Memoire Online - Etude morphologique des globules rouges chez les sujets anémiques en zone de santé de Beni

« ETUDE DE FORMES DES GLOBULES ROUGES CHEZ LES SUJETS ANÉMIQUES EN ZONE DE SANTE DE BENI »

Travail de fin d'étude présenté et défendu en vue de l'obtention du diplôme de grade de gradué en techniques médicales.

EPIGRAPHE

`'Quand quelqu'un désire la santé, il faut d'abord lui demander s'il est prêt à supprimer les causes de sa maladie. Alors seulement est-il possible de l'aider''

DÉDICACE

REMERCIEMENTS

En tout premier lieu, nous remercions le bon Dieu, tout puissant, de nous avoir donné la force de survivre, ainsi que l'audace de dépasser toutes les difficultés.

A la fin de notre parcours premier cycle, nous devons exprimer notre profonde gratitude à tous ceux qui ont pris en main notre formation de l'école maternelle jusqu'en dernière année de graduat en Techniques de laboratoire.

Nos sincères remerciements s'adressentaux autorités académiques, administratives et techniques de l'ISTM-Beni, pour le courage de nous avoir formés pour le service de la nation.

Nous pensons particulièrement au Chef de Travaux Henri KAKULE MAKOMBANI et Assistant Maxime KATHEMBO TSWALE qui ont accepté de diriger et encadrer ce travail de fin d'étude malgré leurs multiples occupations, leurs conseils et directives ont été d'un grand prix.

Nos remerciements s'adressent également à nos familiers plus particulièrement à notre frère NDUNGO KYAMUVYAMOet à notre Tente Béatrice KAVIRA qui nous ont apporté leurs contributions morales et matérielles sans lesquelles il nous serait impossible de finaliser ce travail. Nous pensons également à nos frères et soeurs : Bienvenue MUPARATSA, Merveille MUPARATSA, Christophe MUPARATSA, Fidèle MUPARATSA, Pacifique MUPARATSA, Blaise MUPARATSA, Providence MUPARATSA.

Nous remercions tous nos amis et proches, leur affection a été pour nous un grand réconfort moral. Il s'agit de Sagesse KITULIZO, Milka KAGHOMA, Sémerithe MUTHUHA, ...

Nous ne pouvons pas oublier nos compagnons de lutte : Asifiwe ISOMA, Victoire SIRIWAYO, Honorine NYANYA, Aimée KITABU, Esther SINDANI, Jospin SADIKI, Charmante FEZA, Chimène MUSEMA et les autres avec lesquels nous avons partagé le durmoment.

SIGLES ET SIGNES

RÉSUMÉ

Notre travail portant sur « Étude de formes des globules rouges chez les sujets anémiques » est une étude descriptive menée en zone de santé de Beni dans une période allant d'avril à août 2023. Après les analyses de nos échantillons (effectuées dans le laboratoire du Centre de Santé Madrandele) nous avons abouti aux résultats repartis comme suit :

· 40,4% de cellules cibles dont 73,7% des cas sont manifestes dans les anémies microcytaire, 21,1% dans les anémies normocytaires et 5,2% dans les anémies macrocytaires),

· 23,4% des echinocytes dont 72,7% se retrouvent dans les anémies microcytaires, 18,2% dans les anémies normocytaires et 9,1% dans les anémies macrocytaires ;

· 21,3% cas des annulocytes dont 50% sont concentrés dans les anémies microcytaires, 10% dans les anémies normocytaires et 40% dans les anémies macrocytaires ;

· 6,4% d'ovalocytes, dont 66,7% se retrouvent dans les anémies microcytaires et 33,3% dans les anémies normocytaires ;

· 6,4% des dacryocytes sont tous constatés seulement dans les anémies microcytaires et

· 2,1% des poikilocytes ont été retrouvé seulement chez les anémies microcytaires.

