I-5-1 Milieu liquide à base de son de blé pour
la production de f3-glucosidase à
partir d'une fermentation en erlenmeyer 58
I-5-2 Milieu liquide à base de son de blé pour la
préculture d'A. niger 58
I-5-3 Milieu liquide à base de son de blé pour la
fermentation d'A. niger pour la
production de f3-glucosidase 59
I-5-4 Milieu solide ME pour le repiquage et la conservation des
champignons 59
I-6 Conditions opératoires de la préculture d'A.
niger 59
I-7 Conditions opératoires de la culture d'A. niger 59
I-8 Chromatographie liquide à haute performance (CLHP)
59
I-9 Chromatographie liquide à haute performance
couplée à la spectrométrie de
masse (CLHP-SM) 60
I-10 Chromatographie phase gazeuse couplée à
la spectrométrie de masse (CPG-
SM) 60
II- Méthodes 61
II-1 Techniques de culture de champignons 61
II-1-1 Extraction des spores et culture de la souche
Aspergillus niger 61
II-1-2 Culture de la souche Trichoderma atroviride et de
la souche Trametes
trogii 61
II-2 Techniques de récupération des enzymes et
dosage de leurs activités 61
II-2-1 Préparation des enzymes 61
II-2-2 Dosage des activités enzymatiques 61
II-3 Bioconversion de la margine 64
II-3-1 Méthode de la biotransformation 64
II-3-2 Détermination du pH et de température
optimaux 64
II-3-3 Effet du volume de margine 64
II-3-4 Effet de la quantité de l'enzyme 64
II-3-S Effet de l'agitation 64
II-3-6 Cinétique de la bioconversion 64
II-3-7 Bioconversion à grande échelle 65
II-4 Techniques séparatives membranaires 65
II-4-1 Procédés de séparation 65
II-4-2 Mesure de séparation par performance membranaire
66
II-5 Concentration par évaporation 66
II-6 Extraction des composés phénoliques à
partir des margines 66
II-7 Analyse par Chromatographie liquide à haute
performance : CLHP 67
II.7.1. Analyse des monomères phénoliques 67
II-8 Détermination de l'activité antiradicalaire
67
II-8-1 Principe de la méthode 67
II-8-2 Mode opératoire 68
II-9 Analyse des protéines 68
II-9-1 Principe de la méthode 68
II-9-2 Mode opératoire 68
II-10 Détermination de la concentration des sucres
réducteurs 68
II-11 Détermination de la concentration des
ortho-diphénols totaux 69
II-12 Analyse par GC-MS 69
II-13 Détermination de la matière sèche (MS)
69
II-14 Dosage de glucose (méthode enzymatique GOD-PAP)
69
II-15 Estimation de la concentration en polyphénols des
margines 70
II-16 Immobilisation en Alginate de â-glucosidase 70
III. Caractérisation des margines brutes
71
Résultats et Discussion 74
I-Introduction 75
Chapitre I : 77
Optimisation de la production de â-glucosidase par
le champignon : Aspergillus
niger. 77
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