Suivi et comparaison des paramètres physico-chimiques de l'huile de soja raffinée chimiquement et enzymatiquement, produites par Cévital

Annexe 01
Partie théorique

Tableau I: Composition d'huiles de soja génétiquement modifiées (Warner, 2007).

Le tableau ci-dessus tiré du bulletin IBP, numéro 1, 2002 du Canada, montre les modifications possibles par génie génétique.

Optimisation des paramètres de dégommage enzymatique

Equivalents de NaOH

Ajout de l'enzyme

Ajout d'acide citrique

Ajout du caustique

Temps (heures)

Figure 01: Effet de NaOH sur le dégommage enzymatique (Münch, 2004).

1,5 mole équivalents relative à l'acide citrique est l'optimum pour dégommer une huile enzymatiquement (Münch, 2004).

Ajout de l'enzyme

Ajout d'acide citrique

Ajout du caustique

Temps (heures)

Figure 02: L'effet de température sur Lecitase Ultra (Münch, 2004).

La température 50 - 55 °C est l'optimum (Münch, 2004).

Ajout du caustique

Ajout de l'enzyme

Ajout d'acide citrique

Ajout d'eau

Temps (heures)

Figure 03 : Effet de l'eau sur le dégommage enzymatique (Münch, 2004).

L'optimum d'eau à ajouter est de 2 % (Münch, 2004).

Ajout d'acide citrique

Ajout du caustique

Ajout de l'enzyme

Temps (heures)

Figure 04 : Effet de la dose de Lecitase Ultra (Münch, 2004).

Commencer par 50 ppm puis optimiser la dose de l'enzyme à ajouter (Münch, 2004).

Annexe 02
Matériel et méthodes

Tableau II: Matériel, solutions et réactifs utilisés au cours des analyses (M.E., 2001).

Matériel		Solutions et réactifs
Balance analytique		Acétone
Colorimètre LOVIBOND	visuel:	Alcool neutralisé
Chauffe ballon		Acide acétique
Centrifugeuse		Acide chlorhydrique à 0,01 N
Dessiccateur		Acide sulfurique à 20 %
Etuve		Bleu de Bromophénol
Four à moufle		Chloroforme pùr
Plaque chauffante- agitatrice		Eau distillée
Spectrophotomètre UV- visible		Empois d'amidon
Ampoule à décanter		Hydroxyde de potassium à 50 %
Béchers (25ml, 250ml)		Hexane
Ballons à fond plat		HCl acétonique
Burettes graduées (10ml, 25ml)		Iodure de potassium
Barreau magnétique		Molybdate de sodium
Creusets		Méthyle orange
Erlenmayers		Oxyde de zinc
Eprouvettes graduées		Phénolphtaléine
Entonnoir		Soude à 0,1 N et 1 N
Fioles jaugées (50ml, 100ml)		Sulfate d'hydrazine
Papier pH (STUPHAN 4)		Thiosulfate de sodium à 0,01N
Papier filtre
Spatule

Courbe d'étalonnage de phosphore

Construire la courbe d'étalonnage de la teneur en phosphore à l'aide d'une solution mère (1,0967g de dihydrogénophosphate de potassium (KH2PO4) dans 250 ml d'eau distillée, cette solution comprend 1mg de phosphore par ml) à partir de cette solution on prélève 5ml dans une fiole de 500 ml qu'on ajuste avec de l'eau distillée c'est la solution fille. Cette solution est à 0,01mg de phosphore par ml.

+ Préparation des solutions standards

Pipeter 1ml, 2ml, 4ml, 6ml, 8ml, et 10ml de la solution fille dans une fiole de 50 ml. Ajouter 8ml de Sulfate d'hydrazine et 2 ml de Molybdate de sodium, amener à 50 ml avec de l'eau distillée. Mettre au bain marie bouillant pendant 15 mn, laisser refroidir, lire l'absorbance à 650 nm et tracer la courbe (M.E., 2001).

Figure 05 : Courbe d'étalonnage de phosphore (M.E., 2001).

Préparation des solutions (M.E., 2001)

+ Thiosulfate de sodium anhydre à 1 N

Poids moléculaire du thiosulfate de sodium 158,11.

1N 158,11g

0,1N X

X=15,81 1g de _Na2S2O3 qsp* 1 litre d'eau distillée.

0 ,01N, X= 1,58 1 de _Na2S2O3 qsp* 1 litre d'eau distillée.

*qsp : quantité suffisante pour.

+ Solution d'amidon à 1%

Prendre 1g de poudre d'amidon compléter à 100 ml avec de l'eau distillée.

+ Solution de phénophtaléine 1%

Prendre 1g et compléter à 100 ml avec de l'éthanol 95 % (v/v).

+ Solution de bleu de Bromophenol à 0,2 %

Prendre 0,2g et compléter à 100 ml avec de l'acétone.

+ Méthyle orange à 1%

Prendre 1g et compléter à 100 ml avec de l'eau distillée.

