II-2-2-5- Analyse statistique
La comparaison des pourcentages moyens d'augmentation et
d'inhibition a été faite en utilisant le logiciel STATISTICA
VERSION 10, en effectuant le test d'ANOVA à sens unique ou «
one way », suivi par le test de Tukey « post hoc
». Une différence significative est représentée
par un p < 0,05 ; n = 4, représente le nombre d'expériences
par groupe.
II-2-3- Évaluation de l'activité
antispasmodique in vivo II-2-3-1- Modèles d'étude de
l'activité antalgique
Il existe de nombreuses méthodes pour étudier
l'activité antalgique d'une substance supposée
analgésique, Dans l'expérience réalisée, le test
suivant a été mis en exergue.
? Writhing test:
L'injection intra-péritonéale d'une solution de
phénylbenzoquinone ou d'acide acétique à 1% chez la souris
ou le rat provoque un syndrome douloureux qui se manifeste par des contorsions
caractéristiques de type de mouvement d'étirement des pattes
postérieures et du muscle dorso-ventral (spasmes) qui peuvent être
réduites par un produit analgésique.
? But :
Afin d'évaluer et confirmer l'effet spasmolytique de
l'H.E de Romarin sur les souris.
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? Principe :
La vérification de l'action inhibitrice de l'H.E sur
la douleur induite chez les souris par injection intra-péritoniale d'une
solution diluée d'acide acétique à raison de 0.1/10 g de
poids corporel de l'animal.
II-2-3-2- Choix du modèle animal
La méthode mise en évidence recommande
l'utilisation des souris de souche N.M.R.I pour des raisons de
commodité.
II-2-3-3- Choix des doses
Les doses de l'H.E diluée sont 0.01%, 1%.
II-2-3-4- Protocole expérimental
? Étape préliminaire :
? Préparation de quatre lots, chacun est
composé de cinq souris mâles et femelles, souche N.M.R.I de poids
22#177;2 g, qui ont été maintenues à jeun pendant 18 h
avant le début de l'expérience.
? Dilution de l'H.E dans l'eau physiologique afin de
préparer deux doses (tableau VI).
? Préparation de l'acide acétique à 1%
dilué avec l'eau physiologique.
? Préparation de Phloroglucinol (80mg/kg)
utilisé comme anti-spasmodique officinal, qui porte le nom commercial :
Spasfon; sa dose efficace pour arrêter l'inflammation est 160mg (dans
3ml) pour un homme de 70kg. Pour une souris d'un poids approximatif de 20mg, la
dose suffisante est de 0.09 mg/ml, donc on a dissout deux comprimés dans
800ml d'eau physiologique.
? Mode opératoire :
La répartition des lots est présentée
dans le tableau VI et les étapes de cette
expérience sont présentées dans l'annexe
8.
? A To :
- Gavage de 0.5 ml de l'eau physiologique pour le lot
témoin (1).
- Gavage de 0.5 ml de la solution de Phloroglucinol (80mg/kg)
pour le lot référence (2).
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- Gavage de 0.5 ml de l'H.E diluée avec l'eau
physiologique en deux doses : 0.01% et 1% pour les lots d'expérience (3)
et (4) respectivement.
· Après 30 min :
- Toutes les souris reçoivent 0.2 ml de la solution
d'acide acétique à 1% par voie I.P.
· Après 5 min :
- Comptage du nombre de spasmes observé chez les souris
pendant 10 min (Vogel et Vogel, 1997).
Tableau VI: Répartition des lots utilisés
dans l'activité antispasmodique.
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|
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N° lot
|
Essais
|
Objectifs
|
|
Témoins
|
|
|
1
|
Eau physiologique puis l'acide acétique à 1%.
|
Mise en évidence de
l'activité spasmodique de
l'acide acétique.
|
|
2
|
Solution de Phloroglucinol
(80mg/kg) puis l'acide
acétique à 1%.
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Vérification de l'effet
spasmolytique du
médicament.
|
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Essais des
l'H.E.
|
doses
|
de
|
3
|
H.E à 0.01% puis l'acide
acétique à 1%.
|
Mise en évidence de
l'activité analgésique de
l'H.E et la relation
dose/effet.
|
|
4
|
H.E à 1% puis l'acide acétique à 1%.
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