IV.4.1.3 Dosage du carbone organique total et de
l'azote total
Le carbone organique total a été
déterminé selon la méthode de Walkley-Black utilisant
l'oxydation dans un mélange de bichromate de potassium et d'acide
sulfurique. Ainsi, on admet que la quantité d'oxygène
consommée est proportionnelle à celle du carbone que l'on veut
doser. La teneur en matière organique a été
calculée en multipliant la valeur du carbone obtenue par 1,72. L'azote
total (N-total) a été déterminé selon la
méthode de Kjeldahl, en oxydant les substances organiques après
traitement de l'échantillon de sol avec l'acide sulfurique
concentré. Le carbone et l'hydrogène se dégagent à
l'état CO2 et H2O. L'azote transformé en ammoniac, est
fixé par l'acide sulfurique, à l'état de sulfate
d'ammoniaque. Enfin, l'ammoniac formé est déplacé de ses
combinaisons par la soude caustique, distillée et recueillie dans une
solution d'acide sulfurique (1N), puis dosée par une solution
d'hydroxyde de sodium NaOH (1N).
IV.4.1.4 Cations échangeables et Capacité
d'Echange Cationique(CEC)
Les cations échangeables et la CEC ont
été mesurés selon la méthode de Metson qui comporte
trois étapes. Après la saturation de l'échantillon en ions
ammonium (NH4+) par percolations successives
d'une solution d'acétate d'ammonium (CH3CO2NH4)
à 1 mol.l-1, pour extraire les bases échangeables,
l'excès des ions ammonium est éliminé par percolations
d'alcool éthylique, on procède ensuite à leur
échange par une solution de chlorure de sodium à
1 mol.l-1. Les ions ammonium déplacés et les bases
29
échangeables sont dosés par la méthode
Kjeldahl, sur la solution de NaCl, une fois filtrée, pour
déterminer la CEC.
IV.4.2 Détermination des paramètres des
milieux de culture
IV.4.2.1 Détermination de la teneur en
phosphore
Le phosphore en solution a été
déterminé par spectrophotométrie grâce au kit
Spectroquant phosphate qui est une méthode basée sur le dosage
des ions orthophosphates. En effet, dans une solution sulfurique, les ions
orthophosphates forment avec les ions molybdates, l'acide phosphomolybdique.
Celui-ci est réduit par l'acide ascorbique en bleu de
phosphomolybdène (BPM), qui est dosé par photométrie.
L'absorbance a été mesurée à 790nm
et convertie en mg.kg-1 à l'aide de la gamme étalon
établie (Figure16).
1,2
1
y = 7,5116x - 0,0249 R2 =
0,9971
0,6
0,4
0,2
0
Concentration en (mgP/L) Ions
Phosphate
0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14 0,16
DO (nm)
Figure 16 : Courbe étalon du phosphore
Y = Taux de phosphore;
X = Densité Optique ou Absorbance de l'échantillon
; R2 = Coefficient de determination
30
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