En conclusion d'une part, les anémies microcytaires et normocytaires sont les plus fréquentes que l'anémie macrocytaire et, d'autre part, les anomalies morphologiques de globules rouges les plus retrouvées au cours des anémies sont les cellules cibles, les echinocytes et les annulocytes.

0 ABSTRACT

Our work on «Study of shapes of red blood cells in anemic subjects» is a descriptive study carried out in the Beni health zone in a period ranging from April to August 2023. After the analyzes of our samples (carried out in the laboratory of Madrandele Health Center) we arrived at the results as follows:

- 40.4% of target cells of which 73.7% of cases are evident in microcytic anemias, 21.1% in normocytic anemias and 5.2% in macrocytic anemias),

- 23.4% of echinocytes, 72.7% of which are found in microcytic anemias, 18.2% in normocytic anemias and 9.1% in macrocytic anemias;

- 21.3% cases of annulocytes, 50% of which are concentrated in microcytic anemias, 10% in normocytic anemias and 40% in macrocytic anemias;

- 6.4% ovalocytes, of which 66.7% are found in microcytic anemias and 33.3% in normocytic anemias;

In conclusion, on the one hand, microcytic and normocytic anemias are more frequent than macrocytic anemia and, on the other hand, the morphological abnormalities of red blood cells most found during anemias are the target cells, echinocytes and annulocytes.

1 INTRODUCTION

1.1 PROBLÉMATIQUE

D'après la FAO (2013), l'anémie constitue la forme de carence en micronutriments la plus répandue dans le monde. L'anémie affecte la croissance physique, le développement cognitif, la reproduction et la capacité de travail physique, ce qui aboutit à une diminution de la performance humaine.

L'anémie entraîne un état de faiblesse générale et porte atteinte au développement moteur et mental chez les plus jeunes. (Suchdev PS et al, 2011)

SelonMcLean E.et al., (2009), l'anémie touchait plus de 47% des enfants de moins de 5 ans au niveau mondial. Ce taux est d'environ 40% en Amérique du Sud, 17% en Europe et atteint 64,6% sur le continent africain, ce qui représente plus de 90 millions d'enfants.

Aussi bien que le déclarent STEVENS G A.etal. (2013), les déficiences en fer sont l'une des principales causes de 9 millions de morts dans le monde soit un décès toutes les deux secondes environ. Les régions du monde les plus touchées par l'anémie sont l'Asie du Sud-Est et l'Afrique. Les femmes enceintes et les enfants d'âge préscolaire sont les plus vulnérables respectivement 43 % des enfants de moins de 5 ans dans le monde, et 67 % des enfants de moins de 5 ans en Afrique subsaharienne, souffraient d'anémie.

Comme l'expliquentBerger et al. (2019), l'Afrique et l'Inde affichent les plus haut taux d'anémie avec, plus de 50% des femmes atteintes, dont 40% des cas de mort maternelle sont dû à l'anémie. Au Bénin, la fréquence de l'anémie avoisine 80 % en milieu périurbain et en l'absence d'une prise en charge rapide durant la grossesse, elle entraîne des conséquences graves pour la santé de la mère et de l'enfant.

L'anémie est un problème de santé majeur au Cameroun. Selon l'enquête démographique et de santé (2018) au Cameroun, la prévalence de l'anémie chez les enfants de 6 à 59 mois varie de manière irrégulière selon l'âge, d'un maximum de 77 % dans le groupe d'âges de 9 à 11 mois à un minimum de 47 % chez les enfants de 48 à 59 mois. ( https://dhsprogram.com/pubs/pdf/FR360/FR360.pdf)

En République Démocratique du Congo (RDC), la forte prévalence de l'anémie constitue une autre explication. En effet, l'enquête Démographique et Sanitaire (EDS) réalisée en 2007 avait montré une prévalence de l'anémie respectivement de 53% et 20% chez les femmes et les hommes âgés de 15-49 ans. Le taux d'anémies chez les femmes de 15 à 49 ans était de 35,4% en 2009 et 29,6% en 2010 ; la prévalence de l'anémie chez les femmes enceintes était 17,6% au Sud-Kivu en 2013, 65% dans la ville de KISANGANI ; 53% au bas CONGO.

