Contamination microbiologique, physico-chimique et métaux lourds des sols de la ville de Fès

Annexe1

Liste des Milieux de culture utilisés Milieu du Tergitol

- Lactose : 20,0 g/l

- Peptone : 10,0 g/l

- Extrait de levure : 6,0 g/l - Extrait de viande : 5,0 g/l - Agar-agar: 12, 7 g/l

- Eau: 1000 ml

- Tergitol 7 : 0,1 g/l

- TTC : 0,025 g/l

Milieu de Slanetz et Bartley

- Peptone de caséine : 15,0 g/l

- Peptone de farine de soja : 5,0 g/l - Extrait de levure : 5,0 g/l

- D(+)- glucose : 2,0 g/l

- Hydrogénophosphate dipotassique : 4,0 g/l

- Agar-agar : 10,0 g/l

Milieu PCA

-Tryptone : 5,0 g

- Extrait autolytique de levure :2,5 g

- Glucose :1,0 g

- Agar agar bactériologique :12,0 g

Milieu CHAPMAN

- Peptone : 10,0 g/l

- Extrait de viande : 1,0 g/l - D (-) mannitol : 10,0 g/l - Agar-agar : 12,0 g/l

- Eau : 1000ml

Milieu CETREMIDE

- Peptone de gélatine : 20,0 g/l

- Chlorure de magnésium : 1,4 g/l - Sulfate de potassium : 10,0 g/l

- Agar-agar : 13,0 g/l

- Eau : 1000 ml

Milieu HEKTOEN

-Protéose-peptone-extrait de levure : 3,0 g

-Lactose : 12,0 g

-Saccharose : 12,0 g

-Salicine : 2,0 g

-Citrate de fer III et d'ammonium 1,5 g

-Sels biliaires : 9,0 g

-Fuchsine acide : 0,1 g

-Bleu de bromothymol : 0,065 g -Chlorure de sodium :5,0 g -Thiosulfate de sodium : 5,0 g -Agar : 14,0 g

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Annexe 2

Méthode de manipulation pour les analyses bactériologiques:

(Coliformes totaux et fécaux, streptocoques, pseudomonas, staphylocoque)

Préparation des échantillons

Préparation des dilutions

1 ml de l'échantillon + couler le milieu approprié

Incubation a une température spécifique pour chaque germe et pendant un
temps bien précis

Dénombrement bactéries

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Annexe 3 :

Méthode de manipulation pour les analyses bactériologiques: (suite) (Salmonella)

Étape de pré-enrichissement
(10 ml de l'échantillon dans 100 ml de l'eau peptone cc)

Incubation pendant 24 h a 37 °c
1 ml de l'échantillon pré-enrichi coulé dans des tubes contenant le rappaport
Incubation pendant 24h a 37 °C

Ensemencement des tubes dans de l'Hektoen

Dénombrement bactéries

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Annexe 4

Coloration de Gram

- Préparation et fixation d'un frottis a partie d'une colonie bien isolée; - Coloration avec le Crystal violet pendant une minute;

- Lavage de la lame avec de l'eau courant;

- Mordançage avec la solution de lugol pendant 90 secondes; - Décoloration avec la solution d'alcool acétone;

- Lavage sous le robinet;

- Faire un trait épais au crayon gras au milieu de la lame;

- Coloration avec la fuscine pendant 60 secondes;

- Rincer à l'eau courante et sécher sur papier filtre;

- Observation au microscope optique à l'objectif × 100 à immersion.

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