La fièvre de la vallée du rift en république démocratique du Congo. "Occurrence et étude des cas chez les bovins dans le nord de la province du Katanga "

I.7.3 Diagnostic de laboratoire

Les prélèvements de choix sont :

§ Sang entier (20ml) provenant d'animaux fébriles avec un anticoagulant : acide éthylène-diamine-tétracétique (EDTA) ou héparine (pénicilline 200 unités et streptomycine 200ug/ml) pour la virologie,

§ Sérum (10ml) provenant d'animaux présentant une fièvre aigue et ceux convalescents pour la sérologie,

§ Echantillons de tissus frais provenant d'animaux morts récemment et de foetus avortés (rate, foie, reins, ganglions lymphatiques, coeur, cerveau) et placés dans des récipients stériles,

§ Tissus fixés (rate et foie) dans du formol tamponné à 10% pour l'histopathologie.

Tous les échantillons doivent être expédiés à 4°C (sachets réfrigérants). Si les délais d'expédition dépassent 24 heures, les tissus frais et les échantillons sérologiques doivent être congelés à -20°C, puis expédiés avec des sachets réfrigérants.

Lors de la manipulation et de l'expédition des prélèvements, toutes les précautions doivent être prises pour empêcher la contamination des personnels, notamment en prêtant attention au risque d'aérosolisation de gouttelettes de sang.( http://www.oie.int/fr/maladies/fiches/f_a080.htm).

I.7.3.1 Histopathologie

La découverte de lésions histologiques caractéristiques avec des pan-nécroses dans les foies des jeunes animaux ou des foetus est caractéristique de la FVR.

( http://www.oie.int/fr/maladies/fiches/f_a080.htm).

I.7.3.2 Isolement du virus

Le virus de la FVR peut être isolé à partir du sang total ou d'homogénats de tissus frais par :

a. Injection intracérébrale sur des souris de lait,

b. Injection intra péritonéale sur des souris ou des hamsters adultes,

c. Inoculation du virus à des cultures de tissus (Véro, CER, BHK-21, lignées de cellules de moustiques ou cultures de cellules primaires de reins et de testicules de veau, d'agneau et de chèvre).

L'identité du virus isolé est confirmé par :

§ Une réaction en chaîne de la polymérase (PCR),

§ Un essai d'immuno-absorption enzymatique (ELISA),

§ Des tests de coloration fluorescente aux anticorps.

§ De séroneutralisation du virus

I.7.3.3 Détection des antigènes

L'antigène de la FVR peut être détecté par quatre types de tests :

a. Tests d'immunofluorescence directe ou indirecte sur des calques ou des coupes de foie, de rate ou de cerveau.

b. Tests d'immunodiffusion en gélose (IDG) sur des tissus frais (diagnostic rapide)

c. Tests ELISA (dosage immunoenzymatique).

d. Tests d'immunohistochimie (HIC) : la coloration histochimique de coupes congelées ou de tissus fixés au formol.

e. Technique d'amplification en chaîne par polymérase RT-PCR (Reverse Transcriptase- Polymérase Chain Réaction).