En 2019, une étude menée au Nord-Kivu a révélé que la prévalence de l'anémie était de 62,1% chez les femmes en âge de procréer et de 62,3% chez les enfants de moins de 5 ans. Ceci représente un taux élevé d'anémie dans cette région de la République démocratique du Congo. Les principales causes de l'anémie dans la région sont la malnutrition, les infections, les maladies parasitaires et le manque d'accès à des soins de santé de qualité. (Bisimwa G. et al., 2019)

En Zone Santé de Beni, le taux d'anémie chez les enfants était de 3% en 2020, 5% chez les femmes enceintes. Et au moins cinquante-deux (52) cas de décès des déplacés de guerre ont été notifiés entre septembre et novembre dernier. Ces décès résultent principalement des problèmes d'anémie et de malnutrition.(Didy V., 2022).

Pour éclairer les cliniciens sur le type ou la forme des anémies, une étude sur les sujets anémiques en Zone de Santé de Beni serait importante.

Partant de ce qui précède, nous nous sommes posé certaines questions, à savoir :

· Quelles seraient les morphologies de globules rouges des personnes anémiques en zone de Santé de Beni ?

· Partant de la typologie d'anémie, lequel est le plus retrouvé chez les personnes anémiques ?

1.2 HYPOTHÈSE

À la lecture des certains écrits, les cellules cibles (targetcell),echynocytes et les annulocytes seraient les morphologies des globules rouges les plus fréquentes dans les anémie ; et les anémies microcytaires seraient les plusfréquentes que les anémies normocytaires et macrocytaires.

1.3 OBJECTIFS

L'objectif général de notre travail est l'étude des différentes formes de globules rouges chez les personnes souffrant de l'anémie.

- Mettre en évidence les formes et types d'anémies sévissant dans la Zone de santé de Beni ;

- Mettre en exergue la variante d'anémies qui décide dans la Zone de santé de Beni.

1.4 CHOIX ET INTÉRÊT DU SUJET

Le taux élevé d'anémie en ville de Beni nous a beaucoup plus motivé à étudier les formes de globules rouges chez les malades anémiques. Ceci permettre, de prime abord, à approfondir nos connaissances sur les formes de globules rouges en cas d'anémie. Ainsi, par conséquent, le diagnostic fiable et différentiel pourrait bien orienter les cliniciens dans la prise en charge de cette pathologie avec précision.

Ce travail, par la suite,pourra servir de référence pour les autres chercheurs qui voudront approfondir leurs recherches sur les anémies.

1.5 MÉTHODOLOGIE

Ce travail porte sur l'Étude desformes des globules rouges chez lessujets anémiques en Zone de Santé de Beni. Il a été réaliséen une période de 4 mois, soit d'avril àaoût 2023.

- Identification des malades anémiques dans différentes structures sanitaires de la Zone de Santé de Beni ;

- Prélever des échantillons de sang pour des examens hématologiques : analyse des formes de globules rouges

1.6 SUBDIVISION DU TRAVAIL

Hormis l'introduction et la conclusion, notre travail comprend trois chapitres dont :

- Le troisième chapitre traitera sur la présentation, interprétation et discutions des résultats.

2 CHAPITRE1ER :

REVUE DE LITTÉRATURE

1.1. NOTIONS SUR LES GLOBULES ROUGES

1.1.1. Définition

Selon LAROUSSE, les hématies, encore appelées érythrocytes ou globules rouges, sont des éléments figurés du sang dont la fonction essentielle est le transport de l'oxygène, à partir des poumons jusqu'aux différents tissus de l'organisme.Ce sont des cellules particulières, dépourvues de noyau. Ils sont produites dans la moelle osseuse par les cellules souches hématopoïétiques. Ils ont une forme de « disque biconcave » et une couleur rouge due à la grande quantité d'hémoglobine qu'elles renferment.

