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àƒ??°valuation du diagnostic par PCR directe et PCR-élisa sur les ITS des trypanosomes pathogàƒÂ¨nes du bétail

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par Bachir SOULEY KOUATO
Université Cheikh Anta Diop de Dakar - Doctorat dà¢â‚¬â„¢état en médecine vétérinaire 2005
  

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6. Génome des trypanosomes

L'organisation du génome des trypanosomes a pu être étudiée par l'analyse électrophorétique en champ pulsé (Pulse Field Gel Electrophoresis =PFGE) du matériel génomique (Sidibé, 1996). Le matériel génétique des trypanosomes porté par l'ADN est localisé dans le noyau (ADN nucléaire) et dans le kinétoplaste (ADN kinétoplastique).

6-1. ADN nucléaire

Les chromosomes observés dans le noyau se répartissent en 3 catégories selon la taille.

ü Les mini-chromosomes sont les plus nombreux (une centaine) et leur taille varie de 50 et 250 Kb. Selon Garside et al. (1994) (in Sidibé, 1996), dans le sous genre Nannomonas, T. simiae possède les plus petits mini-chromosomes (50 à 100 Kb), suivi par les types savane et forêt de T. congolense. Le type kilifi en possède les plus gros (100 à 250 Kb).

ü Les chromosomes intermédiaires au nombre de 20 à 50 sont de taille comprise entre 250 et 700 Kb.

ü Les gros chromosomes dont la taille est supérieure à 1000 Kb, sont au nombre de 15 à 20.

Selon Michels et al. (1991) (in Sidibé, 1996) le génome d'une cellule haploïde des trypanosomes est de 3,7.107 Pb. Près de 12% des ADN sont formés de séquences hautement répétées, 20% de séquences moyennement répétées et enfin 68% de séquences non répétées.

6-2. ADN kinétoplastique (ADNk)

Le kinétoplaste, partie fortement dilatée du système mitochondrial, est très riche en ADN qui se présente sous la forme de 20 à 50 maxicercles et d'une dizaine de minicercles. Ils sont disposés en longs filaments enroulés en spirales sur plusieurs rangées, et représentent deux types d'ADN différents (Itard, 2000).

ü Les minicercles, d'une taille d'environ 1 Kb, sont formés d'une région conservée de 100 à 150 Pb et d'une région variable de 850 à 900 Pb. Une séquence de 12 nucléotides présente sur la région conservée est hautement préservée d'une espèce à l'autre, voire d'un genre de kinetoplastidae à l'autre. Certains auteurs (N'Tambi et Englun, 1985 cités par Sidibé, 1996) ont montré que cette séquence est à l'origine de la réplication des minicercles et l'ont appelée « la séquence universelle des minicercles ». Les minicercles sont néanmoins très variables au sein d'une même espèce et varient même au sein d'un stock.

ü Les maxicercles, d'une taille en moyenne 20 fois supérieure à celle des minicercles, mais d'un nombre réduit (20 à 50), se retrouvent chez tous les trypanosomes de la section des Salivaria, à l'exception de T. evansi (Simpson, 1987 in Sidibé, 1996). Ils sont formés d'une région variable de 3 à 6 Kb et d'une région conservée de 17 Kb. Cette dernière porte les gènes codant pour les ARN ribosomiques des mitochondries et les gènes codant pour certaines protéines impliquées dans les phénomènes d'oxydation mitochondriale. Les maxicercles sont d'un intérêt non moins important, car ils peuvent être utilisés comme outil de diagnostic.

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