+. Par ailleurs, les taux circulants des
anticorps IgA et IgM ont été significativement
élevés chez les Hamsters Se- comparés aux Hamsters Se+
(respectivement, p = 0,000, p = 0,011). De même, les
concentrations sériques en CRP ont été nettement plus
élevées chez les Hamsters Se- comparés aux Hamsters Se+
(p = 0,002). Toutefois, les taux des IgG on été
similaires dans les deux groupes (p = 0,844). Enfin, les taux
spléniques des lymphocytes totaux et des lymphocytes apoptotiques ont
significativement diminués chez les Hamsters Se- comparés aux
Hamsters Se+ (respectivement, p = 0,015, p = 0,009).
Le sélénium pourrait jouer un rôle
significatif dans la prolifération lymphocytaire et la régulation
de la réponse immune à médiation humorale et cellulaire
ainsi que la réponse inflammatoire au cours de l'infection à
SARM.
SARM, protéines, anticorps, lymphocyte, protéine
C-réactive, supplémentation en sélénium
Introduction
Objectives
Materials and methods
Results
Conclusion
Keywords
Many data reported the effects of selenium on the immune response
amplification and on the induction of lymphocyte proliferation.
To study the effects of selenium supplementation on the immune
response during methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
infection.
Ten (10) Hamsters infected with MRSA, divided into two groups
(group 1; supplemented with selenium [Se+], n=5, sex; 4 males/1 female, age; 21
days, weight ; 68.51 g #177; 5.17, group 2; without selenium supplementation
[Se-], n = 5, sex ; 3 males/2 females, age ; 21 days, weight; 64.06 g #177;
1.7), were subjected to case-control, retrospective study
Levels of serum total proteins, alpha-1, alpha-2 and gamma
globulins were similar in the two groups (p > 0,05). However, serum
albumin concentrations and albumin/globulins ratio were significantly lower in
Hamsters Se- compared with Hamsters Se+ (p < 0,01). On the
contrary, beta globulins and total globulins concentrations were significantly
higher in Hamsters Se-when compared to Hamsters Se+. Additionally, circulating
levels of IgA and IgM antibodies were significantly higher in Hamsters Se-
compared with Hamsters Se+ (respectively, p = 0,000, p =
0,011). Moreover, levels of CRP were significantly higher in Hamsters
Se-compared with Hamsters Se+ (p = 0,002). However, those of IgG were
similar in both groups (p = 0,844). Finally, total splenic lymphocytes
and apoptotic lymphocytes were significantly lower in Hamsters Se- compared
with Hamsters Se+ (respectively, p = 0,015, p = 0,009).
The selenium can play an important role in lymphocyte
proliferation and humoral and cellular immune response regulation and in
inflammatory response during MRSA infection.
MRSA, proteins, antibodies, lymphocyte, C-reactive protein,
selenium supplementation
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