2.2- Méthodes :
2.2.1- Echantillonnage :
2.2.1.1- Evaluation du risque encouru par deux
présumés intoxiqués au paracétamol :
Les échantillons de sang analysés en vue de
cette évaluation, proviennent de deux patients admis, l'un (un jeune
homme de 23 ans) au Centre National de Toxicologie (CNT) d'Alger, pour avoir
consommé, dans un but suicidaire, plus de 13g de paracétamol en 3
heures, l'autre (un homme de 50 ans, aux antécédents
psychotiques) au pavillon des urgences de médecine du Centre
Hospitalo-universitaire (CHU) NEDIR MOHAMED de Tizi-Ouzou, dans un état
comateux, pour avoir consommé par voie orale une grande quantité
de médicaments dont le paracétamol.
Pour le patient du CNT, un échantillon d'urines a
également été analysé.
2.2.1.2- Mesure de l'impact toxique de la prise de
paracétamol à dose
thérapeutique chez 11 alcooliques volontaires
adultes :
Les 11 personnes qui ont aimablement et volontairement
participé à cette étude sont de sexe masculin et
appartiennent tous à la tranche d'âge [45 - 50] ans. Ils sont tous
alcooliques en ce sens qu'il ne passe pas un jour sans qu'ils en consomment de
l'alcool.
Un prélèvement sanguin par jour à 8 heures
du matin et ce pendant trois jours, a été effectué
à jeun sur chacun de ces participants à cette étude.
Les deux premiers prélèvements étaient
effectués sans prise préalable de paracétamol par chacun
de ces volontaires alors que pour le troisième, une consommation
préalable de ce médicament a été organisée
et a commencé le deuxième jour à 8h30 du matin,
c'est-à-dire, juste après le deuxième
prélèvement, et a pris fin le même jour à 20h30. La
dose ingérée par chacun d'eux était de 1g toutes les 4
heures pendant 12 heures.
Les prélèvements sanguins sont
réalisés dans des tubes héparinés et
étiquetés aux noms des individus.
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Aussitôt après prélèvement, les tubes
de sang ainsi recueillis sont centrifugés et un bilan hépatique
est déterminé sur chacun des sérums obtenus.
2.2.2- Chromatographie sur couche mince des urines du
patient présumé intoxiqué au paracétamol admis au
CNT d'Alger :
La chromatographie sur couche mince a été
réalisée pour l'échantillon d'urines et avait pour but la
recherche de paracétamol.
Dans une ampoule à décantation, 20ml d'urines du
patient du CNT sont mélangés avec 1ml d'acide chlorhydrique 6N et
20ml d'éther diéthylique. Le mélange obtenu est
agité pendant 2 minutes et laissé ensuite au repos jusqu'à
complète séparation des deux phases : la phase organique
constituée par l'éther diéthylique et la phase aqueuse
constituée par l'eau des urines (Figure 14).
Figure 14 : Photographie de l'ampoule à
décantation du mélange urines et éther diéthylique
en présence d'acide chlorhydrique : la phase organique contenant le
paracétamol est en dessus.
La phase organique est récupérée dans une
soucoupe et laissée s'évaporer sur une plaque chauffante. Le
résidu sec obtenu est repris dans de l'éthanol. Une solution
alcoolique de paracétamol pur est préparée avec le
même éthanol pour servir d'étalon (ou témoin).
Un spot de chaque solution alcoolique ainsi obtenue est
déposé sur une plaque de gel de silice pour CCM. Cette
dernière est ensuite placée dans une cuve de chromatographie
contenant 9 volumes de chloroforme et 1 volume d'acétone.
Après développement, une révélation
au chlorure ferrique 0,4 M est effectuée.
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