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Etude de la croissance, de la composition biochimique et de la faune associée de l’algue rouge Gracilaria gracilis (Hudson) Papenfuss de la lagune de Bizerte.


par Zouhour MISHLI
Université de Carthage - Master 1 en Biosurveillance de l’environnement 2019
  

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Annexes

Annexe 1 : Les étapes de préparation des touffes de Gracilaria gracilis : (A) mise en place de l'algue dans des bacs remplies de l'eau de mer ; (B) nettoyage des touffes et élimination des épifaunes et épiphytes ; (C) Tri choix et sélection des touffes et (D) touffes sélectionnées.

Annexe 2 : Epifaunes et épiphytes associées au Gracilaria gracilis.

63

Annexe 3 : Les étapes de préparation des cordes : (A) Essuyage ; (B) Pesée des touffes de Gracilaria gracilis et (C) l'attachement de 100 g ? 2 de touffe sur corde par le fil tressé.

Annexe 4 : (a) Siphonage ; (b) Renouvellement total de la quantité d'eau de chaque bac et (c) Aération des bacs.

64

Annexe 5 : (A) Pesée de 20 g de G. gracilis ; (B) découpage en petits morceaux et (C) numérotation des échantillons découpées à conserver dans la glace.

Annexe 6 : Les étapes de l'extraction de la R-phycoérythrine : (a) Décongélation dans l'eau de mer filtrée ; (b) Récupération des algues et élimination de l'eau ; (c) Pesée de 1g ; (d) Broyage ; (e) Ajout de la solution tampon ; (f) Homogénéisation à l'aide d'un vortex ; (g) Incubation ; (h) Filtration ; (i) Centrifugation et (j) Récupération de surnageant (RPE).

Annexe 7 : Les étapes de dosage des protéines : (a) Prélèvement de 100 ul du volume de surnageant conservé ; (b) Filtration de réactif de Bradford avant utilisation ; (c) Ajout de 3 ml de réactif de Bradford ; d) Homogénéisation ; (e) Mise en cuvette de la solution à doser et (f) Lecture des absorbances à 595 nm après 5 minutes.

0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7

C (mg/ml )

0,6

0,5

Absorbance (A)

0,4

0,3

0,2

0,1

0

y = 0,821x + 0,0217 R2 = 0,9885

Annexe 8: Courbe d'étalonnage des protéines

65

Absorbance A

0,9

0,8

0,7

0,6

0,5

0,4

0,3

0,2

0,1

0

0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12

C (mg/ml )

y = 7,1206x

R2 = 0,9779

Annexe 9 : Les étapes de dosage des sucres solubles : (a) Mélange de 0,4 mL d'échantillon et 0,2 mL de phénol 5% m/v dans un tube ; (b) Ajout de 1 mL d'acide sulfurique concentré (H2SO4 à 98%) ; (c) Homogénéisation à l'aide d'un vortex ; (d) Incubation des échantillons à 30°C et à l'obscurité pendant 20 minutes et (e) Lecture des absorbances à 492 nm.

Annexe 10 : Courbe d'étalonnage des sucres solubles

66

67

Annexe 11 : Les étapes de traitement et de conservation de la faune collectée : (A) Pesée de touffe ; (B) Touffe trempée dans un petit réservoir ; (C) Filtration de l'eau ; (D) Collecte et conservation de la faune et (E) Boite de formole (1%) utilisé dans la conservation de la faune.

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"I don't believe we shall ever have a good money again before we take the thing out of the hand of governments. We can't take it violently, out of the hands of governments, all we can do is by some sly roundabout way introduce something that they can't stop ..."   Friedrich Hayek (1899-1992) en 1984