Bioconversion enzymatique des composés phénoliques des effluents issus de l'extraction d'huile d'olive: une voie prometteuse de valorisation par la production de l'hydroxytyrosol naturel

I-3 Sélection de la source d'azote pour la production de Ji-glucosidase

Différentes sources d'azote organiques et inorganiques à savoir urée peptone de caséine mycopeptone peptone végétale peptone de soja peptone de viande peptone de blé nitrate d'ammonium sulfate d'ammonium nitrate de sodium et nitrate de potassium ont été testées afin de démontrer leurs effets sur la production de 3-glucosidase par A. niger. Le maximum de production de 3-glucosidase durant la fermentation à été regroupé et illustré sur la Fig. 14. La quantité totale d'azote de ces sources est égale à la quantité de (NH4)2SO4 dans le milieu de base. L'utilisation de la peptone de blé et d'urée comme la source d'azote, produit la meilleure production de l'activité 3-glucosidase (4297 #177; 0,08UI/ml et 4100#177; 0,08UI/ml respectivement), par comparaison avec les autres sources d'azote utilisées. Ainsi, la peptone de blé et l'urée sont sélectionnés pour faire une expérience mélangeant ces derniers dans un seul erlenmeyer, depuis une activité assez importante de 3-glucosidase (6500 #177; 0,08 IU/ml) a

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Résultats et Discussion

été obtenue quand la peptone de blé et l'urée sont ajoutés ensemble dans le milieu de culture comme une source d'azote. Pour les autres sources d'azote testés tels que la peptone de caséine (3025 #177; 0,06 IU/ml), la peptone végétale (3200 #177; 0,03 IU/ml), peptone de viande (3250 #177; 0,06 IU/ml) supposé de bon producteur de 3-glucosidase. La Mycopeptone (2150 #177; 0,2 IU/ml), la peptone de soja (2200 #177; 0,25 IU/ml), le sulfate d'ammonium, le nitrate d'ammonium, le nitrate de potassium (2100 #177; 0,09 IU/ml) et le nitrate de sodium (1000 #177; 0.09 IU/ml) donne uniquement des résultats modérés.

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Figure 14: Activité 3-glucosidase des préparations enzymatiques résultantes de la fermentation de son de blé par A. niger avec la présence de différentes sources d'azote.

I-4 Effet du rapport C/N sur la production de Ji-glucosidase

Bien que le rapport C/N affecte fréquemment le taux de biosynthèse de plusieurs métabolites, l'influence du ratio C/N sur la production de 3-glucosidase reste non évaluée jusqu'à présent. Le comportement de la souche A. niger dans le son de blé durant 7 jours de fermentation à 30 °C avec différents rapport C/N qui varie de 1 à 80 ont été étudié en respectant l'activité 3-glucosidase. Comme c'est montré sur la Fig. 15, l'activité 3-glucosidase est très sensible au ratio C/N. En effet, la meilleure activité (7000 UI/ml) est obtenue avec le rapport C/N égale à 10. Nos résultats sont un meilleur agrément avec d'autres procès de fermentation pour la production d'autres types d'enzyme, par exemple, la biosynthèse de laccase est favorisée par un faible rapport C/N (Levin et al., 2002, 2010).

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Résultats et Discussion

^8000 6000 4000 2000 ^0

^{1 5 10 15 20 40 80}

^{Ratio C/N}

Figure 15: Activité â-glucosidase des préparations enzymatiques résultant de la fermentation du son de blé par A. niger avec la présence de différents ratios C/N.