Memoire Online - Evaluation de l'effet insecticide d'une application épicutanée de fipronil 1% sur des glossines de laboratoire (glossina palpalis gambiensis, vanderplank 1949)

3.1. Résultats du test de l'effet du fipronil 1% sur la survie des glossines

Au cours de ce test, mille huit cent (1800) glossines ont été lâchées dont mille sept cent quarante-quatre (1744) capturées (huit cent quatre-vingt-neuf (889) témoins et huit cent cinquante-cinq (855) traitées) et suivies quotidiennement au laboratoire. Ce suivi a consisté au décompte des mortalités quotidiennes dans chaque groupe de glossines (colonies).

Les colonies initiales ont été alimentées sur les bovins (témoins et traités) et suivies au laboratoire pendant quinze jours.

Les survivantes de ces colonies ont été réalimentées sur les mêmes animaux et suivies à nouveau durant quinze jours. Au bout de ce suivi global de trente jours, deux cent trente-six (236) glossines mortes ont été enregistrées au sein des témoins et cinq cent quatre-vingt (580) mortes au sein des traitées. Les données collectées ont permis de déterminer les indices de survie chaque fois qu'au moins un « mort » est enregistré. Celles relatives à l'estimateur de Kaplan-Meier de la fonction de survie sont inscrites dans le tableau 2.

Tableau 2 : Estimateur de Kaplan-Meier de la fonction survie de l'ensemble des glossines

ID = Indéterminable. Cela signifie que la médiane de survie ne pouvait pas être déterminée chez les témoins, car le taux de mortalité chez ces derniers a été inférieur à 50 % durant le suivi.

L'analyse de l'ensemble des données réalisée avec le logiciel R 3.0.3 a montré qu'il y a un effet significatif du fipronil 1% sur la survie des glossines (p ? 0,01). Sous R, les p-values des trois tests (Likelihood ratio test, Wald test et logrank test), qui sont toutes égales à zéro, sont très inférieures à 5%; ce qui montre que l'ajustement du modèle de Cox utilisé est très pertinent au seuil de 5% : ceci confirme donc l'existence d'une influence significative des variables 'traitement'' et 'jour post-traitement'' sur la survie des glossines.

En effet, pendant le suivi de trente jours (deux fois quinze jours), les glossines témoins ont vécu en moyenne 25,95 jours tandis que les traitées ont vécu en moyenne 15,15 jours d'où une réduction de 49,5% de la durée de vie des traitées.

Egalement, la mortalité des glossines traitées est élevée dès les trois premiers jours de leur alimentation avec un taux de 40% de mortalité (figure 11), puis elle tend à se stabiliser par la suite. Elle est surtout très forte au second jour de l'ingestion du sang traité.

De plus, la probabilité de mortalité pour les glossines traitées est de 0,68 et celle des témoins 0,27 (figure 13) d'où un risque relatif de mortalité des traitées estimé à 2,52. Le temps létal 50 est estimé à cinquante et un 51 jours pour des glossines s'étant alimentées deux fois sur un animal traité, c'est-à-dire que du 1^er au 51^ème jour après le traitement, le fipronil 1% a pu éliminer 50% de la population de glossines utilisée (figure 12).

Figure 11 : Courbe de survie globale sur trente jours de suivi des glossines

Figure 12 : Courbe de survie globale sur quatre-vingt-un jours de suivi des glossines

Figure 13 : Graphe des probabilités de mortalité en fonction des traitements

Par ailleurs, les analyses portées sur les colonies initiales et les colonies survivantes ont permis d'établir qu'il existe une interaction significative entre la variable 'traitement ' (traitées et témoins) et la variable 'jour post-traitement'' (p ? 0,01). Autrement dit, le temps post-traitement influence la durée moyenne de vie des glossines traitées et des glossines témoins de manière différente (pour les initiales : 13,4 jours pour les témoins et 9,12 jours pour les traitées sur quinze jours de suivi (figure 14); pour les survivantes : 14,082 jours pour les témoins et 9,779 jours pour les traitées (figure 15)). En effet, la survie des glossines traitées s'améliore avec l'avancée du temps post-traitement, tandis que celle des glossines témoins est indépendante du temps post-traitement.

Figure 14 : Evolution de la durée moyenne de vie des glossines initiales en fonction du temps post-traitement

Figure 15 : Evolution de la durée moyenne de vie des survivantes en fonction du temps post-traitement

Il y a également un effet significatif du temps post-traitement sur la survie des glossines traitées (p ? 0,01), c?est-à-dire que plus le temps post-traitement avance, meilleure est la survie des glossines traitées (figures 16, 17, 18 et 19).

Figure 16 : Courbe de survie globale sur quinze jours de suivi des glossines initiales

Figure 17 : Courbes de survie des glossines initiales (TP = temps post-traitement)

Figure 18 : Courbe de survie globale sur quinze jours de suivi des survivantes

Figure 19 : Courbes de survie des glossines survivantes (TP = temps post-traitement)

La rémanence du fipronil 1% a été suivie aussi bien au niveau des glossines initiales qu'au niveau des survivantes.

