ANNEXE II : Composition des réactifs
généraux des alcaloïdes
Réactif de MAYER :
Chlorure de mercure...................................1,36 g
Iodure de potassium.......................................5 g
Eau distillée........................................qsp
100 ml
Réactif de WAGNER :
Iodure de potassium.........................................2
g
Iode......................................................1,27
g
Eau distillée.........................................qsp
100 ml
Réactif de DRAGEN DORFF
Il s'agit d'un mélange (V/V) de deux solutions A et B.
- Solution A
Nitrate de bismuth..................................1,7 g
Acide tartrique concentré...........................20
g
Eau distillée....................................qsp 100
ml
- Solution B
Iodure de potassium.................................10 g
Eau distillée ....................................qsp 100
ml
Le mélange est ensuite additionné de 10 g
d'acide tartrique et son volume est ramené à 100 ml avec de l'eau
distillée.
ANNEXE III : Composition et préparation des
milieux de culture
A- Composition des différents milieux de culture
- Milieu de MUELLER HINTON (milieu solide) :
Formule-type (g/l)
Extrait de viande .............................2,0
Peptone trypsique de caséine..............17,5
Amidon........................................1,5
Agar...........................................15,0
pH 7,3 #177; 0,1 à 25 ° C
- Milieu MARINE AGAR (milieu solide) :
- Peptone ..........................................5,0 g
- Extrait de levure...................................1,0 g
- Citrate de fer..................................... 0,1 g
- Chlorure de sodium .........................19,45 g
- Chlorure de magnésium............................8,8
g
- Sulfate disodique............................. 3, 24 g
- Sulfate de calcium.............................1,80 g
- Chlorure de potassium........................0,55 g
- Bicarbonate de sodium........................0,16 g
- Bicarbonate de potassium.....................0,08 g
- Gélose .............................................15
g
- Chlorure de strontium........................... 34 g
- Acide borique..................................22,0 g
- Silicate de sodium............................. 4, 0 g
- Fluorure de sodium................................. 2,4 g
- Nitrate d'ammonium.............................1,6 g
- Phosphate disodique...................................8,0 g
Ajouter ou complémenter en fonction des critères de
performance imposés
pH final 7,6.
- Milieu ZOBELL (milieu liquide)
- Peptone.............................................4 g
- Extrait de levure ..................................6 g
- Chlorure de sodium..............................30 g
- Eau distillée....................................qsp 1
l
Ajuster le pH à 7,4 avec du NaOH si nécessaire.
B- Préparation des milieux à partir de la poudre
déshydratée :
- Milieu de MUELLER-HINTON :
Dissoudre 36g de milieu déshydraté dans l'eau
distillée en agitant continuellement, puis ajuster à 1l.
Chauffer le milieu jusqu' à dissolution totale sur une
plaque chauffante toujours en remuant avec un agitateur magnétique.
Autoclaver à 121° C pendant 15 min.
- Milieu MARINE AGAR :
Mettre 55,1 g de poudre en suspension dans 1 l d'eau
distillée.
Mélanger, chauffer sous agitation magnétique
continue et faire bouillir pendant 1 min de manière à obtenir un
mélange homogène.
Autoclaver à 121° pendant 15 min.
- Milieu ZOBELL :
Mettre 1 g d'extrait de levure, 4g de peptone et 30 g de NaCl
dans 1 l d'eau distillée.
Bien mélanger puis chauffer sous agitation
magnétique jusqu'à homogénéisation.
Ajuster le pH à 7,4 et autoclaver à 121°C
pendant 15 min.
| 
