· Monsieur Mustapha HADDOUCHE, Responsable du module de
Biochimie à la Faculté de Médecine et
Enseignant-associé à la Faculté SNV de l'Université
Abou-Bekr Belkaïd de Tlemcen
· Madame Hafida MERZOUK, Chef de Département de
BMC option. Biologie et santé
· Monsieur Rachid AZZI, Maitre - Assistant A
· Monsieur Fouad BOUAYED, Technicien du laboratoire de
médecine de travail CHU
· Monsieur Abdel Hak HASSANI, Responsable du laboratoire
de Microbiologie
· Monsieur Mounaim KHADIR doctorant en Biologie
Moléculaire option Microbiologie
Je voudrais remercier aussi tous mes enseignants pour leur
soutien et leurs conseils pendant mes 5 ans d'études ainsi que les
techniciens du laboratoire de Microbiologie et d'immunologie pour leur aide
sans oublier les étudiantes de Biologie et santé de
l'Université de SBA pour leur collaboration.
Ce travail a pour objectif d'étudier l'effet du
sélénium sur les SARM au sein du laboratoire d'immunologie du
nouveau pole de l'Université de Tlemcen.
Ce travail a été effectué en
collaboration avec mes chères collègues et amies Melle Merad
Boudia Sarah et Mme Ibrir Soumia qui ont travaillé sur des
thématiques complémentaires à cette étude
(électrophorèse des protéines totales, numération
cellulaire et immunofixation).
Le présent mémoire est structuré en six
parties : introduction, matériels et méthodes résultats et
interprétation discussion conclusion et perspectives et enfin une
bibliographie.
Je dédie mon mémoire et ma
réussite spécialement
Ames parents aux quels je n'aurai pas pu
le mener à bien sans leur soutien, leur amour et leur patience ...Aucun
terme et aucune langue ne peut exprimer mon amour et mes sentiments
envers vous
Ames freres et soeurs Asma, Zineb, Abdessamad et
Abderrahmane
Ames chers neveux Sif Eddine et le chouchou
Mehdi
Ama famille maternelle surtout mes grands
parents, mon oncle Charif et ma tante Nadjia
Ama famille paternelle surtout mes oncles
Amine et Mounir et mes tantes Tema et
Naima
Ames cousins et cousines surtout Mimi,
Batoul,Tema,Wafae, Larbi, Zaki, et Ibrahim
Ames chers cousins et amis Yahia et Malik qui
m'ont aidé pour réaliser ce travail Ames chers
adorables Othmane et Asma aux quels je les souhaite une vie rose
pleine de bonheur, de joie et de réussites.
Atous mes chers amis Amine, Amina Diden Fatéma et
Nesrine
Atoutes les personnes qui me
sont chères
TABLE DES MATIERES
Résumé iii
Abstract iv
Avant propos v
Table des matières vii
Liste des tableaux x
Liste des figures xi
Liste d'abréviations xii
Introduction 1
Chapitre 1. Revue de la littérature 3
1.1 SARM 3
1.1.1 Staphylococcus aureus résistant à
la méthicilline - Généralités 3
1.1.2 Historique 4
1.1.3 Origines et facteurs impliqués dans la
dissémination des SARM 5
1.1.4 Les causes d'infection par SARM 5
1.1.5 Les symptômes de l'infection à SARM 7
1.1.6 Transmission des SARM 8
1.1.7 Contrôle de la propagation des SARM 9
1.1.7.1 Lavage des mains 9
1.1.7.2 Port de gants 9
1.1.7.3 Port d'un masque et d'une blouse 9
1.1.7.4 Lingerie souillée 10
1.1.8 Epidémiologie des SARM 10
1.1.9 Diagnostic des staphylococcus aureus
résistant à la méthicilline 12
1.1.10 Traitement des SARM 12
1.1.11 Evolution de la résistance de Staphylococcus
aureus résistant à la méthicilline 13
1.1.12 Mécanisme d'action 14
1.2 Statut oxydant antioxydant 16
1.3 Effet de sélénium sur le système
immunitaire 17
1.3.1 Définition du Sélénium 17
1.3.2 Historique du sélénium 17
1.3.3 Généralités 18
1.3.4 Le rôle antioxydant du sélénium et la
vitamine E 18
1.3.5 Source alimentaire du sélénium 19
