IV-Essai de la bioconversion des composés
phénoliques des margines à grande échelle
Un bac de 50 litres a été utilisé pour la
bioconversion des composés phénoliques de 40 litres de margine
apportées à partir d'une huilerie de Nord de la Tunisie. La
réaction a été menée 2 heures à 50 °C
sous homogéneisation douce en présence de 500 UT de 3-glucosidase
par millilitre de margine. La cinétique de production de
l'hydroxytyrosol ainsi que l'activité 3-glucosidase résiduelle
dans le mélange réactionnel ont été
déterminées et présentées sur la Fig. 44.
b
a
Figure 44 : Cinétique de production de
l'hydroxytyrosol dans les margines de Nord (a),
Activité
3-glucosidase résiduelle dans le mélange réactionnel et
les margines brûtes (b).
D'après la Fig. 44 on remarque que l'ajout de l'enzyme
améliore la concentration de l'hydroxytyrosol dans les margines de Nord
avec un rendement de 1,9 fois.
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Résultats et Discussion
L'enrichissement se déroule d'une façon
progressive pour passer de 0,8 g/l dans les margines brûtes à 1,2
g/l après 60 minutes d'incubation en présence d'enzyme. Alors
qu'après 120 minutes de réaction enzymatique cette concentration
s'éleve pour atteindre 1,53 g/l (Fig 44 a). L'évaluation de
l'activité â-glucosidase résiduelle dans le
mélange réactionnel a démontré que
cette activité est présente et presque constante est de l'ordre
de 200 UI/ml durant toutes les 2 heures de réaction (Fig. 44 b).
En conclusion, au cours des expériences enzymatiques,
les concentrations de l'hydroxytyrosol maximales égales à 1,53,
0,83 et 0,46 g/l ont été obtenues en présence de 500 UT de
â-glucosidase d'A. niger par millilitre de margines dans les
margines de Nord, MSP et MCC respectivement. Ces concentrations sont 2,70 ;
3,61 et 1,77 fois plus élevées que le contrôle (Fig 42, 43,
44). Ces rapports de grandes échelles obtenus sont inférieurs
à ceux trouvés avec la petite échelle du travail de Hamza
et al., (2012 b). Cela est dû à la concentration initiale de
l'hydroxytyrosol dans les gros volumes de margines frais est beaucoup plus
élevé que dans de petits volumes de margines frais qui sont
obtenus à partir du séparateur dans le moulin à huile.
Cependant, dans la pratique pour le scale up, les grands volumes de margines
sont pris à partir de réservoirs de stockage, où la
biotransformation a déjà commencé. C'est ce qui explique
la forte concentration initiale de l'hydroxytyrosol dans les 15 L de MCC (0,17
g / L), les 15 L de MSP (0,23 g / L) et les 40 L de margine de North (0,86 g /
L) frais (Fig. 45). De cette partie de l'étude, nous pouvons conclure
que les margines sont une source de phénols hydrolysables tels que
l'oléuropéine, le ligstroside ou les verbascosides, qui
possèdent des liens glucosidiques et ester entre les principaux
composants phénoliques et des polysaccharides et/ou de lignine (Bianco
& Uccella 2000 , Walter, Fleming et Etchells, 1973). En conséquence,
une quantité importante de l'hydroxytyrosol est libérée
lors de l'hydrolyse enzymatique. En fait, le projet de prétraitement
enzymatique s'avérer utile non seulement pour les applications de
laboratoire, mais aussi pour une application pilote ou industrielle pour
recyclage de margine.
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Résultats et Discussion
Figure 45 : Les chromatogrammes de CLHP des
composés phénoliques (détection à X = 280 nm) de
l'extrait brut MCC (a), et hydrolysé MCC par la b-glucosidase d'A.
niger (b), de l'extrait brut MSP (c), hydrolysat de MSP par la
b-glucosidase d'A. niger (d), de l'extrait brut de margine de Nord
Tunisie (e) et hydrolysée de margine nord de la Tunisie par
b-glucosidase d'A. niger (f). 1, hydroxytyrosol, 2, tyrosol, 3,
composé non identifié, 4, oléuropéine.
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Résultats et Discussion
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