Au niveau des initiales, à partir du 7^ème jour post traitement, la significativité statistique entre les indices de survie des glossines témoins et des glossines traitées a progressivement baissé jusqu'au 51^ème jour post traitement où la différence n'était plus significative du point de vue statistique avec une p-value de 0,193 (figure 17).

Au niveau des survivantes, nous avons constaté presque la même tendance et c'est à partir du 74^ème jour post traitement que la différence entre les indices de survie des glossines témoins et des glossines traitées n'était plus significative du point de vue statistique avec une p-value de 0,005 (figure 19).

Ces deux niveaux de rémanence nous ont permis de conclure que la rémanence du fipronil 1% est située entre cinquante et un (51) et soixante-quatorze (74) jours (soit environ deux mois) quand on sait que dans la nature les glossines peuvent s'alimenter plus d'une fois sur des animaux.

Les résultats relatifs aux mortalités enregistrées lors des suivis au laboratoire sont dans les tableaux 3 et 4.

Colonie	Jour post traitement	Nombre initial de glossines		Nombre de glossines mortes		Taux de mortalité
		TE	TR	TE	TR	TE	TR
Colonie 1	7	100	92	56	92	56% (1)	100% (2)
Colonie 2	10	97	90	15	78	15,46%	86,67%
Colonie 3	16	96	95	21	70	21,88%	73,68%
Colonie 4	24	100	98	9	66	9%	67,35%
Colonie 5	45	99	91	12	41	12,12%	45,05%
Colonie 6	51	98	93	11	16	11,22%	17,20%
Colonie 7	60	99	98	8	12	8,08%	12,24%
Colonie 8	62	100	98	9	10	9%	10,20%
Colonie 9	64	100	100	6	8	6%	8%

Colonie	Jour post traitement	Nombre initial de glossines		Nombre de glossines mortes		Taux de mortalité
		TE	TR	TE	TR	TE	TR
Colonie 1	26	82	12	15	8	18,29%	66,67%
Colonie 2	31	75	25	10	20	13,33%	80%
Colonie 3	39	91	29	14	25	15,38%	86,21%
Colonie 4	61	87	50	9	46	10,34%	92%
Colonie 5	69	82	73	10	35	12,19%	47,95%
Colonie 6	74	89	82	11	24	12,36%	29,27%
Colonie 7	76	86	85	10	17	11,63%	20%
Colonie 8	81	90	90	10	12	11,11%	13,33%

(1) et (2) : les forts taux de mortalité constatés étaient liés aux mauvaises conditions climatiques de départ au laboratoire.

Pour chaque colonie initiale, il ressort que la mortalité des glossines soumises au fipronil 1% (glossines traitées) est supérieure à celle des glossines témoins (tableau 3). Ces données montrent un effet très net du fipronil 1% sur la survie des glossines. De même, la mortalité est assez constante et relativement faible au sein des témoins tandis que la mortalité est élevée et descendante chez les traitées (figure 20).

Les survivantes présentent également une mortalité constante chez les glossines témoins. Cependant, le fipronil 1% a un effet sur la survie des traitées (tableau 4). Mais cet effet s?amenuise avec le temps post-traitement. Ce qui entraine une réduction progressive de la mortalité au sein des glossines traitées, améliorant davantage leur survie (figure 21).

Figure 20 : Evolutions comparées des taux de mortalité des témoins et des traités initiaux

Figure 21 : Evolutions comparées des taux de mortalité des témoins et des traitées survivantes

Le dénombrement des mortalités en fonction des états de gorgement montre que les effectifs de mortalité au sein des glossines engorgées sont supérieurs à ceux obtenus au sein des non engorgées (tableau 5). Le test du khi-deux de Pearson réalisé montre qu'il y a une différence significative entre les effectifs des glossines engorgées et non engorgées dans chaque groupe de traitement (tableau 5), ce qui confirme que l'effet du fipronil sur les glossines est liée à leur contact avec l'animal pour la prise de sang.

		Total de morts	Engorgées mortes	Non engorgées mortes	X²	X²_á	p
Témoins	Initial	147	98	49	11,291	10,827	7,788.10^-4
Traitées		393	316	77
Témoins	Survivant	89	51	38	19,803	10,827	8,585.10^-6
Traitées		187	154	33
Témoins	Ensemble	236	149	87	29,344	10,827	6,059.10^-8
Traitées		580	470	110

3.2. Résultats du test de l'effet du fipronil 1% sur la fécondité des glossines-mères et la viabilité des glossines-filles

3.2.1. La fécondité des glossines-mères

Le test sur la fécondité des glossines a débuté au 92^ème jour post traitement, jour auquel la première colonie a été alimentée sur les animaux traités et non traités (témoins). La deuxième colonie a été alimenté au 107^ème jour post traitement et la troisième au 121^ème jour post traitement.

