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1) Introduction
2) Définition
3) Principe et Condition de la technique
4) Phénomène de compétition entre deux
Ag, l'un marqué et l'autre non marqué
5) Exemple d'un dosage de mélatonine extraite chez le
mouton.
6) Les inconvénients
7) Conclusion
Introduction :
La présence et la concentration d'un Ag
spécifique ou d'un Ac spécifique à un antigène dans
la solution peuvent être déterminées par les radio-immuno-
dosages (radio-immuno-assays : RIA), ou par le dosage ELISA.
L'antigène attaché à une surface solide capture
l'anticorps avec lequel il réagit, il est dosé en utilisant un
second anticorps marqué réactif au premier. Ces dosages
permettent de mesurer une grande variété d'antigènes
ainsi que la concentration et l'isotype des Ac spécifiques à un
Ag donné.
Définition
La méthode Radio-Immuno-Aissy (RIA) a
été mise au point dans les années 1950 par les
américains Solomon Aaron Berson et
Rosalyn Sussman Yalow. C'est une technique très précise
de dosage des substances biologiques telles que les enzymes, les hormones, les
stéroïdes...,dans le sang, l'urine, la salive, ou tout autre
liquide corporel dont lequel la formation du complexe antigène anticorps
est détectée grâce à la désintégration
d'un atome radioactif (iode 125). Ce dosage repose sur l'inhibition
compétitive par la substance (froide).
Principe et condition :
Principe :
La RIA classique repose sur le principe d'une liaison
compétitive ,mettons en présence une certaine quantité
d'anticorps spécifique d'un antigène donnée et cette
même antigène préalablement marqué par radio isotope
.Un complexe anticorps antigène se forme selon l'équation
suivante : Ac +Ag* [AcAg*]
La réaction Ag-Ac est due à l'interaction
entre les épitopes de l'antigène et les paratopes de l'anticorps.
Elle fait intervenir quatre type de liaison non covalentes (des liaison :
hydrogène, électrostatique, hydrophobe, et les forces de van der
waals). Les Ac constituent des sondes moléculaires spécifiques
vis-à-vis de n'importe quelle substance antigénique. La
réaction Ag-Ac a deux grands type d'applications : la
détection et le dosage des antigènes (par méthodes dont il
faut vérifier la spécificité, la reproductibilité
et la sensibilité). Et la détection et le titrage des anticorps
(vis-à-vis d'un Ag ou d'un mélange d'Ag). L'équation
dépend de l'affinité de l'anticorps pour l'antigène et la
constante K rend compte de cette affinité : K= [AcAg*] /[Ac].[
Ag]
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