SOMMAIRE
INTRODUCTION..........................................................................1
I.
GENERALITES..........................................................................4
1. Généralités sur l'infection à
VHB.................................................. 5
2. Génotypes du
VHB....................................................................32
II. MATERIELS ET
METHODES.......................................................40
1. Cadre de
l'étude.......................................................................41
2. Types et Période de
l'étude...........................................................43
3.
Méthodes...............................................................................43
III.
RESULTATS.............................................................................50
1.
Fréquences..............................................................................51
2. Paramètres
épidémiologiques........................................................51
3. Paramètres
biologiques...............................................................53
4. PCR du
VHB...........................................................................58
IV.
DISCUSSION............................................................................62
1. Analyse de la
Méthodologie..........................................................63
2.
Fréquences..............................................................................64
3. Structure de la
population..............................................................65
4. PCR DU
VHB..............................................................................66
C0NCLUSION ET
PERSPECTIVES........................................................70
RESUME.......................................................................................72
ABSTRACT...................................................................................74
REFERENCES................................................................................76
ANNEXES............................................................................................................................81
INTRODUCTION
Les hépatites virales sont des infections
systémiques atteignant préférentiellement le foie et
entrainant des altérations hépatocytaires, des lésions
inflammatoires et une élévation des transaminases
sériques. Outre l'Epstein Barr Virus, le cytomégalovirus et
certains arbovirus qui n'atteignent que secondairement ou occasionnellement le
foie, six virus répondent à cette définition : le
Virus de l'Hépatite A (VHA), Virus de l'Hépatite B (VHB), Virus
de l'Hépatite C (VHC), Virus de l'Hépatite Delta (VHD), Virus de
l'Hépatite E (VHE) et le TTV (Transfusion Transmitted Virus)
[1].
Parmi ces virus hépatotropes, seuls le VHB, le VHC et
le VHD associé au VHB peuvent entrainer une hépatite virale
chronique, pouvant se compliquer de cirrhose et de Carcinome
Hépatocellulaire (CHC).
Dans le monde, 2 milliards de personnes sont
infectées par le VHB [2] et environ 360 millions de personnes sont
porteuses chroniques. Selon un rapport de l'Organisation Mondiale de la
Santé (OMS) paru en 2000 environ 520 000 décès chaque
année seraient dus à une hépatite à VHB [2]. Il
s'agit d'un problème mondial de santé publique. Au Congo, la
prévalence de l'hépatite B est différente selon les
études. Elle varie entre 6,5 et 15% [3, 4, 5].
Dans les pays en voie de développement, notamment le
Congo où les structures de biologie moléculaire sont rares, seule
la sérologie est utilisée, notamment la recherche de l'Ag HBs qui
permet de détecter le virus mais sans préjuger de sa
réplication. La détection de l'ADN viral par la réaction
de polymérisation en chaine (PCR) représente un important
progrès technique, permettant de mettre en évidence la
présence de l'acide nucléique viral dans le sérum des
sujets infectés par le virus de l'hépatite B, même lorsque
celui- ci est en très faible quantité.
Certains auteurs ont signalé que l'aptitude à
détecter l'ADN du VHB dans le sérum a une valeur pronostique en
ce qui concerne l'évolution des infections aiguës et chroniques
dues au VHB [6, 7]. La méthodologie peut permettre la détection
de l'ADN du VHB après clairance de l'AgHBs [8] ou la détection du
VHB en l'absence de marqueur sérologique [9]. Cependant, on n'a pas
encore établi de relation entre les marqueurs sérologiques et les
taux d'ADN du VHB.
L'efficacité du traitement antiviral utilisé
pour les patients porteurs du VHB peut aussi être évaluée
grâce aux marqueurs sérologiques ou par une mesure de la fonction
enzymatique du foie. Néanmoins, le dosage quantitatif de l'ADN viral du
VHB dans le sérum ou le plasma est considéré comme la
mesure la plus directe et la plus fiable de la réplication virale [10].
On a montré qu'une chute rapide et persistante des taux d'ADN du VHB
chez des patients recevant un traitement à base d'interféron
alpha, de lamivudine ou de Ganciclovir® est un facteur
prédictif d'évolution favorable sous traitement [11].
La surveillance des taux d'ADN du VHB permet de prédire
le développement d'une résistance à la lamivudine. Par
conséquent, un test quantitatif offrant un dosage de l'ADN du VHB est un
outil utile que l'on peut utiliser en association avec d'autres marqueurs
sérologiques lors de la prise en charge d'une infection par le VHB.
Le cout élevé de l'acheminement des
échantillons vers les pays qui disposent des structures de biologie
moléculaire, est l'un des facteurs qui limitent le diagnostic
virologique et par conséquent le suivi des malades ayant une
hépatite chronique B au Congo.
Le but de cette présente étude est
d'évaluer l'utilisation des échantillons de sang
séché sur les papiers buvards en vue d'une élution de
l'ADN viral, afin de réaliser l'amplification des acides
nucléiques du Virus de l'Hépatite B.
Ainsi, les objectifs ont été de:
Ø Evaluer les avantages de l'utilisation des
échantillons de plasma et de sang total séchés sur papier
buvard ;
Ø Mettre au point l'acheminement de
prélèvements biologiques de patients pour rechercher l'ADN viral
par PCR.
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