Les tests de Student réalisés ont montré qu'il n'y a pas de différences significatives au risque 5% entre les variances des variables testées :

- dans les deux groupes de traitement (témoin et traité) (tableau 6** et figure 22.A) ;

Tableau 6 : Résultats des tests statistiques sur les variables étudiés en rapport avec le temps post-traitement

Paramètres de fécondité	Jour post-	Traitement signification ^0,05traitement				Test de Student au seuil de
Paramètres de fécondité	Jour post-	Témoin		Traité		Groupes comparés	p-value
Taux moyen de ponte (%)	108	1ère colonie	92,472	1ère colonie	88,761	TE et TR de la 1ère colonie	0,621 *
	123	2ème colonie	92,003	2ème colonie	91,953	TE et TR de la 2^ère colonie	0,991 *
	136	3ème colonie	90,563	3ème colonie	93,744	TE et TR de la 3^ère colonie	0,588 *
		Ensemble	91,679	Ensemble	91,486	Ensemble TE et	0,948 **
Poids moyen d'une pupe (mg)	108	1ère	24,861	TRcolonie 1ère colonie	24,904	TE et TR de la 1ère colonie	0,934*
	123	2ème colonie	24,670	2ème colonie	24,672	TE et TR de la 2^ère colonie	0,998 *
	136	3ème colonie	24,343	3ème colonie	24,574	TE et TR de la 3^ère colonie	0,334 *
		Ensemble	24,625	Ensemble	24,717	Ensemble TE et	0,422 **
Taux moyen d'avortons (%)	108	colonie	00	TR1ère ₁ère colonie	00	TE et TR de la 1ère colonie	-
	123	2ème colonie	00	₂ème colonie	0,397	TE et TR de la 2^ère colonie	0,374 *
	136	3ème colonie	00	₃ème colonie	00	TE et TR de la 3^ère colonie	-
		Ensemble	00	Ensemble	0,132	Ensemble TE et	0,332 **
Taux moyen de pupes mal formées (%)	108	colonie	00	TR1ère ₁ère colonie	00	TE et TR de la 1ère colonie	-
	123	2ème colonie	00	₂ème colonie	00	TE et TR de la 2ère colonie	-
	136	3ème colonie	00	₃ème colonie	00	TE et TR de la 3ère colonie	-
		Ensemble	00	Ensemble	00	Ensemble TE et TR
Taux moyen d'éclosion (%)		138colonie 1ère	98,858	1ère colonie	98,725	TE et TR de la 1ère colonie	0,902 *
	153	2ème colonie	98	₂ème colonie	99	TE et TR de la 2^ère colonie	0,532 *
	167	3ème colonie	98,666	3ème colonie	98,389	TE et TR de la 3^ère colonie	0,840 *
		Ensemble	98,508	Ensemble	98,705	Ensemble TE et TR	0,743 **

En définitive, le fipronil 1% n'a pas d'effet sur les performances de reproduction des glossines femelles. En effet, pour toutes les variables étudiées, le test t de Student a donné des p-value supérieures au seuil de signification 0,05.

Le but de l'analyse de la variable 'taux de ponte'' était de vérifier l'effet du fipronil 1% sur les performances et la qualité de la pupaison au 108^ème, 123^ème et 136^ème jour post traitement qui correspondent respectivement aux périodes de ponte de la 1ère, 2^ème et 3^ème colonie. Ainsi, le suivi des trois périodes de pupaison des trois colonies a permis de récolter six cent soixante-neuf (669) pupes témoins et six cent soixante-sept (667) pupes traitées, soit des taux de ponte globale de 91,68 % pour les glossines témoins et 91,49 % pour les traitées. Aucune pupe mal formée n'a été constaté dans les deux groupes de traitement. Cependant, une seule pupe relevant du groupe des traitées de la deuxième colonie a avorté. Aucun écart significatif n'a été observé dans les taux de ponte des deux groupes de traitement suivis (tableau 6 et figure 22.A). Les variations des taux de ponte sont indépendantes de l'évolution des jours post-traitement (figure 23). Ce qui signifie qu'il n'y avait pas d'interaction entre le jour post-traitement et la pupaison. Par conséquent, le fipronil 1% n'a eu aucun effet sur la ponte des glossines à partir de quatre-vingt-douze jours post-traitement, date à laquelle la première colonie a été alimentée sur les animaux. Les différents tests statistiques réalisés confirment cet état de fait. En effet, le test t de Student a accepté l'hypothèse nulle d'égalité des variances des variables étudiés (taux de pontes, taux d'avortons et taux de pupes mal formées) sur les deux groupes de traitement (tableau 6).

Figure 23 : Variation des taux de ponte des groupes de traitement en fonction du temps post-traitement

Evaluation de l'effet insecticide d'une application épicutanée de fipronil 1% sur des glossines de laboratoire (glossina palpalis gambiensis, vanderplank 1949)

III. RESULTATS

3.2.1. La fécondité des glossines-mères