Annexe 03
Résultats obtenus des différentes analyses réalisées

Tableau III : Huile de soja traitée chimiquement du 07/07/2007 au 25/07/2007.

Dates	Echantillons		Acidité (%)		Couleur (J/R)		Traces de savons (ppm)		Indice de peroxyde (meq/kg)		Phosphore (ppm)		Humidité (%)		Impuretés (%)
07-07-2007	Huile brute		0,5 10		J=44 R=4,2				4		143,66		0,063		0,05
	Mélangeur		0,333
	Séparateurs		0,100				71
	Décoloration		0,110		J=40 R=6		00				00		Néant		Néant
	Désodorisation		0,05		J=10 R=1,1		00		00		00		Néant		Néant
08-07-2007	Huile brute		0,460		^J=43,3R=4,2				3,99		143,66		0,06		0,049
	Mélangeur		0,285
	Séparateurs		0,096				48,333
	Décoloration		0,100		J=40 R=6,233		00				00		Néant		Néant
	Désodorisation		0,05		J=10 R=1 ,133		00		00		00		Néant		Néant
09-07-2007	Huile brute		0,516		J=44 R=4,1				3 ,8		145		0,066		0,04
	Mélangeur		0,255
	Séparateurs		0,136				122,666
	Décoloration		0,090		J=40,666 R=6,3		00				00		Néant		Néant
	Désodorisation		0,056		J=10,333 R=1 ,266		00		00		00		Néant		Néant
10-07-2007		Huile brute		0,470		J=43 R=4,2				3,85		143,66		0,066		0,03 5
		Mélangeur		0,166
		Séparateurs		0,063				234,666
		Décoloration		0,090		J=42 R=6,7		15				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,053		J=1 1 R=1,333		00		0,1		00		Néant		Néant
11-07-2007		Huile brute		0,496		J=42,66 R=4,2				4,05		145		0,07		0,04
		Mélangeur		0,273
		Séparateurs		0,176				131,666
		Décoloration		0,100		J=37,666 R=5,566		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,043		J=9,666 R=1,0		00		0,033		00		Néant		Néant
12-07-2007		Huile brute		0,490		J=42,66 R=4,1 3				4,1		145 ,33		0,07		0,05
		Mélangeur		0,125
		Séparateurs		0,056				177
		Décoloration		0,103		J=39 R=5,6		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,053		J=10,666 R=1 ,266		00		00		00		Néant		Néant
13-07-2007		Huile brute		0,506		J=44,33 R=4,3				4,2		144,66		0,063		0,06
		Mélangeur		1,144
		Séparateurs		0,250				66
		Décoloration		0,116		J=42 R=6,3		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,05		J=10 R=1 ,2		00		00		00		Néant		Néant
14-07-2007		Huile brute		0,486		J=57 R=4,5				4		145,66		0,066		0,041
		Mélangeur		0,166
		Séparateurs		0,063				675,333
		Décoloration		0,100		J=55,666 R=6,733		25				06		Néant		Néant
		Désodorisation		0,076		J=1 1,333 R=1,333		00		0,066		00		Néant		Néant
15-07-2007		Huile brute		0,460		J=46 R=6,7				4,3		143		0,063		0,055
		Mélangeur		0,200
		Séparateurs		0,140				250
		Décoloration		0,097		J=44,666 R=6,5		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,063		J=1 0 R=1 ,2		00		0,1		00		Néant		Néant
16-07-2007		Huile brute		0,486		J=46 R=6,7				3,8		144,33		0,063		0,07
		Mélangeur		0,166
		Séparateurs		0,090				278,666
		Décoloration		0,090		J=44 R=5,533		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,046		J=1 0 R=1,166		00		00		00		Néant		Néant
17-07-2007		Huile brute		0,516		J=43 R=4,3				4,2		143,66		0,066		0,069
		Mélangeur		0,123
		Séparateurs		0,076				55
		Décoloration		0,090		J=41,333 R=5,766		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,056		J=10,333 R=1,166		00		00		00		Néant		Néant
18-07-2007		Huile brute		0,52		J=44 R=4,5				4,1		144		0,07		0,072
		Mélangeur		0,123
		Séparateurs		0,080				181,666
		Décoloration		0,097		J=42 R=6,166		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,06		J=10,333 R=1,.2		00		00		00		Néant		Néant
19-07-2007		Huile brute		0,506		J=43 R=4,2				4,1		145		0,073		0,070
		Mélangeur		0,257
		Séparateurs		0,110				185,333
		Décoloration		0,100		J=42,333 R=6,466		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,06		J=10,666 R=1,233		00		0,033		00		Néant		Néant
20-07-2007		Huile brute		0,543		J=44,33 R=4, 13				4,2		143,33		0,066		0,060
		Mélangeur		0,177
		Séparateurs		0,086				58,333
		Décoloration		0,103		J=38,333 R=5,7		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,053		J=9,666 R=1 ,060		00		00		00		Néant		Néant
21-07-2007		Huile brute		0,533		J=42,66 R=4,3				4,2		144		0,06		0,050
		Mélangeur		0,166
		Séparateurs		0,070				36,666
		Décoloration		0,100		J=40 R=6,033		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,053		J=9 R=1,0		00		0,1		00		Néant		Néant
22-07-2007		Huile brute		0,500		J=43 R=4,3				4,1		144,66		0,07		0,068
		Mélangeur		0,223
		Séparateurs		0,096				32,666
		Décoloration		0,090		J=40 R=6,03		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,056		J=9 R=1,0		00		00		00		Néant		Néant
23-07-2007		Huile brute		0,506		J=42 R=4,4				4		144,33		0,063		0,057
		Mélangeur		0,300
		Séparateurs		0,116				58,333
		Décoloration		0,113		J=41,333 R=6,2		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,056		J=9 R=1,0		00		00		00		Néant		Néant
24-07-2007		Huile brute		0,536		J=46 R=4,4				4,2		145		0,066		0,051
		Mélangeur		0,160
		Séparateurs		0,106				48,333
		Décoloration		0,100		J=40 R=6,033		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,06		J=9 R=1,033		00		00		00		Néant		Néant
25-07-2007		Huile brute		0,700		J=44 R=4,2				4,2		145		0,06		0,060
		^Mélangeur		0,287
		Séparateurs		0,160				62,666
		Décoloration		0,110		J=39,333 R=5,933		00				00		Néant		Néant
		Désodorisation		0,06		J=44 R=4,3		00		00		00		Néant		Néant

