II.2.3. Purification de souches
Après croissance du champignon, de nouveaux
milieux de culture ont été préparés pour servir au
repiquage. Ce dernier visait à obtenir une culture pure du M.
fijiensis ; il a été réalisé en
prélevant un morceau de culture PDA contenant le mycélium du
champignon et en le déposant dans des nouvelles boites de Pétri
contenant des milieux de culture nouvellement préparés.
II.2.4. Ensemencement du M. fijiensis sur milieu de culture
incorporé de jus de plantes
II.2.4.1. Préparation de milieu
Nous avons utilisé presque la même
procédure détaillée ci-haut mais, cette fois-ci en
utilisant 4 erlenmeyer avec 4,875 g de milieu de culture PDA, 125ml d'eau
distillée, chacun.
II.2.4.2. Extraction et incorporation du jus de plantes
biopesticides dans le milieu de culture PDA
Les jus
de Z. officinale et T. vogelii ont été obtenus
grâce à la méthode d'extraction suivante :
- Nettoyer les rhizomes de
Z. officinale et feuilles de T. vogelii ;
- Eplucher les rhizomes de Z. officinale, puis
prélever 20 g de rhizomes et 20 g de feuilles de T.
vogelii ;
- Broyer séparément les 20 g de rhizomes de Z.
officinale et les 20 g de feuilles de T. vogelii dans
le mortier en porcelaine ;
- Ajouter 100ml d'eau distillée dans le mortier et
extraire le jus en pressant les particules des feuilles et rhizomes
broyés;
- Récolter à l'aide d'une pipette, le jus ainsi
extrait et mettre séparément, dans un tube à essai, le jus
de chacune de plantes et du mélange;
- Les jus des plantes extrait ont été
incorporé dans 125ml de milieu PDA de manière
séparée puis en mélange, suivant les quantités de
0,5ml, 1ml, 2ml et 3ml et coulé dans des boîtes de pétri.
- Les fragments des mycéliums du champignon M.
fijiensis issu de la culture pure ont ensuite été
ensemencés dans le milieu PDA (préparé comme
indiqué précédemment) dans lequel on y avait
incorporé les extraits des plantes (Z. officinale et T.
vogelii).
Pour évaluer l'action fongicide des différents
extraits des plantes à différentes quantités, un
témoin (milieu PDA sans incorporation) avait été
utilisé. Les milieux ensemencés ont été mis en
observation durant une période de 5 semaines.
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