3.2/ Caractérisation caryologigue
3.2.1/ Etude mitotique
3.2.1.1/ Condition de la germination >
Ebenus pinnata Aiton
Dans les conditions optimum de température, qui est
comprise entre 23°C et 24°C, E.pinnata Aiton, a germé
au bout de 3 jours pour un certains nombre de graines et au bout de 7 jours
pour d'autres, ces graines correspondent au types fonctionnel
modéré (échantillon 1 de Kherrata). Ces résultats
concordent avec la température optimum de germination du type
fonctionnel permanant de la Lybie (Heghazi et al., 2008).
On a trouvé une difficulté pour la
détermination de la température optimum de germination pour les
graines du type fonctionnel éphémère (échantillon 2
celui de kherrata), car en variant la température entre 22°C
à 27°C, on n'a pas eu de germination, on pense que cela est
dû à l'intervalle de température qui ne comprenait pas la
température optimum.
Fig. 18 : Graines d'E.pinnta Aiton
après 48h de prégermination.
3.2.1.2/ Prétraitement :
Trois agents mitoclasiques (Tableau 3) on été
testés. Les conditions optimales d'obtention des plaques
métaphasiques ont été remplies grâce à la
colchicine. La 8 HydroxyQuinoleine à et le bromonaphtalène ne
semble pas être un bon agent mitoclasique pour notre matériel.
Tableau 3 : Mise au point de la technique
d'étude
Prétraitement
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Durée
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Résultat
|
Colchicine
|
1h15 pour E.pinnata
|
Trés bon étalement, et
individualisation des
chromosomes avec
condensation maximale.
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Hydroxy quinoleine
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2h pour E.pinnata
|
Séparation des chromosomes pour E.pinnata.
|
Bromonaphtalène
|
24 h pour E.pinnta
|
Pas de résultats satisfaisant
|
|
3.2.1.3/ Résultats des différents stades de
mitoses d'E.pinnta Aiton
Fig. 19 : Les cellules A, B, C, D, E, F, G,
H, K,, et L sont obtenues sans prétraitement, mais juste avec hydrolyse
pendant 15 à 20min et une coloration à l'orcéine
lactopropionique pendant 5mn, au bain marie. Les figures I et J sont obtenues
avec prétraitement c'est la raison pour la quelle ils sont bien
séparés ; l'échelle est de 10um.
3.2.1.4/ Établissement du caryotype
B
A
Fig. 20 : Les phtos A, B représentent
une plaque métaphasique mitotique d'Ebenus pinnata Aiton
à 2n=14; la flèche représente un satellite ;
l'échelle est de 10um.
3.2.1.5/ Réalisation du caryogramme d'Ebenus
pinnata Aiton :
Tableau 4 : Données numóique de
la garniture chromosomique selon Levan et al.1964.
R = bl (um)/bc (um)
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Type chromosomique
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Abreviation
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R= 0.16/0.15= 1.01
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métacentrique
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m
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R= 0.11/0.11= 1
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métacentrique
|
m
|
R= 0.13/0.13= 1
|
métacentrique
|
m
|
R= 0.15/0.14= 1.04
|
métacentrique
|
m
|
R= 0.095/0.091= 1.04
|
métacentrique
|
m
|
R= 0.073/0.071=1.03
|
métacentrique
|
m
|
R= 0.13/0.04= 3.25
|
submétacentrique
|
sm
|
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Fig. 21 : Caryogramme d'Ebenus
pinnata Aiton
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