1.1.2. Fonctions des Globules Rouges

Les hématies jouent un rôle fondamental dans la respiration en assurant le transport des gaz respiratoires (oxygène et dioxyde de carbone) entre les poumons et les tissus, grâce à l'hémoglobine qu'elles renferment. L'hémoglobine, qui a une très forte affinité pour l'oxygène, permet le transport d'une quantité d'oxygène 100 fois supérieure à celle acheminée par le plasma seul.

1.1.3. Cycle de vie des globules rouges

Les hématies sont produites par les cellules souches de la moelle osseuse. Celles-ci se divisent et se différencient jusqu'à donner des érythroblastes. Ces derniers expulsent leur noyau pour devenir des réticulocytes (globules rouges jeunes) qui conservent pendant 48 heures environ des restes filamenteux.

Robbs J. (2007) confirme que la moelle osseuse produit, quotidiennement, 200 -250 milliards d'hématies etque la durée de vie des hématies humaines est en moyenne de 120 jours. Au cours du vieillissement érythrocytaire, certaines enzymes perdent progressivement leur activité et, par conséquent, les processus métaboliques, qui en dépendent, diminuent. Les hématies sont donc régulièrement renouvelées. Au terme de leur vie, les hématies sont détruites dans la moelle osseuse et dans le foie, ainsi que, dans une moindre mesure, dans la rate. Cette destruction, appelée hémolyse, est effectuée par des macrophages. Les différents éléments constitutifs des hématies sont réutilisés par les cellules. Seule l'hémoglobine, riche en fer, suit un cycle particulier ; sa structure centrale, l'hème, est transformée sous l'action d'enzymes et libérée dans le plasma sous forme de bilirubine (pigment jaune-brun). Celle-ci passe ensuite dans la bile et est éliminée dans les fèces. Le fer est, lui, remis en circulation pour être réutilisé dans l'érythropoïèse.

1.1.4. Morphologie des hématies

La forme (morphologie) des globules rouges peut aussi faire l'objet d'une analyse. Dans ce cas, on effectue une observation au microscope à partir d'un frottis sanguin. Plusieurs maladies du sang se traduisent en effet par une forme anormale des globules rouges : par exemple, en forme de faucille (drépanocytose), de poire ou de gouttelette (splénomégalie, etc.), en « cible » (hémoglobinose, thalassémies, etc.), en sphère (sphérocytose), en demi-lune, etc. Des anomalies de taille et de couleur peuvent aussi être décelées.

Une hématie normale est une cellule anucléée ayant la forme d'un disque biconcave. Sa taille est d'environ 8 um de diamètre et 2,5 um d'épaisseur. Il existe une zone centrale plus claire, l'hémoglobine se répartissant de façon majoritaire en périphérie de la cellule. (Belédent F., 2002)

BalédentF.met aussi en évidence les anomalies morphologiques des globules rouges en précisant qu'il y a des anomalies de taille, de coloration, de forme et d'inclusions intra-érythrocytaires.

Comme l'explique Fatima Zahara R., (2018), chaque globule rouge possède un volume déterminant aussi sa taille. Ce volume varie de 80 à 100 fl (femto-litre ₌ 10^-15 litre ₌ 1 um³) chez un adulte ; tandis que chez le nouveau-né, il est de 106 um³;à partir de six mois et jusqu'à l'âge de dix ans, les valeurs tournent autour de 77 à 80 um³.Ce volume diminue dans les anémies chroniques par saignement ou par manque de fer et augmente dans les anémies par carence en vitamine, par mauvaise absorption alimentaire du tube digestif. Il augmente aussi dans la consommation chronique de tabac ou d'alcool. Autrement dit, la valeur du volume (notamment appelé volume globulaire moyen, VGM en sigle) permet souvent de poser le diagnostic étiologique de l' anémie ; et de déterminer la catégorie de l'anémie.

