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UNIVERSITE PARIS VII
DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA
VIE
Tour 24-34, 2éme
étage
STAGE: Initiation à la recherche
BC 169 - BC 269
Daric Vladimir
Mise en évidence d'échangeurs
Cl-/HCO3- dans la branche large ascen-
dante médullaire du rein chez le rat
Soutenu : 03/1998
Stage effectué à l'Institut des Cordeliers,
Laboratoire de physiologie et endo- crinologie cellulaire et
moléculaire rénale, INSERM U356 Dire cteur:
Profe sseur Michel PAILLARD
Responsable de stage:
Professeur Pascal HOUILLIER Dr Anne BLANCHARD
SOMMAIRE
L e rein
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.4
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Structure et fonctions
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.4
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Glomérule
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.6
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Tubule rénal
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7
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Tubule proximal
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.7
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Tubule intermédiaire
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7
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Anse de Henle
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7
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Tubule distal
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.8
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Tubule contourné distal
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.9
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Tubule connecteur et collecteur initial.
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.9
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Canaux collecteurs
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10
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Canal collecteur cortical
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10
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Canal collecteur médullaire externe
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10
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Canal collecteur médullaire interne
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11
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Le système à contre-courant.
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.11
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L a branche large ascendante, mécanismes des
transports ioniques.....12
Introduction
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.12
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La microperfusion in vitro
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.13
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Résumé
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.13
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Les avantages et les limites de la méthode.
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14
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Le matériel et méthodes
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14
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Protocole
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16
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Résultats
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.18
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Discussion
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.20
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Mise en évidence et caractérisation
d'échangeurs Cl-/HCO3- sur les vésicules
des membranes plasmiques luminales et
basolatérales.
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.21
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Résumé
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.21
|
Les avantages et les limites de la méthode
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.21
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Méthode
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.22
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Les mesures des transports ioniques
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.22
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La filtration rapide
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.23
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Résultats
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.23
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Interpretation des résultats
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.24
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Le rein
Structure et fonctions
Le rôle du rein est de maintenir stable la composition
du milieu intérieur. On pourrait même dire que la composition de
ce milieu n'est pas déterminée par ce qu'on mange mais par ce que
le rein retient et élimine. En filtrant le sang pour le libérer
des produits du métabolisme tout en empêchant une trop grande
fuite d'eau et d'ions de l'organisme, le rein joue un rôle très
important dans le système de régulation de la composition du
milieu intérieur. Il assure, donc, de bonnes conditions pour le
fonctionnement des autres organes.
Les reins sont entourés d'une fine capsule protectrice
fibreuse. Leur forme rappelle celle d'un haricot. Sur la coupe transversale du
rein on distingue trois zones: à l'extérieur le cortex
qui entoure la médullaire de laquelle se
dégage le calice regroupant l'ensemble des tubes
collecteurs par lesquels s'écoule l'urine définitive.
Figure 1: Coupe transversale d'un rein.
1, calice
2, bassinet
3, graisse du sinus
4, artère intralobulaire
5, pyramide de Malphigi
6, cortex
7, rayon médullaire
8, colonne de Bertin
La majorité des études a été faite
sur des reins animaux, plus faciles à obtenir donc mieux connus. Le rein
humain a une médullaire composé de 4 à 18 cônes ou
pyramides de Malphigi tandis que le rein du rat correspondrait
à un rein formé par une seule pyramide de Malphigi et par le
cortex qui l'entoure; le rein de ce type est dit unipapillaire. Du
pourtour des pyramides vers la périphérie du cortex qui les
entoure s'étendent les rayons médullaires. Le parenchyme
cortical situé entre les rayons médullaires forme le
labyrinthe.
Le rein humain est composé d'environ 1 300 000
unités fonctionnelles, ou néphrons. Les néphrons
sont enrobés de tissu interstitiel où cheminent vaisseaux et
nerfs. Chaque néphron est com-
posé d'un glomérule et d'un tubule qui lui fait
suite. Le tubule urinifère comporte chez les
mammifères au moins 12 segments successifs différents
morphologiquement et fonctionnellement: Partie proximale qui
comprend le tubule proximal avec ces trois segments ( S1,S2,S3 ).
Partie intermédiaire comprend la
branche fine descendante et la branche fine ascendante de l'anse de Henle.
Partie distale comprend la branche large
ascendante médullaire et corticale de l'anse de Henle, le tubule
contourné distal et les canaux collecteurs ( avec successivement le
tubule connecteur, le canal collecteur cortical, le canal collecteur
médullaire externe et le canal collecteur médullaire interne
).
Figure 2. Répartition et segmentation de deux
types de néphrons: superficiel ou cortical à anse de Henle
courte, profond ou juxtamédullaire à anse de Henle
longue.
1, Glomérule
2, tube contourné proximal
3, tube droit proximal
4, branche descendante fine
5, branche ascendante fine
6, branche large ascendante
7, macula densa
8, tube contourné distal
9, tube connecteur et collecteur initial
10, canal collecteur cortical
11, canal collecteur médullaire externe
12, canal collecteur médullaire interne
De plus les néphrons se repartissent en trois groupes
en fonction de l'emplacement de leur glomérule. On a donc des
néphrons superficiels, corticaux moyens et juxtamédullaires.
Cette classification se fait selon la position du glomérule et la
profondeur de l'anse de Henle. Il n'est pas moins vrai que cette classification
reste schématique car les néphrons quelle que soit la situation
de leur glomérule, peuvent avoir une anse de Henle courte ou longue.
Ces différents segments des néphrons occupent une
place particulière dans le lobe rénal.
Dans le labyrinthe on trouve les glomérules. Les tubes
contournés proximaux et distaux se trouvent autour et au-dessus du
glomérule dont ils sont issus.
Les rayons médullaires contiennent la partie initiale des
tubes droits proximaux, la partie terminale des tubes droits distaux des
néphrons superficiels et moyens et le canal collecteur cortical.
Les tubes droits proximaux et distaux des néphrons se
trouvent dans la couche externe médullaire.
La portion descendante des tubes intermédiaires, la partie
initiale des tubes droits distaux se trouvent dans la couche interne de la
médullaire externe.
La médullaire interne contient les tubes de Bellini (
canaux collecteurs ), la partie fine descendante et ascendantes tubes
intermédiaires des néphrons à anse longue.
Les canaux collecteurs traversent tout le lobe rénal. Dans
la zone des rayons médullaires le tube contourné distal se jette
dans un tube collecteur qui, traversant la medulla, rejoint la papille.
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