b) Eléments cliniques
o Notion de comportement à risque chez le donneur :
· Rapports sexuels non protégés avec des
partenaires multiples et occasionnels ;
· Infections sexuellement transmissibles ;
· Toxicomanie par voie parentérale ;
o Antécédent de transfusion sanguine dans les
trois mois avant le don ;
o Notion de lésions cutanéo-muqueuses non
prurigineuses.
c) Eléments paracliniques : tests
sérologiques
> Recherche de l'antigène de surface
du virus de l'Hépatite B ;
> Recherche des anticorps dirigés
contre le virus de l'Hépatite C ;
> Recherche des anticorps dirigés
contre le virus de
l'immunodéficience humaine ;
> Recherche des anticorps dirigés
contre les substances lipoïdiques libérées par les cellules
de l'hôte endommagées par le Treponema pallidum, par le
test Réagine Plasmatique Rapide (RPR).
d) La réagine plasmatique rapide (ou rapid
plasma reagin : RPR) 1. Principes
C'est une réaction d'agglutination passive sur lame
utilisant un antigène de nature lipidique auquel on associe des
particules de charbon colloïdal micro dosées qui se combinent aux
anticorps
25
présents dans le sérum ou le plasma du patient
(8). Il est accompagné d'un témoin négatif et d'un
témoin positif.
Le terme réagine signifie que ce test ne permet pas de
rechercher les anticorps dirigés contre le Treponema pallidum
mais plutôt les anticorps (IgG ou IgM) produits par l'organisme en
réponse à la libération des substances lipoïdiques
par les cellules de l'hôte endommagées ainsi qu'à celle de
substances de type lipoprotéines libérées par les
spirochètes(6). C'est un test rapide, peu onéreux et très
simple (13).
C'est un test qualitatif, il est cependant également
possible de titrer le taux d'anticorps par dilution à moitié.
2. Techniques (6) a) Test qualitatif
Les contrôles positifs et négatifs du Kit doivent
être utilisés avec chaque lot de tests.
1) Placer 0,05 ml d'échantillon du patient ou de
contrôle dans un cercle sur la carte du test,
2) Etaler régulièrement l'échantillon
sur la surface du cercle sur la carte,
3) Secouer la fiole d'antigène RPR pour bien
mélanger,
4) Monter l'aiguille de distribution sur le flacon
compte-goutte en plastique et reprendre l'antigène RPR par
aspiration,
5) Inverser le flacon compte-goutte et presser pour chasser
l'air de l'aiguille,
6) En maintenant verticalement le flacon compte goutte
au-dessus de l'échantillon (sur la carte), faire tomber une seule goutte
d'antigène,
26
7) Placer la carte sur un agitateur à cartes et agiter
à 100tours/ minute pendant 8 minutes,
8) Lire et interpréter visuellement les résultats
sous un bon éclairage.
b) Test semi-quantitatif
La technique est la suivante :
1) Faire des dilutions à moitié avec une solution
salée au 1 /16ème normale non diluée,
2) Verser 0,05 ml de chaque dilution dans un cercle
séparé sur la carte de test,
3) Etaler régulièrement chaque dilution sur tout
le cercle,
4) Continuer comme pour le test qualitatif à partir de
l'opération 2.
Le titre des anticorps sera exprimé en inverse de la plus
haute dilution pour laquelle on aura constaté une agrégation des
particules de charbon.
Au CPTS-Kisangani, c'est le test qualitatif qui est en
général utilisé.
3. Interprétation des résultats
(6)
L'interprétation se fait à l'oeil nue, l'apparition
de l'agglutination signifie que le test est positif :
- Fortement réactif : on voit de larges
amas de particules de charbon sur fond transparent ;
- Réactif : larges amas de particules de
charbon un peu dispersés que dans le cas d'un essai fortement
réactif ;
- Faiblement réactif: petits amas de
particules de charbon sur un fon gris clair ;
- A peine réactif: légère
agrégation de particules de charbon apparaissant
généralement sous forme d'un bouton d'amas au
27
centre du cercle sur la carte ou d'amas dispersés le
long du bord du cercle ;
- Non réactif: aspect gris
homogène, ou bouton de particules de charbon non agrégées
au centre sur la carte.
4. Performance du test RPR
La sensibilité du RPR est de 99,3% (20). Des faux
positifs peuvent être rencontrés : dans les infections virales
(varicelle, rougeole, mononucléose infectieuse), le lymphome, la
tuberculose, endocardite, la grossesse.
La spécificité du test RPR vis-à-vis des
anti-lipoïdiques est de 100%. Cependant, cette spécificité
est nulle vis-à-vis des anti-tréponemiques (9).
| 
