ANNEXES
Annexe1 : Milieux de culture pour les
bactéries
YEM (Yeast Extract-Mannitol, Vincent, 1970)
K2HPO4 0,5g/l
MgSO4, 7 H2O 0,2g/l
NaCl 0,1g/l
Extrait de levure 0,6g/l
Mannitol 10g/l
YEMA R-C
Il s'agit du milieu YEM +15g/l Agar agar + Rouge Congo à
0,025g/l.
Le rouge congo permet à la fois de neutraliser les
actinomycètes et de déceler certains
contaminents qui absorbent le colorant.
TY (Yeast Extract-Tryptone ; Beringer, 1974)
tryptone 5g/l
extrait de levure 3g/l
CaCl2 7mM
Annexe2 : Milieu de culture et solution nutritive de base
des plantes Milieu Fahraeus
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Composé Macroéléments
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Concentration dans la solution stock 1,18M
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Volume/litre de milieu final 1ml
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CaCl2
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0,48M
|
1ml
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MgSO4, 7H2O
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0,73M
|
1ml
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KH2PO4
|
0,42M
|
2ml
|
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Na2HPO4,7H2O
|
20,34
|
1ml
|
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Citrate de fer,H2O
|
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Microéléments
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7,93mM
|
2 gouttes
|
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MnCl2,4H2O
|
6,24mM
|
2 gouttes
|
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CuSO4,5H2O
|
7,33mM
|
2 gouttes
|
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ZnSO4,7H2O
|
16,17mM
|
2 gouttes
|
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H3BO3
|
4,83mM
|
2 gouttes
|
|
Na2MoO4,2H2O
|
|
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Le milieu est ajusté à pH 7,5, additionné de
15g/l d'agar puis stérilisé à 120°C et un bar durant
24 minutes
Solution nutritive de base des plantes (Vadez et
al., 1996)
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Macroéléments CaCl2
MgSO4, 7H2O KH2PO4
K2SO4,7H2O Oligoéléments H3BO3
MnSO4,H2O CuSO4,5H2O ZnSO4,7H2O Na2MoO4,7H2O CoSo4,7H2O
Fer (Séquestrène) Concentration finale
(mM)
|
|
1,65 1
036
0,7
Concentration finale (uM)
4
6,6
1,56 1,55 0,12 0,12 1,26mg/l
|
Annexe 3 : Marqueurs de poids moléculaire
Composé Concentration
Tris 40mM
Acétate de sodium 4mM
Na2 EDTA 1mM
pH 7,9
Annexe 5 Nombre de rhizobium estimé par la
méthode MPN (Vincent, 1970) Dilution par un facteur de dix.
La gamme approximative 109 107
105 103
Annexe 6 : corrélation entre les paramètres
de nodulation et le rendement en protéines brutes aériennes du
sulla inoculé par les souches de la collection
A
Annexe 7 : Carrés moyens et coefficients de
variation des variables quantitatives et
qualitatives relatives à la
culture de sulla dans les stations prospectées
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Source de variation
|
Carré moyen
|
CV
|
|
Nbr N (Nodules /plante)
|
3618,64**
|
18,17
|
|
Pds N (mg/ plante)
|
7114,293**
|
19,35
|
|
Pds Nmoy (mg/ nodule)
|
1,84**
|
18,49
|
|
HAUT (cm)
|
6125,128**
|
17,074
|
|
BSA (T/ha)
|
45,01**
|
16,95
|
|
PB (% MS)
|
35.8246**
|
12.558
|
|
RDT (kg/ha)
|
124.676**
|
12.49
|
* ;** différences significatives au seuil de
p=0.05 et p=0.01 respectivement ; ns :
différences non significatives au seuil de p<0.05
Annexe 8 : Carrés moyens et coefficients de
variation relatifs à l'essai test d'efficience
des souches en
conditions contrôlées
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Source de variation
|
Carré moyen
|
CV
|
|
Nombre de nodules
|
1183,98**
|
15,31
|
|
Poids nodulaire
|
61056,8**
|
14,56
|
|
Croissance en hauteur
|
26,18**
|
6,54
|
|
Surface foliaire
|
569,52**
|
14,32
|
|
Biomasse sèche aérienne
|
0,0745**
|
9,33
|
|
Teneur en protéines brutes
|
71,70**
|
1,21
|
|
Rendement en protéines brutes
|
6385,03**
|
1,18
|
* ;** différences significatives au seuil de
p=0.05 et p=0.01 respectivement ; ns :
différences non significatives au seuil de p<0.05
Annexe 9 : Carrés moyens relatifs au test
d'efficience des souches sous contraintes hydriques
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Source de variation
|
ddl
|
PSR/PSA
|
Croissance
en hauteur
|
Surface
foliaire
|
Nombre de
nodules
|
Poids sec
nodulaire
|
Poids sec
aérien
|
|
Souche
|
4
|
3.77**
|
332,90**
|
1357,026**
|
32089,89**
|
0 ,106**
|
6,17**
|
|
Stress hydrique
|
3
|
9,38**
|
830,41**
|
2311,53**
|
25080,57**
|
0,047**
|
9,821**
|
|
Souche x stress
hydrique
|
12
|
2,48 **
|
59,68**
|
242,86**
|
7066,75**
|
0,024**
|
2,32**
|
* ;** différences significatives au seuil de
p=0.05 et p=0.01 respectivement ; ns :
différences non significatives au seuil de p<0.05
|
|
