4.2. Méthodes
4.2.1.
Fractionnement de BEAT-SS®
En se référant à la recette telle que
décrite par les phytothérapeutes (bouillir 50 g de poudre
d'écorce dans 1 L d'eau distillée pendant 5 minutes), deux
décoctions de la poudre de BEAT-SS® furent préparées
séparément puis mélangées pour obtenir un
décocté de 365 g de poudre dans 7,5 L d'eau distillée.
Celui-ci fut filtré à chaud sur de l'ouate et le marc fut
lavé 4 fois avec 100 mL d'eau chaude. Au final, nous avons obtenu 7,3 L
de décocté qui furent lyophilisés à l'INRB. Le
lyophilisat pesait 29,4354 g.
25 g de lyophilisat ont été pesés et
dissouts dans 420 mL de méthanol sous sonication. La solution fut
filtrée sous vide à l'aide d'un entonnoir Büchner. La partie
du lyophilisat insoluble dans le méthanol fut
récupérée, séchée à l'étuve
à 40°C puis pesée pour donner 13,9260 g.
A la solution méthanolique obtenue, nous avons
ajouté 1680 mL d'éther di éthylique. Il y a eu formation
d'un précipité floconneux que nous avons isolé par
filtration sur Büchner. Nous avons obtenu au final d'une part la solution
éthéro-méthanolique (eaux mères) qui fut
concentrée à l'évaporateur rotatif à 40°C et
d'autre part le précipité de saponines brutes. Les 2 fractions
obtenues furent séchées à l'étuve à
40°C et pesées. Leurs poids étant de 7,5325 g pour le
précipité sec de saponines et de 3,5412 g pour le résidu
sec de la solution éthéro-méthanolique.
Poudre de BEAT-SS®
(365 g)
-Décoction dans 7,5 L d'eau distillée pendant 5
min
-Filtration à chaud sur ouate
-Lavage du marc à l'eau bouillante
Marc Décocté de BEAT-SS®
(7,3 L)
-Lyophilisation
Poudre lyophilisée
(29,4354 g)
- Pesée de 25 g de lyophilisat
- Dissolution dans 420 mL de MeOH au Sonicateur
- Filtration sur entonnoir Büchner
Partie insoluble dans MeOH Solution
méthanolique
(13,9260 g) - Ajout de 1680
mL d'Et2O
- Filtration sur entonnoir Büchner
Précipité
Eaux mères
- Séchage à l'étuve -
Concentration à l'évaporateur rotatif
- Séchage à l'étuve
Précipité de Résidu sec
de la
saponines brutes solution
éthéro-méthanolique
(7,5325 g) (3,5412 g)
Figure 6 : Schéma de fractionnement de
BEAT-SS®
Tableau 4 : Rendement du fractionnement de BEAT-SS®
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Poudre lyophilisée de départ = 25
g
|
|
Résidu sec des différentes
fractions
|
Quantité obtenue
(en g)
X
|
Facteur de proportionnalité
x/25
|
Pourcentage
%
|
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Solution
éthéro-méthanolique
|
3,5412
|
0,1416
|
14,16
|
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Saponines
brutes
|
7,5325
|
0,3013
|
30,13
|
|
Insoluble
dans le méthanol
|
13,9260
|
0,5570
|
55,70
|
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Total
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100,00%
|
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