C. tropicalis
+ + + + - - + + - - + + + + - - + + - - + + + + + + +
+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - + + - - + + + + + - +
+ + + + + + + - - + + - - + + + + + + + + + + + + + +
- - + + - - + + + + - - + + - - + + + + + + + + + + - + + + +
+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
+ + +
+ + + + + + + + + + + + + + + - - + + - + + + + + + +
+ - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
+ + + + + + + - - + + - - + + + + - - + + - - + + + + + + + + + + + +
+ + + + + + + + + + + + - - + + - - + + + + + + + + +
+ + + + + + + + + + +
100 100 100 100 78,5 71,4 92,8 100 71,4 64,2
- - - - - - 35
- - - - - - 45
+ + + + + + 95
- + + + - - + + - -
+ + + + - - + + - -
+ + + + + + + + + +
33,3 33,3 33,3 33,3 33,3 33,3
66,6 100 100 100 33,3 33,3 100 100 33,3 33,3
M28 - + + + + + + + - - + + - - - + - + - -
55
% total 0 89,1 100 97,2
91,8 97,2 100 100
13-á-galactosidase, 14-â-galactosidase,
-Phosphatase acide, 12-Naphtol-AS-BI phosphohydrolase,
% des tests positifs 0 100 100 100
Candida lusitaniae
M1 - + + + - - + + - - + + -
-
% des tests positifs 0 100 100 100
C. guilliermondii
M14 - + + +
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
100
|
|
64,8
|
59,4
|
97,2
|
100
|
59,4
|
56,7
|
56,7
|
83,7
|
81,1
|
81,1
|
59,4
|
48,6
|
1-Témoin, 2-Phosphatase alcaline, 3-Estérase (
C4),
arylamidase , 9-Trypsine ,10-á-chymotrypsine, 1
1
15-â-glucuronidase,
16-á-glucosidase,17-â-glucosidase,
4-Estérase Lipase (C8), 5-Lipase (C14), 6-Leucine
arylamidase,7-Valine arylamidase, 8-Cystine
18-N-acétyl-â-glycosaminidase,
19-á-mannosidase, 20-á-fucosidase.
100 100 100 100 0 50 100 100 0 0
0 100 50 100 50 0
+ + + +
100 100 100 100
% des tests positifs 0 100 100 100
Saccharomyces cerevisiae
M23 - + + +
% des tests positifs 0 100 100 100
- + + - - - 45
0 100 100 0 0 0
+ + + + + + 95
100 100 100 100 100 100
95
0 0 100 100 0 0 100 100 0 0
+ + + + + + + + + +
100 100 100 100 100 100 100 100 100 100
M46 - + + + + + + + - + + + - - - + + + + -
70
Résultats
|
IV. Etude qualitative et quantitative de
des souches de Candida spp.
isolées
1. Etude qualitative de l a formation de biofilm 1.1.
Coloration à la safranine
|
l'adhésion
|
L'étude qualitative de formation de biofilm
testée par la méthode de coloration à la safranine 1% a
montré que toutes souches de Candida
testées sont phénotypiquement formatrices de biofilm
à des degrés variables. En effet, 17,77 % de
souches sont faiblement formatrices de biofilm (noté
` +') et 57,77% sont moyennement formatrices
de biofilm (noté
`++') et 24,44% sont fortement formatrices de
biofilm (noté `+++').
Les souches de Candida fortement formatrices de biofilm
montrent un dépôt (culot) très dense
au fond du tube en verre après c
oloration à la safranine 1% (Figure12).
(+++)
(++) (+)
Figure 12. Formation de biofilm
par la méthode de coloration à la safranine
1%.souche faiblement formatrice de biofilm (+),
souche moyennement formatrice de biofi lm (++) et souche
fortement formatrice de biofilm (+++).
|
1.2. Culture sur milieu au rouge
|
Congo
|
Tous les isolats sont non producteurs de biofilm (slime
négatif) et donnent des colonies de couleur rouge
(n=41) et rose (n=4).
Figure 13. Dégradation
de la couleur des souches de Candida cultivées sur des
boites
contenant le rouge Congo.
Résultats
2. Etude quantitative de la formation de biofilm 2.1.
Test de hydrophobicité
Le test de hydrophobicité est basé sur la mesure
de l'adhérence des cellules de Candida au cyclohexane
(hydrocarbure) à montrer que l'hydrocarbure testé est capable de
s'adhérer aux différentes souches de Candida avec
différents degrés et ceci est en fonction de l'espèce .En
effet, l'adhérence optimale à été observée
pour le cyclohexane 85,83% par la souche C. albicans (M47). Aussi,
nous avons remarqué que la souche Saccharomyces cerevisiae
(M23) a un pourcentage d'hydrophobicité très
élevé 84,16%et 47,5% par le cyclohexane et le xylène
respectives .Les différentes souches C. albicans ont une
adhérence varient entre 10,11% pour la souche C. albicans (M 2)
et 85,83% pour la souche C. albicans
(M47). Dans un autre lieu, les pourcentages
d'hydrophobicité pour les souches de C.
Tropicalis varient
entre 1,81% pour la souche de référence C. Tropicalis
06(085) et fort 79,09% pour la souche M46.
Le pourcentage de souches qui ont une adhérence au
cyclohexane supérieur à 50% est 33,33%.
Aussi, la mesure de l'adhérence au xylène a
indique que le xylène est capable de s'adhérer comme le
cyclohexane aux différentes souches de Candida avec une
variation de pourcentage d'adhérence d'une souche à une autre. Le
pourcentage le plus élevé à été
trouvé chez la C. albicans (M7), (66,66%) et 59,37% pour C.
krusei(M30). L'adhérence au xylène pour les souches de
C. albicans varient entre 3,26% pour la souche M57 et 66,66% pour la
souche (M7). Pour seule souche S. cerevisiae (M23) a un
pourcentage élevé 47,5%.
Le pourcentage des souches qui ont une adhérence au
xylène supérieur à 50% est 12,69%.
2.2. Sur les plaques en polystyrène
L'adhésion et la formation de biofilm par les
espèces de Candida à la surface des puits des plaques en
polystyrène durant 66h ont été déterminées
par la réduction colorimétrique du XTT. La formation du biofilm a
montré la présence d'une corrélation entre les valeurs des
absorbances à 492 nm et l'intensité colorimétrique du XTT.
Notre étude a été réalisée sur 43 souches de
Candida. Nous avons essayé d'étudier tout d'abord la
variation intra-espèce de la réduction du XTT chez C.
albicans, C. krusei, C. tropicalis,
Résultats
|
C. guilliermondii, C. lusitania
|
e et C. famata. Par la suite,
étudié la variation
|
cette réduction reflétant la
capacité
inter-espèce de
de formation du biofilm par cette levure.
(Tableau IX).
Tableau IX. Etude qualitative
de la production d'exopolysaccharides par coloration à la
safranine 1% et sur gélose au rouge Congo et test
d'adhésion aux solvants organiques (xylène
et cyclohexane).
Production de slime
|
|
|
Hydrophobicité (%)
|
|
Souches testées
|
Coloration à la Safranine
1%
|
Rouge Congo
Morphotype Interprétation
|
|
Xylène Cyclohexane
|
Candida albicans
| 
