I.3 Méthodes
Elle s'est déroulée pendant quatre mois dans
les régions précédemment citées. Elle a
porté sur divers volets. Il s'agit d'une enquête
rétrospective.
I.3.1. Enquête sur le terrain
L'enquête a eu lieu dans les zones d'étude
précise et a concerné les propriétaires des chevaux
ciblés. Elle a été réalisée sur la base
d'une fiche d'enquête établie à cet effet (cf. annexe1).
Les paramètres visés par cette enquête ont porté sur
l'activité professionnelle des propriétaires, le signalement des
chevaux (race, sexe, âge, robe, poids, marques particulières).
I.3.2. Examen clinique et prélèvement
'( Examen à distance
Cet examen a consisté à observer l'état
général, et a permis de faire le signalement de l'animal.
'( Examen rapproché
Suite à une bonne contention de l'animal (par flexion
d'un membre antérieur, ou l'utilisation d'un tord nez), nous avons
procédé à l'examen clinique. Cet examen
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a consisté à observer les muqueuses, la prise de
température, la palpation des ganglions.
Ensuite, le prélèvement sanguin a
été réalisé au niveau de la jugulaire de l'animal,
à l'aide d'un matériel adéquat et dans les tubes
possédant un anticoagulant. Chaque tube a été
identifié par un numéro après le
prélèvement. Du sérum a été collecté
après centrifugation ou décantation. Les différents
échantillons prélevés ont été soit
analysés immédiatement (sur le terrain), soit conservés
convenablement (congélation) jusqu'à analyse au laboratoire.
I.3.3 Analyses
Sur le terrain, des lames de frottis ont été
réalisées et coloré au Giemsa rapide (R), ainsi que les
techniques du Buffy Coat et de centrifugation en microtubes capillaires
à hématocrite.
Au laboratoire, les sérums ont été
analysés par le CATT/T. evansi (Card
Agglutination Test for Trypanosomiasis) au Laboratoire de Parasitologie du
Centre Nationale d'Elevage et de Recherches Vétérinaires (CNERV)
de Nouakchott (Mauritanie). Le CATT a été mis au point
conjointement par l'Université Libre de Bruxelles (VUB) et l'Institut de
Médecine Tropicale (I.M.T) d'Anvers [12].
Les sérums à tester sont dilués au 1/4
avec le tampon phosphate salin PBS à pH 7,2.
L'antigène et les témoins reconstitués
sont bien agités de façon à obtenir des suspensions
très homogènes.
Le test est réalisé en déposant une
goutte d'antigène (environ 45 ul) sur chaque cercle de la carte. Puis on
y ajoute 25 ul de sérum dilué. Le tout est mélangé
et étalé à l'aide des baguettes de manière à
couvrir la surface du cercle en laissant
60
1 mm d'espace du bord interne du cercle. Après
remplissage de la carte, celle-ci est placée sur l'agitateur pendant 5
minutes.
Les résultats sont exprimés selon un score
allant de -, #177;, + à +++ (négatif, douteux, positif,
fortement, très hautement positifs (cf. Annexe 2).
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