2.3.2. Dosage
d'hémoglobine par l'HemoCue
Principe
Le principe de l'Hemocue repose sur le concept de
photométrie, qui consiste à mesurer l'absorbance de la
lumière par une substance. Dans le cas de l'Hemocue, il utilise une
méthode de photométrie de transmission. L'appareil comporte une
petite cuvette jetable qui contient l'échantillon de sang à
analyser.
Mode opératoire
- Préparation de l'appareil : allumez l'Hemocue et
vérifiez que l'écran d'affichage fonctionne correctement.
Assurez-vous que l'appareil est calibré et que les piles sont
suffisamment chargées.
- Préparation de l'échantillon de sang :
obtenez un échantillon de sang capillaire en utilisant une lancette
stérile pour percer la peau du doigt ou une autre partie du corps.
Essuyez la première goutte de sang avec un coton stérile.
Remplissez ensuite la cuvette de l'Hemocue avec suffisamment de sang pour
qu'elle soit remplie.
- Insertion de la cuvette : Insérez
délicatement la cuvette remplie de sang dans la fente prévue
à cet effet de l'appareil. Assurez-vous que la cuvette est correctement
positionnée et qu'elle est bien en contact avec les parties internes de
l'appareil.
- Lecture des résultats : l'Hemocue effectue
automatiquement la mesure de l'absorbance de la lumière par
l'échantillon de sang. Il convertit ensuite ces mesures en une valeur
d'hémoglobine, qui est affichée sur l'écran de l'appareil.
Notez la valeur affichée, qui est exprimée en grammes par
décilitre (g/dl) ou en millimoles par litre (mmol/l) selon les
unités utilisées par l'appareil.
- Élimination de la cuvette : Retirez
soigneusement la cuvette utilisée de l'Hemocue et jetez-la selon les
protocoles de sécurité et d'élimination des déchets
biomédicaux.
2.3.3.
Numération de globules rouges
Principe
Le sang est dilué dans un liquide approprié. On
compte les hématies au microscope, dans une cellule
hématimètre, et on calcule le nombre par millimètre
cube.
Matériel et réactif
- Flacon
- Micropipette de précision
- Cellule de Neubauer
- Pipette pasteur
- Solution de formol citraté, solution de Hayen ou eau
physiologique
Mode opératoire
- À l'aide d'une micropipette, aspirer 20 micro litres
du sang dans un flacon contenant 3980 micro litres d'eau physiologique
- La dilution est de 1/200 c'est-à-dire le volume du
soluté est de 20 ìl et celui du solvant est de 3980.
- Attendre cinq minutes au moins ;
- Fixer avec soin la lamelle à la cellule en
exerçant une pression suffisante ;
- Bien mélanger le sang dilué. À la
pipette Pasteur remplir une chambre de la cellule, en prenant garde de ne pas
dépasser la partie lignée.
- Laisser reposer trois minutes pour permettre aux globules de
se déposer ;
- Mettre la cellule sur la platine du microscope. Utiliser
l'objectif 10X (oculaire 6X ou 10X) ;
- Les hématies sont comptées dans une zone de
0.2mm3, en utilisant les carrés A, B, C, D et E (du grand carré
central).
- Le nombre d'hématies comptés dans les cinq
petits carrés du grand carré central est multiplié par
10 000.
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