- Pour le VGM > 100 fl, les globules rouges sont de grande taille : une augmentation du volume globulaire moyen déterminant une macrocytose ;

- Pour le VGM < 80 fl, les érythrocytes sont de petite taille : une diminution du volume globulaire moyen déterminant une microcytose ;

- Pour le VGM compris entre 80 à 100 fl, la taille des hématies est normale : caractère normocytaire (isocytose).

Il convient de noter quel'anisocytose est définie par une grande diversité de taille des hématies sur un même frottis.

BalédentF. (2002), renchérit que les anomalies de coloration sont de 3 variantes, à savoir :

- L'hypochromie : est une diminution de coloration des hématies, souvent associée à une microcytose au cours de anémies ferriprives, ou à une macrocytose au cours des dysérythropoïèses.

- L'anisochromie :est une variabilité marquée dans la densité de couleur des érythrocytes (globules rouges) sur un même frottis, ce qui indique une teneur en hémoglobine inégale chez les globules rouges.

- La polychromatophilie : correspond à des hématies de grande taille et de couleur gris bleu au MGG contenant des résidus d'ARN avec une hémoglobinisation incomplète. Ce sont les jeunes réticulocytes (macrocytaires, hypochromes), retrouvés au cours de toutes les anémies régénératives.

Encore appelé cellule crénelée, il s'agit d'une hématie en forme de disque ou de sphère possédant à leur surface de petites projections fines régulières. La déformation échinocytaire est souvent artéfactuelle (trop longue conservation du sang, pH élevé, baisse d'ATP). Les échinocytes sont décelés dans diverses pathologies acquises : insuffisance rénale, brûlures étendues, gastroentérite sévère, azotémie, après splénectomie...

Est due à l'accumulation d'une lipoprotéine mutée, entrainant un excès de cholestérol dans la membrane des hématies. Celles-ci vont alors être détectées lors de leur passage dans la rate et vont être détruites, ce qui provoque une anémie. L'hématie présente des spicules irréguliers en nombre variable (3 à 12), de taille et de répartition inégales, souvent terminés par une extrémité arrondie.

On observe les acanthocytes essentiellement au cours de cirrhoses éthyliques sévères, mais également en cas d'abéta-lipoprotéinémie, après splénectomie, au cours de malabsorptions.

Correspond à un fragment d'hématie irrégulier, de taille et de forme variables. L'hématie prend parfois la forme d'un casque.Ils résultent de la fragmentation accidentelle des hématies soit lors de leur passage à travers des microthrombine (anémies hémolytiques microangiopathiques), soit contre un obstacle (pathologie valvulaire, cancer métastasé). Des formes en casque (keratocytes), en triangle, avec deux angles et un segment courbe et leurs formes de transition peuvent coexister, des microsphérocytes s'y associent.

Il s'agit d'un disque uniconcave, en forme de coupe à l'état frais. Sur frottis, la zone claire centrale de l'hématie prend la forme d'une fente ou d'un ovale. On l'observe au cours d'anomalies congénitales de la membrane des hématies : stomatocytose, mais également en cas d'alcoolisme, au cours des cirrhoses ou des obstructions des voies biliaires.

Au cours de la stomatocytose héréditaire avec hématies déshydratées ou xérocytose, le frottis sanguin met en évidence des hématies cibles, des acanthocytes et de rares stomatocytes. Pour la stomatocytose héréditaire avec hématies hyperhydratées, où le VGM est augmenté et la CCMH diminuée, le nombre des stomatocytes est variable d'un sujet à l'autre.

