2.5. Le groupage sanguin ABO rhésus
Les demandes de cessions de poches de sang et fiche de
distribution nominative (FDN) qui nous parviennent à la BS font l'objet
d'une vérification scrupuleuse avant tout démarrage de cession.
Ensuite, vérifier si la poche de sang demandée et la
quantité à servir sont disponibles. En fin, déterminer le
groupe sanguin ABO qui comporte deux épreuves : une épreuve
globulaire (dite de Beth-Vincent) qui permet de rechercher les antigènes
portés par les globules rouges du patient testé à l'aide
des sérums tests anti-A, anti-B et anti-AB ; et une épreuve
sérique (dite de Simonin) qui met en évidence les anticorps
présents dans le sérum à l'aide de globules rouges de
phénotype connu. La validation du groupe sanguin exige la règle
de quatre fois deux qui demande : deux techniques différentes, deux
déterminations effectuées sur deux prélèvements
différents, deux techniciens différents et deux lots de
réactifs différents.
2.5.1. Groupage en tube
2.5.1.1.Phase pré-analytique
Il faut réunir le matériel et disposer des
hématies-test A, B, et O Procédure de préparation des
hématies-test ABO
Disposer de trois tubes à hémolyse
identifiés A, B et O. Sélectionner trois échantillons
prélevés sur tube EDTA de groupe sanguin préalablement
connu A, B et O et centrifuger-les à 3000 tour/3min. Prélever
ensuite à l'aide d'une pipette pasteur le culot puis en faire trois
lavages avec de l'eau physiologique. Faire une suspension à 5% avec de
l'eau physiologique pour les trois tests et sortir les réactifs :
Sérum tests Anti-A, Anti-B, Anti-AB, Anti-D de type
Gilchrist M.D. HOUINSOU 23
L'hémovigilance chez les personnes transfusées
à l'hôpital de Mènontin au Bénin
IgM et IgG, Antiglobuline Humaine Polyvalente, et la solution
de LISS. Laisser les réactifs prendre la température du
laboratoire (température ambiante) et faire une suspension à 5%
des hématies de l'échantillon. Prévoir 8 tubes à
hémolyses puis les identifier selon le plan de travail.
2.5.1.2.Phase analytique
Distribuer deux gouttes de sérum de
l'échantillon dans les tubes à hémolyse
apprêtés pour le Simonin. Distribuer ensuite une goutte de la
suspension de l'échantillon dans les tubes réservés au
Beth Vincent et dans le tube réservé au Rhésus. Mettre
respectivement dans les tubes de Simonin une goutte des hématies A, B et
O et une goutte de sérum Anti-D dans le tube du Rhésus. Mettre
respectivement dans les tubes du Beth Vincent une goutte de sérum tests
Anti-A, Anti-B, Anti-AB, homogénéiser par de petites secousses et
centrifuger à 1000trs par minute pendant une minute. En fin, faire la
lecture, vérifier la concordance entre le Beth Vincent et le Simonin
puis faire la recherche de Du si nécessaire.
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