Etude microbiologique de l'eau consommée par les habitants de kafubu

IV.2.2.2. Milieu Gélose chocolat

Les milieux au sang servent soit pour cultiver une certaine espèce bactérienne (haemophilus), soit améliorer les qualités du milieu, soit à rechercher le pouvoir hémolytique des bactéries.

Gélose au sang cuit (gélose chocolat) il est quelque fois utile de détruire par chauffage les substances antibactériennes du sang.

IV.2.2.3. Milieu SS :(Salmonella - Shigella)

C'est un milieu sélectif utilisé pour l'isolement des Salmonelles et des Shigella.

Les coliformes et les germes gram positif, sont inhibés par un mélange de sels biliaire.

Lecture

-Lactose négative : colonies incolores ;

-Lactose positive : colonies roses ou rouges.

-centre noir : H₂S +

-Pas de centre noir : H₂S -

Ne cultivent normalement sur ce milieu que le gram- cultivant facilement.

Toutefois on peut rencontrer des Entérococcus tout particulièrement pour certaines compositions. Les coliformes comme les bacilles oxydase+ ne sont pas inhibés contrairement aux affirmations parfois rencontrées.

IV.2.3. MILIEUX D'IDENTIFICATION

IV.2.3.1. Milieu KLIGER

- Ce milieu est utilisé pour l'identification biochimique des entérobactéries.

- Il permet de mettre en évidence les fermentations du glucose, du lactose, du gaz et de la production de H₂S.

- Et utilisé avec le bouchon débloqué.

1. Technique

· La pente doit être abondamment ensemencée (stries serrées).

· Le culot est ensemencé par simple piqure.

Incubation : 37°C pendant 18 à 24 heures

2. Lecture

- Interprétation de la pente

· Pente rouge : bactérie lactose +

· Pente jaune : bactérie lactose -

- Interprétation du culot

· Les bactéries fermentent le glucose avec production importante d'acides organiques

· Si la bactérie n'est pas capable de fermenter le glucose, le culot reste rouge

· Culot rouge : bactérie glucose -

· Culot jaune : bactérie glucose +

· Production de gaz

La production de gaz lors de l'utilisation des glucides est évidence par le décollement de la gélose et ou des bulles dans la gélose (on parle aussi de la « fragmentation » de la gélose).S'il n y a pas ces témoins de dégagement gazeux, la bactérie est gaz- .

· La production de H₂S

Elle a lieu à partir de l'ion thiosulfate :

-Le sulfure d'hydrogène réagit avec les ions fer III(Fe³⁺) du citrate de fer pour former un précipité de sulfure de fer noir.

Ainsi :

· Bactéries H₂S+ : précipité noir ;

· Bactéries H₂S- : pas de précipité noir.

IV.2.3.2. Milieu de citrate de Simmons

Ce milieu sert d'identification des Entérobactéries par l'utilisation du citrate. Seuls les germes capables d'utiliser le citrate comme source de carbone, pourront se développer sur le milieu de Simmons

1. Lecture

-Milieu positif : vire du vert au bleu ;

-Milieu négatif : reste vert.

On recherche 4 caractères biochimiques :

ü Lactose :(Lactose (+) =virage de la pente du rouge au jaune et Lactose (-)=le milieu reste intact ou restez rouge.

ü Glucose (Glucose (+) soulèvement du milieu et Glucose (-)= fragmentation du milieu.

ü H₂S :(H₂S (+) ily aura noircissement sur le milieu qui peut être soit dans le culot ou soit sur la pente, exemple des genres qui peuvent produire de H₂S : Salmonelles, Proteus, Cytrobacteres etc.).Et si H₂S (-) pas de noircissement ni sur la pente, ni dans le culot.