L'hématie est, dans ce cas, allongée, ovale ou ellipsoïde. Les elliptocytessont parfois très allongés, mais les extrémités sont toujours arrondies, sans spicules ; ce qui les différencie des drépanocytes.L'ellipsocytoserésulte de la mutation d'une des protéines de la membrane des globules rouges.

L'hématie prend une forme allongée, classiquement en forme de faucille ou de croissant, avec deux spicules bipolaires : extrémités pointues, plus ou moins effilées. Cet aspect est spécifique dans la quasi-totalité des cas d'une hémoglobinopathie : la drépanocytose.

Les sphérocytes sont des globules rouges sphériques sans zone de pâleur centrale et sont habituellement de taille légèrement inférieure à celle des globules rouges moyens. Sur frottis, elles apparaissent comme microcytaires alors que le volume globulaire moyen (VGM) est normal. Leur coloration est foncée et homogène, avec disparition du centre clair. On les observe au cours de la maladie de Minkowski Chauffard ou sphérocytose héréditaire (anomalies congénitale de la membrane des hématies), mais également au cours d'autres anémies hémolytiques : elles sont, dans ce cas, moins nombreuses.

La présence de sphérocytes abondantes dans le frottis sanguin périphérique suggère une sphérocytose héréditaire ou une anémie hémolytique auto-immune. Le test direct à l'antiglobuline (le test de Coombs) les distingue mieux : le résultat est positif dans l'anémie hémolytique auto-immune et négatif dans la sphérocytose héréditaire.

L'aspect sur frottis est celui d'une cible ou d'une cocarde, l'hémoglobine étant répartie en périphérie et au centre de la cellule. Les cellules cibles s'observent surtout au cours de certaines hémoglobinopathies (hémoglobinose C, thalassémie), parfois au cours des carences martiales.

Les hématies ont la forme d'une poire avec une extrémité arrondie alors que l'autre est allongée, plus ou moins effilée.Cet aspect est évocateur de fibrose médullaire et est rencontré au cours de la splénomégalie myéloïde, des dys-érythropoïèses acquises, et de pathologies tumorales s'accompagnant de fibrose médullaire.

Les globules rouges sont peu chargés en hémoglobine (hypochromie). Ce sont des globules rouges amincis dont l'hémoglobine n'est présente que vers la périphérie (en forme d'anneau). Les annulocytes sont caractéristiques des anémies hypochromes graves. Ce sont des hématies dont le centre clair est anormalement important. Cet aspect correspond à une hypochromie, le plus souvent observée au cours des grandes anémies ferriprives.

Les poïkilocytes sont des globules rouges présentant une forme irrégulière, différente de leur forme normale, généralement biconcave et discoïdale. Ces cellules modifiées peuvent affecter la capacité du sang à transporter l'oxygène et entraîner divers problèmes de santé.

La poïkilocytose peut être causée par différentes maladies et troubles sanguins, notamment l'anémie, les hémoglobinopathies, les carences nutritionnelles ou les pathologies hépatiques. Le diagnostic se fait généralement par un examen microscopique d'un échantillon de sang.

Les hématies présentent dans ce cas des formes variées avec association de nombreux aspects morphologiques différents.

Les globules rouges peuvent parfois s'accoler les uns aux autres, réalisant ainsi une image de rouleaux ou de piles d'assiettes. Cet aspect est observé au cours des gammapathies monoclonales ou après perfusion de macromolécules.

Il s'agit de granulations gris-bleutées, de petite taille, dispersées à l'intérieur de la cellule. Les hématies ponctuées peuvent être observées au cours des anémies hémolytiques ; mais le plus souvent, elles témoignent d'une dys-érythropoïèse : hémoglobinopathie, anémie mégaloblastique, anémie sidéroblastique ou intoxication par le plomb (saturnisme).

