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Partie expérimentale
I.1.4 Induction de la sporulation
Dans le cas des espèces d'Alternaria qui
présentent une faible sporulation ; les conidies sont obtenues
après induction de la sporulation selon la méthode décrite
par (Lyudmila et al., 2005) avec quelque modification
: le mycélium des colonies (âgés de 10 à 14 jours)
cultivé sur milieu PCA est blessé à l'aide d'un scalpel
stérile, puis les boites de pétri sont placées au
réfrigérateur (+5°C) pendant 12 heures puis exposées
à la lumière du soleil pendant 120 min, elles sont ensuite
transférés à 25#177;2°C sous l'obscurité
continu pendant 48h.
Figure 17 : Photos représentant les
étapes de l'induction de la sporulation
I.1.5 Conservation des isolats
La conservation des isolats d'Alternaria se fait
dans des tubes à essai contenant le milieu PDA incliné, puis mis
à incuber à 25#177;2°C, âpres 7 jours les isolats sont
transférés à 4°C et ceci pour des utilisations
ultérieures.
I.1.6 Identification des isolats I.1.6.1 Etude
macroscopique
L'étude macroscopique des isolats d'Alternaria
se fait à l'oeil nu, elle est basée sur
la description morphologique des colonies cultivées sur
milieu PDA et incubées à 25#177;2°C
pendant 7 à 10 jours. Les critères morpho-culturaux
retenus pour la caractérisation des
colonies selon Botton et al., 1990
sont :
? L'aspect du mycélium
? La vitesse de la croissance mycélienne
? La couleur des colonies (avers et revers)
? Les marges (couleur et forme)
? La pigmentation de milieu.
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