I.7.3. BACTERIOLOGIQUE
· Quatre examens paracliniques sont proposés
par l'OMS actuellement : l'examen direct au microscope après
coloration, la culture, l'examen anatomo-pathologique et la PCR.
· Deux examens positifs suffisent à affirmer
le diagnostic positif d'infection à M. ulcerans.
Ø examen direct
- Le prélèvement (écouvillon ou biopsie)
doit être réalisé au niveau du tissu ulcéré
en zone périphérique nécrotique.
- Facile et rapide à réaliser dans les
établissements locaux de santé, peu coûteux.
- Positif en cas de présence de BAAR
après coloration de Ziehl-Nielsen.
- Méthode toutefois peu sensible (Se = 40% environ) car
les bacilles ne se répartissent pas uniformément dans les tissus
et leur nombre tend à diminuer avec le temps.
Ø Culture bactérienne
- Elle est pratiquée à partir
d'écouvillons ou de biopsies.
- Réalisée sur milieu de Lowenstein-Jensen ou de
Coletsos.
- Méthode très lente : culture difficile, et
mycobactérie à croissance lente. Nécessite 6 à
8 semaines (lorsqu'elle est positive, peut se révéler
néanmoins interprétable dès la3ème ou4ème
semaine). Sensibilité moyenne : entre 20% et 60%.
Ø examen anatomo-pathologique
(histologique)
Cet examen requiert une biopsie tissulaire. Celle-ci doit
être prélevée sur les bords de l'ulcère, mais elle
doit comprendre la base nécrosée et du tissu profond.
Pour ce faire, il est recommandé l'excision qui
s'étendra si possible un peu au-delà de la zone creusée.
Les biopsies pour examen anatomopathologique sont d'ailleurs traditionnellement
réalisées à l'occasion d'un traitement chirurgical
- L'OMS stipule que les échantillons venant de plaques
ou de lésions oedémateuses doivent provenir de l'endroit qu'on
estime être au centre de la lésion et comporter toutes les couches
du derme et du tissu sous-cutané, ceci pour augmenter la
lisibilité de la pièce et au final la sensibilité de
l'examen.
- Résultats obtenus rapidement.
- Positive lorsque l'examen de la
pièce biopsique montre une nécrose du collagène
dermique et du tissu cellulo-adipeux sous-cutané, avec une
réaction inflammatoire minime et typiquement
présence de BAAR en nombre variable.
- Méthode sensible : 90 % environ.
- Utilisée fréquemment pour établir un
diagnostic différentiel lorsque les 3 autres méthodes sont
négatives.
- A noter que 2 nouvelles méthodes (biopsie à
l'emporte-pièce et aspiration à l'aiguille) sont en cours de
validation, même s'il apparaît que l'emporte-pièce ne
permettrait pas toujours d'obtenir une qualité satisfaisante de
tissu.
Ø PCR (amplification
génique)
Réalisée à partir d'un écouvillon
ou d'une biopsie.
- Le principe est la recherche de l'ADN de Mycobacterium
ulcerans par PCR (Polymerase Chain Reaction)
- Résultats obtenus rapidement, avantage de ne pas
dépendre de la vitesse de multiplication de la mycobactérie
- Très difficile à réaliser en dehors de
centres de référence, méthode coûteuse. De plus,
peut donner des faux-positifs dans des laboratoires qui manquent
d'expérience.
- Très bonne sensibilité : évaluée
entre 90 et 98%. Spécificité 100%.(10).
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