> Déposer 100 pl de sérum de
contrôle négatif dans les 3 premières cupules (A1 à
C1) ;
> Ajouter 100 pl de sérum de
contrôle positif dans les 2 cupules suivantes (D1 et E1) ;
> Ajouter 100 pl de chacun des
échantillons non dilués dans les autres cupules (2) ;
> Enchaîner la distribution du Conjugué 1
immédiatement après celle des échantillons ;
> Distribuer dans chaque cupule 25 pl de
Conjugué 1 (Anti-HBs/Biotine) ;
> Couvrir ensuite d'une feuille adhésive
> Immédiatement après la distribution du
Conjugué placer la plaque dans l'incubateur ;
> Laisser incuber 60 #177; 2 min à +37 #177;1
°C ;
> Enchaîner immédiatement le processus de
lavage, en retirant la feuille adhésive ;
> Aspirer le contenu de toutes les cupules ;
> Distribuer dans chacune des cupules environ 0.3 ml de
Solution de lavage ;
> Répéter 4 fois l'opération, en
respectant un temps de contact de 10 sec ;
> Dés la fin du lavage, distribuer
immédiatement le Conjugué 2 afin d'éviter tout
desséchement ;
> Distribuer 100 pl du Conjugué 2(Streptavidine/POD)
dans chaque cupule ;
> Couvrir d'une nouvelle feuille adhésive, et placer
immédiatement la plaque dans l'incubateur.
> Laisser incuber 30 #177; 2 min à 37
#177;1°C,
> Enchaîner immédiatement le processus de
lavage, en retirant la feuille adhésive ;
> Aspirer le contenu de toutes les cupules ;
> Distribuer dans chacune des cupules environ 0.3 ml de
Solution de lavage ;
> Répéter 4 fois l'opération, en
respectant un temps de contact de 10 sec ;
> Dés la fin du lavage, distribuer
immédiatement le Substrat afin d'éviter tout desséchement
;
> Distribuer dans chaque cupule 75 pl de la Solution d'emploi
du Chromogène ;
> Couvrir la plaque d'une nouvelle feuille adhésive
;
> Laisser incuber le Substrat 30 #177; 2 min à
+15/+25°C, à l'abri de la lumière ;
> Pour arrêter la réaction, retirer la feuille
adhésive et ajouter dans chaque cupule 75 pl de Solution d'arrêt
POD en respectant le même rythme qu'en 9 ;
> Pour faire une mesure photométrique dans l'heure qui
suit à 450 nm, la longueur d'onde de référence doit
être de 650 nm (éventuellement comprise entre 615 et 690 nm).
Si le photomètre nécessite un réglage sur
zéro, utiliser la Solution d'arrêt POD en respectant les
instructions données par le fabricant.
L'hématologie est la science qui étudie le sang
sous tous ces aspects, morphologiques, physiologiques, chimiques,
génétique.
Elle une partie de la médecine qui traite des maladies du
sang et des organes hématopoïétiques (Larousse 1988).
