3- Dosage de l'acide urique
a- Principe
En présence d'uricase, l'acide urique est oxydé
en allantoine et peroxyde d'hydrogène. Ce dernier, sous l'action de la
peroxydase oxyde un chromogène (diclhoro-hydroxy-benzène
sulfonate et amino-antipyrine) pour former un complexe coloré.
Acide urique + 2H2O + O2 uricase > allentoine + CO2 +H2O2
TBHBA + 4-AAP + H2O2 POD > chinonimine + 2H2O HBr
4-AAP= 4amino-antipyrine, POD = peroxydase, TBHBA= acide 2,
4, 6-tribromo-3-hydroxybenzoïque.
b- Méthodologie
La procédure est la suivante (Tableau 3) :
Tableau 3 : Méthodologie de dosage de
l'acide urique
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Tubes
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Blanc
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Standard
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Echantillon
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Réactif
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1000 ìl
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1000 ìl
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1000 ìl
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Echantillon ou standard
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/
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20 ìl
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20 ìl
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Eau distillée
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20 ìl
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/
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/
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- mélanger, incuber pendant 10 min à 37° c,
- mesurer l'absorbance du standard et de l'échantillon.
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