2.5.3. Réalisation de la Du (Rhésus faible
réalisé quand il y a une absence d'agglutination avec
l'anti-D)
Mettre dans un tube à hémolyse une goutte du
sang total ou du culot globulaire et en faire trois lavages à l'eau
physiologique à 3000 tours/min pendant 3min puis égoutter
correctement le surnageant au dernier lavage. Réaliser ensuite une
suspension globulaire à 5% des hématies (19 gouttes d'eau
physiologique + 1 goutte du culot globulaire lavé) et prendre deux
gouttes de la suspension en y ajoutant deux gouttes de sérum-test Anti D
et deux gouttes de solution de LISS. Monter parallèlement un
témoin négatif et un témoin positif connu à
l'avance pour le contrôle. Incuber les tubes au bain marie pendant 15 min
à 37°C et faire trois lavages à 3000 tours/min pendant 3 min
puis égoutter correctement en ajoutant à chaque tube une goutte
d'anti globuline polyvalent (AGH). En fin, centrifuger les tubes à 1000
tours/min pendant une minute et faire la lecture en observant la
présence ou non d'agglutination dans un tube sur fond blanc ou au
microscope.
Lorsque la recherche de Du donne un
résultat négatif, l'individu est du rhésus négatif
et lorsque la Du donne un résultat positif, l'individu est
dit rhésus positif en transfusion sanguine.
2.5.4. Le test de compatibilité (test de Coombs)
du PSL
2.5.4.1. Principe
Le test de Coombs est une analyse du sang qui fait partie
intégrante des examens réalisés avant toute transfusion
sanguine. Il est également utilisé pour rechercher les
éventuelles causes d'une anémie. Son principe repose sur la mise
en évidence d'anticorps capables de
Gilchrist M.D. HOUINSOU 25
L'hémovigilance chez les personnes transfusées
à l'hôpital de Mènontin au Bénin
détruire ces propres globules rouges. Ces anticorps
sont dits auto-anticorps car ils sont produits par les cellules (globules
rouges, globules blancs...) de l'individu même en question. On distingue
alors, le test de Coombs direct dont le principe repose sur la recherche des
hématies sensibilisées et le test de Coombs indirect qui consiste
à rechercher ces anticorps dans le sérum. L'absence de ces
anticorps signifie que le test de Coombs, qu'il soit direct ou indirect est
négatif, dans le cas contraire, on parle d'un test positif.
2.5.4.2. Phase pré-analytique
A la réception ou au choix de la poche de sang
demandée, vérifier si tous les renseignements, toutes les
rubriques et cases de la FDN réservés au service demandeur sont
bien remplis puis vérifier la concordance avec l'identification du sang
test prélevé sur tubes secs ou EDTA et le bulletin de groupage.
Se laver ensuite les mains et centrifuger le sang test à 3000tr pendant
3 min.
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