2.2.3 Caractérisation
des huiles essentielles d'Eucalyptus
2.2.3.1 Caractérisation
organoleptique
La caractérisation organoleptique des huiles
essentielles d'Eucalyptus a consisté à
évaluer ; l'aspect, la couleur et l'odeur, en utilisant les sens.
3.2.3.2 Caractérisation physico-chimique
La caractérisation physico-chimique des huiles
essentielles d'Eucalyptus a consisté à déterminer
les indices physico-chimiques des huiles essentielles
d'Eucalyptus :
1. Indice de réfraction
L'indice de réfraction d'une matière, est un
nombre qui caractérise le pouvoir qu'à une matière,
à ralentir ou à dévier la lumière. La
détermination de l'indice de réfraction a été faite
de la manière suivante :
Etalonner l'appareil à l'aide d'une substance (eau
distillée) d'indice de réfraction connu 1,33 à la
température fixée à 20°C, nettoyer les prismes et
déposer quelques gouttes d'huile essentielles d'Eucalyptus
entre les deux faces des prismes, Regarder dans l'oculaire et tourner le bouton
de réglage de l'indice de réfraction pour amener les zones
sombres et éclairées au centre du réticule, noter la
valeur de l'indice par l'échelle de lecture. (AFNOR, 2000). Etant
donné que la déterminationde l'indice de réfraction
était faite à une température différente de 20
°C, on a effectué la correction par le biais de la formule
2.3 :
Avec :
n20 : indice de réfraction à 20
°C
nT : indice de réfraction à une
température différente de 20 °C
T : température à l'instant de la mesure
0,00045 : constante d'indice de réfraction lorsque
la température varie
2. Densité
La densité est une grandeur physique qui
caractérise la masse d'une huile essentielle par unité de volume.
La masse ainsi que le volume des huiles essentielles ont été
déterminés par la pesé de 1 ml de l'huile essentielle
à l'aide d'une balance analytique de précision à une
température définit. Ainsi la densité était
calculée selon l'équation 2.4 :
Avec :
d20 : densité relatif de l'huile
essentielle (densité à 20 °C)
dè : densité à la température
de la mesure
è : température de mesure
0,00068 : constante de la variation de la densité
quand la température varie de 1 °C
3. pH
Pour la mesure du pH on a utilisé le pH-mètre
4. Indice d'acide
L'indice d'acide est le nombre de milligramme de KOH
nécessaire pour neutralisation les acides gras libres contenus dans un
gramme d'huile essentielle (Rabiai et al., 2014). La détermination de
l'indice d'acide se fait de la manière ci-dessous :
Introduire 0,2 g de l'huile essentielle d'Eucalyptus dans
l'erlenmeyer propre et sec, ajouter 5 ml d'éthanol mettre 3 gouttes de
phénolphtaléine puis neutraliser la solution obtenue aves
l'hydroxyde de potassium. Arrêter le titrage de que la couleur de la
solution variée (change de coloration). A la fin de titrage, lire le
volume de KOH consommé.
L'indice d'acide est calculé par l'équation
2.5 :
Avec :
IA : Indice d'acide
N : Normalité de de l'hydroxyde de
potassium
V: Volume de l'hydroxyde de potassium consommé
M : Masse de l'huile essentielle utilisée
5. Indice de saponification
C'est le nombre de milligrammes d'hydroxyde de potassium
(KOH), nécessaire pour neutraliser les acides gras libres et saponifier
les acides gras combinés (esters) présents dans un gramme de
l'huile essentielle. L'indice de saponification a été
réalisé de la manière suivante :
Peser 2 g de l'huile essentielle à analyser que l'on
introduit dans un ballon rond puis y ajouter 6 ml du mélange
éthanol-éther de pétrole (1 :1), et 25 ml de la
potasse alcoolique 0,5 N, porter le mélange à l'ébullition
sur un bain marie pendant 1 heure. Titrer le mélange avec l'acide
chlorhydrique 0,5 N, effectuer parallèlement l'essai à blanc.
L'Indice de Saponification est calculé selon
l'équation 2 .6 :
Avec :
V0 : Volume en ml de HCl utilisé pour
l'essai à blanc ;
V1 : Volume en ml de HCl utilisé pour
l'échantillon à analyser ;
N : la normalité de la solution d'acide
chlorhydrique 0,5 N ; et
M : Masse de la prise d'essai en gramme.
6. Indice d'esther
L'indice d'ester est le nombre en mg de KOH nécessaire
à la neutralisation des acides libérées par hydrolyse des
esters contenus dans un gramme d'huile essentielle.
L'indice d'ester est calculé par l'équation
2.7 :
Avec :
IE : Indice d'ester,
IS : Indice de saponification,
IA : Indice d'acide.
7. Indice d'iode
L'indice d'iode d'un corps est la masse d'iode,
exprimée en gramme, que l'on peut fixer par addition sur 100 grammes de
l'huile essentielle. Il permet d'évaluer le degré d'insaturation
des acides gras, contenus dans les huiles essentielles. L'indice d'iode a
été déterminé de la manière
suivante :
Peser 0,2 g de l'huile essentielle d'Eucalyptus, le mettre
dans un erlenmeyer propre et sec, ajouter 15 ml de tétrachlorure de
carbone et 15 ml de Monochlorure de carbone, agiter le mélange et
laisser reposer pendant 1 heure. Ajouter 20 ml d'iodure de potassium à
10 % et 150 ml d'eau distillée, Titrer avec la solution de thiosulfate
de sodium à 0,1 N jusqu'à ce que la couleur jaune due à
d'iode ait presque disparu. Ajouter quelques gouttes d'empois d'amidon et
poursuive le titrage jusqu'à la disparition de la couleur bleu violette,
la solution devient alors transparente. Effectuer de la même façon
un essai à blanc. L'indice d'iode est donné par l'équation
2.8 :
Avec :
II : Indice d'iode
V : volume de thiosulfate de sodium utilisé pour
l'essai à blanc en ml ;
V0 : volume de thiosulfate de sodium
utilisé pour titrer l'excès d'iode en ml ;
N : normalité de thiosulfate de sodium ;
12,69 : masse d'iode correspondant à 1ml de
thiosulfate de sodium pour 100 g de l'huile essentielle ;
M : Masse de l'huile essentielle utilisé.
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