CONCLUSION ET
PERSPECTIVES
En conclusion, l'essaie d'extraction de l'ADN du VHB à
partir du sang séché sur papier buvard a permis le
développement une nouvelle méthode simple et appropriée
pour l'évaluation de la réplication du virus de l'hépatite
B. Le sang séché sur papier buvard représente un moyen
idéal pour les tests de diagnostic du virus de l'hépatite B dans
les pays où les structures biologie moléculaire, la conservation
frigorifique et le transport vers les laboratoires spécialisés
sont problématiques. L'élution de l'ADN du VHB à partir
d'une seule goutte de sang séché permet de poser le diagnostic de
réplication virale de l'infection à VHB. La conservation à
température ambiante n'a pas d'effet néfaste sur le
prélèvement et représente la méthode idéale
et peu onéreuse.
Perspectives
Nous suggérons à l'endroit:
Ø Des partenaires du développement scientifique,
d'assurer le financement d'une :
§ Etude avec un échantillon plus important et
comparative avec des échantillons non séchés afin d'en
dégager la sensibilité quantitative de la charge virale ;
§ Etude permettant l'évaluation de l'utilisation
des échantillons de sang séché sur papier buvard dans le
génotypage virus de l'hépatite B et la détection des
G1896A précoce mutants et des variantes dans le motif YMDD
polymérase ;
Ø Des autorités sanitaires du pays,
d'améliorer le plateau technique et d'équiper des structures de
biologie moléculaire des laboratoires des principales villes, afin de
réaliser, au niveau local, la PCR du VHB et que l'utilisation du papier
buvard soit nécessaire quand il s'agit de centres de santé
éloignés.
RESUME
Le virus de l'hépatite B (VHB) est l'un des
différents virus responsables de l'hépatite virale. Dans le
monde, plus de 2 milliards de personnes ont été infectées
par le VHB et plus de 350 millions d'entre elles ont une infection chronique.
Des marqueurs sérologiques sont couramment utilisés pour
confirmer le diagnostic et/ou aider au pronostic d'une infection aiguë ou
chronique par le VHB. Le principal marqueur de l'infection par le VHB est la
présence de l'antigène d'enveloppe (AgHBs). Bien que les porteurs
puissent éliminer l'AgHBs et développer des anticorps anti-HBs,
il semble qu'il y ait toujours un risque ultérieur de complications
hépatiques graves.
Par conséquent, l'utilisation de ce marqueur peut avoir
un intérêt limité dans la surveillance de
l'évolution de la maladie. L'ADN du VHB a une valeur pronostique pour ce
qui concerne l'évolution des infections aiguës et chroniques.
Cependant, dans les pays en développement, les structures de biologie
moléculaire sont quasi inexistantes. C'est ainsi que nous avons
entrepris cette étude dans le but d'évaluer l'utilisation des
échantillons de sang séché sur papier buvard, en vu de
réaliser la PCR du VHB.
Nous avons réalisé une étude
transversale, à recueil des données prospectif, comparative entre
d'une part les conditions de conservation des échantillons
(température ambiante et -20°C) et d'autre part les types de
prélèvements (sang total et plasma). Ces échantillons
provenaient de 20 sujets Ag HBs positifs, sélectionnés parmi les
donneurs de sang du Centre inter départemental de Pointe-Noire.
L'extraction par la méthode au Phénol
chloroforme est plus sensible que celle utilisant le kit commercial Qiagen.
La différence n'était pas significative en ce
qui concerne les rendements d'extraction par méthode au phénol
chloroforme, quel que soit le type de prélèvement et quel que
soit le mode de conservation des échantillons.
L'utilisation des échantillons de sang
séché sur papier buvard représente une méthode
efficace, simple et peu onéreuse dans le diagnostic moléculaire
de l'infection à VHB.
Mots clés : VHB, papier buvard,
ADN viral
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