1.3.6 Carence en sélénium 21
1.3.7 Sélénium et système immunitaire 21
1.3.7.1 Effet sur l'immunité à médiation
humorale (réponse des Anticorps) 23
1.3.7.2 Effet sur l'immunité à médiation
cellulaire (fonction phagocytaire et lymphocytaire) 23
1.3.7.3 Effet sur la résistance aux maladies 23
Chapitre 2. Matériels et méthodes
24
2.1 Partie bactériologie 24
2.1.1 Matériels biologiques 24
2.1.2 Méthodes biologiques 24
2.1.2.1 Coloration de Gram 24
2.1.2.2 Ensemencement sur Chapman 25
2.1.2.3 Coagulase libre 25
2.1.2.4 Teste de la catalase 26
2.1.2.5 Identification API 26
2.1.2.6 Screening 27
2.2 Partie immunologique 29
2.2.1 Patients 29
2.2 .2 Organismes 31
2.2.3 Animaux 31
2.2.4 Méthode d'infection 31
2.2.5 Analyses biologiques 32
2.2.5.1 Dosages des protéines totales 32
2.2.5.1.1 Principe 32
2.2.5.1.2 Technique 32
2.2.5.2 Dosage de la CRP par la technique d'agglutination 33
2.2.5.2.1 Principe 33
2.2.5.2.2 Technique 34
2.2.5.3 Electrophorèse des protéines
sériques 34
2.2.5.3.1 Principe 34
2.2.5.3.2 Intérêts cliniques 35
2.2.5.3.3 Technique 35
2.2.5.3.4 Analyses statistiques 37
2.2.5.4 Dosage des anticorps 38
2.2.5.5 Isolement des lymphocytes spléniques et
numération cellulaire 40
Chapitre 3. Résultats et interprétation
41
Chapitre 4. Discussion 45
Chapitre 5. Conclusion 49
Chapitre 6. Bibliographie 50
Annexes 63
Liste des tableaux
Tableau 1.3 : Evolution de la résistance
à la méthicilline de S. aureus 14
Tableau 1.5 : Sources alimentaires du
sélénium 20
Tableau 3.1 : Niveaux des protéines
sériques chez les Hamsters infectés
par SARM supplémentés ou non en
Sélénium 41
Tableau 3.2 : Marqueurs humoraux chez les
Hamsters infectés par SARM
supplémentés ou non en Sélénium
42
Tableau 3.3 : Lymphocytes spléniques
chez les Hamsters infectés par SARM
supplémentés ou non en Sélénium
44
Liste des figures
Figure 1.1 : Taux de patients à SARM+
6
Figure 1.2 : Infections à SARM
7
Figure 1.4 : Introduction et utilisation des
antibiotiques et acquisition
des résistances par S. aureus 15
Figure 2.1 : Les étapes du screening
28
Figure 2.2 : Hamsters nains de Campbell 30
Figure 2.3 : Injection par voie
intrapéritoniale 31
Figure 2.4: Dosage des protéines totales
(méthode de Biuret) 32
Figure 2.5 : Particules de latex fixant les
anticorps, contrôle positif (bleu) et contrôle
négatif (rouge) 33
Figure 2.6 : Cliché présentant
une bande de dis protéinogrammes : Les fractions
protéiques de bas vers le haut : Albumine, á1,
á2, â1, â2, ã. 36
Figure 2.7 : Immunodiffusion radiale et
précipitation de Mancini
exemple du complexe IgA total/anti-IgA 38
Figure 3.1 : Taux circulants des anticorps chez
les hamsters infectés par SARM
supplémentés et non supplémentés en
Sélénium 43
Abréviations
API : Appareillage et procédes
d''identification
BHIB : Bouilon C~ur - Cerveau
CHU : Centre Hospitalier Universitaire
CLSI :Clinical and Laboratory Standards
Institute CRP :C - reactive Protein
DO : Densité Optique
IDR : Immuno Diffusion Radiale
Ig :Immunoglobuline
IN : Infection Nosocomiale
NIT : Nitrate réductase
Ox : Oxacilline
PT : Proteines Totales
PVL :Pentan - Valentine Leucocidine
r.p.m : Rotation par minute
SARM :Staphylococcus aureus
resistants à la méthicilline SASM :
Staphylococcus aureus sensibles à la
méthicilline SARM-C : SARM
Communitaires
SARM-H : SARM Hospitalieres
S.aureus : Staphylococcus aureus
SCC : Staphylococcal Cassette Chromosome
Se+ : Supplementé en sélenium
Se- : Non supplementé en
sélenium
SCN :Staphylocoques à coagulase
negative
VP :Voges Proskauer
