IV- LES MILIEUX DE CULTURES
IV-1-DEFINITION
Les milieux de culture sont des supports nutritifs
stériles qui permettent aux microorganismes placés à leur
contact d'y trouver les
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Présenté et soutenu par Antoine A. DANSOU et
Jacques Fêmi SETONDJI
Utilisation comparée de la gélose chocolat
à base d'hémoglobine en granulées et de la gélose
chocolat à base de sang de mouton défibriné pour la
culture de trois espèces bactériennes méningées
divers éléments nécessaires à leur
croissance : source de carbone, source d'azote, aliment
énergétique, oligo-éléments.
IV-2-MODE GENERAL DE PREPARATION [6]
Pour se procurer les milieux de culture qui lui sont
nécessaires le bactériologiste a le choix entre diverses
possibilités, choix tenant compte :
-de l'équipement du laboratoire en personnel et en
matériel,
-du rythme d'utilisation,
-du prix de revient,
-de la nature du milieu,
-des possibilités d'approvisionnement.
Sont actuellement commercialisés :
· Des milieux « prêts à l'emploi
», conditionnés en boite de Pétri (milieu
précoulé) ou en tube ; pour les laboratoires de petite ou moyenne
importance cette solution permet une organisation simple et rationnelle du
travail avec une bonne garantie de qualité.
· Des milieux « prêts à l'emploi
», non conditionnés sous leur forme définitive, mais en
flacon de 30mL à 1L ; le coût est moins élevé que
précédemment, les délais de conservation de milieux plus
longs, mais il faut prévoir un service de préparation plus
important et surtout des possibilités de stockage.
· Des milieux déshydratés qui
réunissent un grand nombre d'avantages : leurs constituants apparaissent
assez constants d'un lot à l'autre, en raison de la fabrication à
grande échelle ; la conservation est
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aisé sous un encombrement restreint ; la
préparation simplifiée peut être confiée à un
personnel moins spécialisé. Un large choix des milieux est
proposé, permettant ainsi une excellente adaptation des méthodes
bactériologiques aux buts envisagés.
IV-3- QALITE DU MILIEU DE CULTURE [6]
Certaines qualités sont indispensables à un milieu
pour favoriser le développement bactérien ; elles concernent :
-La composition : Les éléments
de cultures doivent contenir quantitativement et qualitativement les aliments
exigés pour la croissance et l'entretien des microorganismes et
assimilable par eux :
> Aliments essentiels azotés et carbonés
> Eléments minéraux
> Facteurs de croissance (métabolites essentiels que
la bactérie est incapable de synthétiser)
> Facteurs stimulants ou facteurs de départ dont la
présence accélère le rythme de la multiplication
bactérienne
-Le pH : En général les
bactéries ne se développent qu'à un pH voisin de la
neutralité (7 à 7,6). Certaines espèces non
pathogènes pour l'homme oxydent le thiosulfate et la soude en acide
sulfurique et se développent à un pH voisin de O. A
l'opposé il y a des bactéries qui hydrolysent l'urée et
qui sont productrice d'ammoniaque et qui tolèrent des pH très
alcalin.
Certaines espèces pathogènes tels que les
pseudomonas et les vibrions se développent en milieu alcalin à
l'opposé nous avons les lactobacilles qui sont les bactéries de
la flore de doderlin qui se multiplie au pH 6,3 à 6,5.
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-L'isotonie : Elle comprend pour la plupart
des milieux à celle d'une solution de NaCl à 9%o.
-Le potentiel redox : En ce qui concerne le
potentiel d'oxydo-réduction, les bactéries ont des exigences
strictes, en rapport avec le type respiratoire.
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