Evaluation et caractérisation du statut martial chez les femmes en à¢ge de procréer non enceintes et les femmes au cours de la grossesse en Côte d'Ivoire: étude multicentrique dans la ville d'Abidjan

2-2-2. Techniques biochimiques

Les méthodes biochimiques utilisées dans cette étude sont issues des techniques de dosages des kits fournis par la compagnie SPINREACT S.A (Ctra.Santa Coloma, Espagne). L'automate LisaBio 300 (Hycel groupe, Pouilly en Auxois, France) a permis la lecture de valeurs des concentrations sériques de fer, de transferrine et de ferritine.

2-2-2-1. Dosage du fer sérique

La mesure des concentrations sériques du fer est réalisée par dosage colorimétrique qui a utilisé le kit « Iron FerroZine ».

2-2-2-1-1. Principe du dosage du fer

Dans le sang, le fer est lié à la transferrine sous la forme trivalente (forme oxydée ou forme ferrique ou Fe³⁺). L'utilisation d'un milieu acide a favorisé la rupture de la liaison transferrine-fer. Nous obtenions donc la forme ferreuse ou forme réduite du fer (Fe²⁺).

En présence du chromogène (FerroZine), les ions ferreux ont formé un complexe coloré qui est mesuré par l'automate Lisa Bio 300. L'intensité de coloration de ce complexe était proportionnelle à la concentration du fer dans l'échantillon de sérum.

2-2-2-1-2. Détermination des concentrations sériques de fer

Le chromogène et l'étalon (fer aqueux standard de niveau fondamental ou « IRON Calibrator ») sont conditionnés par le fabricant pour un usage direct. Cependant, le tampon et le réducteur sont associés pour obtenir le réactif de travail. Selon les recommandations du kit « Iron FerroZine », nous avons dissout le contenu d'un tube R2 (Réducteur) dans celui d'une boite de R1 (Tampon) pour former le réactif de travail (RT). Pour les besoins des manipulations, nous avons préparé le contenu de chaque tube avant la lecture à l'automate LisaBio 300 suivant également les recommandations du kit « Iron FerroZine » (Tableau VI). Le contenu de chaque tube est modérément mélangé puis incubé pendant 10 minutes à la température du laboratoire. La mesure des concentrations sériques de fer associant leur contrôle est réalisée automatiquement par l'automate LisaBio 300. Pour les valeurs normales selon ce kit, les concentrations sériques du fer sont entre 7,16 et 26,85 umol/l.

Tableau VI: Mode opératoire pour la lecture des concentrations sériques du fer

Réactifs	Tube Blanc réactif de travail	Tube étalon de fer	Tube échantillon de sérum	Tube témoin échantillon
Réactif de travail (ml)	1	1	1	1
Chromogène (gouttes)	1	1	1	-
Eau distillée (ul)	200	-	-	-
Etalon de fer (ul)	-	200	-	-
Echantillon de sérum (ul)	-	-	200	200

- : Le tube à analyser n'a pas reçu le réactif concerné