Tableau IV : Huile de soja traitée enzymatiquement du 05/04/2008 au 2 1/04/2008.

Dates	Echantillons	Acidité (%)	Couleur (J/R)	Traces de savons (ppm)	Indice de peroxyde (meq/kg)	Phosphore (ppm)	Humidité (%)	Impuretés (%)
05-04-2008	Huile brute	0.440	^J=42R=4.5		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		45
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=37 R=6.0			00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.1	00	00	00	Néant	Néant
06-04-2008	Huile brute	0.460	J=44 R=4.4	00	5.2	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		53
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=34.66 R=4.26	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.1	00	0.1	00	Néant	Néant
07-04-2008	Huile brute	0.440	^J=42R=4.5		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH= 5.13 (1.500)		63
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.560	J=32 R=4.4	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.1	00	00	00	Néant	Néant
08-04-2008	Huile brute	0.460	^J=44R=4.4		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH= 5.1 (1.510)		60.33
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=32.66 R=4.4	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.06	00	00	00	Néant	Néant
09-04-2008	Huile brute	0.480	^J=44R=4.4		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		53
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=36.33 R=4.6	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.06	00	00	00	Néant	Néant
10-04-2008	Huile brute	0.480	^J=44R=4.4		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		54.66
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=35 R=4.36	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=10 R=1.1	00	00	00	Néant	Néant
11-04-2008	Huile brute	0.48	^J=44R=4.4		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH= 5.03 (1.496)		61
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=33 R=4.23	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.1	00	00	00	Néant	Néant
12-04-2008	Huile brute	0.456	^J=44R=4.2		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		58
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=34.66 R=4.3	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1 .13	00	00	00	Néant	Néant
13-04-2008	Huile brute	0.426	^J=42R=4.2		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		68
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=36 R=4.23	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.1	00	00	00	Néant	Néant
14-04-2008	Huile brute	0.440	^J=42R=4.5		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		48.33
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=39.33 R=5.03	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.046	J=1 0 R=1 .16	00	0.1	00	Néant	Néant
15-04-2008	Huile brute	0.440	^J=42R=4.5		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		54.66
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.520	J=32.66 R=4	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.046	J=1 0 R=1.03	00	00	00	Néant	Néant
16-04-2008	Huile brute	0.440	^J=42R=4.40		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH= 4.6 (1.090)		49.66
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.500	J=36.66 R=4.46	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.00	00	00	00	Néant	Néant
17-04-2008	Huile brute	0.953	^J=45R=4.40		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		60
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.723	J=38 R=5.00	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1.00	00	00	00	Néant	Néant
18-04-2008	Huile brute	0.953	^J=45R=4.40		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		60.66
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	0.700	J=40 R=7.06	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.050	J=1 0 R=1 .13	00	00	00	Néant	Néant
19-04-2008	Huile brute	0.946	^J=44R=4.4		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		60.66
	Séparateurs	0.500		15		10
	Décoloration	1.400	J=42.3 R=6.93	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.073	J=1 0 R=1.23	00	00	00	Néant	Néant
20-04-2008	Huile brute	0.920	^J=43R=4.4		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		61
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	1.123	J=37.66 R=5.43	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.070	J=1 0 R=1.2	00	00	00	Néant	Néant
21-04-2008	Huile brute	0.960	^J=45R=4.5		5.1	120	0.03	0.04
	Mélangeur	pH=5 (1.490)		53
	Séparateurs	0.500		15		5
	Décoloration	1.200	J=38 R=5.7	00		00	Néant	Néant
	Désodorisation	0.060	J=1 0 R=1.1	00	00	00	Néant	Néant