Les corps de Howell-Jolly sont des corpuscules sphériques (0,5 à 1 um de diamètre) de même teinte que le noyau (rouge foncé au MGG) en général unique dans la cellule. Il s'agit de restes de chromatine nucléaire provenant de chromosomes aberrants. Ils sont normalement éliminés par la rate et sont donc décelés essentiellement après splénectomie, asplénie fonctionnelle ou congénitale. La présence de corps de Jolly est physiologique chez le nouveau-né et témoigne de l'immaturité splénique. Par contre, ils sont présents au cours des dys-érythropoïèses et parfois au cours des anémies hémolytiques.

Ce sont des filaments, circulaires ou en forme de 8, de taille variable, s'observant dans les mêmes situations que les corps de Howell-Jolly.

Les anneaux de Cabot correspondent à des restes de microtubules formant le fuseau mitotique. Ils se présentent au sein de l'hématie comme des figures en anneaux, en huit, rouges violacés au MGG. Leur présence est liée à une anomalie mitotique et se retrouve au cours d'anémies sévères d'origine diverse et de dysérythropoïèses, principalement celles accompagnant les splénomégalies myéloïdes.

Ces granulations, fines, rosées ou rouges, irrégulières, peuvent se voir après une hémolyse, mais correspondent le plus souvent à un artéfact.

Les anneaux de Cabot, les corps de Howell-Jolly et les ponctuations basophiles peuvent être observés simultanément chez un même patient, parfois dans une même cellule.

1.2. GÉNÉRALITÉS SUR L'ANÉMIE

Braunstein E.M. (2022), définie l'anémie comme une diminution du nombre de globules rouges ou le contenu en hémoglobine des globules rouges. Biologiquement, l'anémie se définie (i) chez l'homme par un taux d'hémoglobine < 14 g/dl, d'hématocrite < 42% et des globules rouges < 4,5 millions/ul ; (ii) chez la femme, par un taux d'hémoglobine < 12 g/dl, d'hématocrite < 37% et de GR < 4 millions/ul. (iii) Chez les nourrissons et les enfants, les valeurs normales varient avec l'âge, ce qui nécessite l'utilisation de tables liées à l'âge.

Selon Bernard et Geneviève Pierre (2002), l'anémie est la diminution de la quantité de l'hémoglobine (pigment ou colorant des globules rouges) contenue dans le sang. Cette diminution de l'hémoglobine est toujours accompagnée de celle du nombre des globules. Ce qui revient au même avec la base linguistique stipulant que l'anémie (du privatif "an-" et du grec ancien "haimos", « sang ») est une anomalie de l' hémogramme caractérisée par une diminution de la concentration en hémoglobine intra-érythrocytaire (et quelques fois par le manque d' érythrocytes ou globules rouges). En termes simples, l'anémie est la diminution du taux de l'hémoglobine circulante, renfermée dans les globules rouges (généralement < 12g/dl chez l'adulte).

1.2.1. Causes et mécanismes de survenue d'une anémie

Il existe deux grandes sortes d'anémies : les anémies par défaut de production des globules rouges et les anémies par perte anormale des globules rouges.

C'est lorsque la moelle osseuse ne parvient plus à renouveler (ou à produire) les globules rouges, voire les autres cellules sanguines. Autrement dit, ce sont des anémies dues à une insuffisance de production de globules rouges et de l'hémoglobine par la moelle osseuse.

La moelle osseuse fabrique normalement les globules rouges, mais l'anémie est due soit à une perte de sang, soit à une destruction des globules rouges en circulation.

· Perte des globules rouges par saignement : une perte importante ou faible, mais prolongée, de globules rouges, par saignement (ou hémorragie) est responsable d'une anémie.

· Destruction anormale des globules rouges ou hémolyse. En réaction, la moelle osseuse hématopoïétique produit une quantité plus grande de globules rouges pour tenter de compenser cette destruction. On parle dans ce cas d'anémie hémolytique, forme plus rare d'anémie.

1.2.2. Types d'anémie

Dans ses écrits d'hématologie clinique,Makombani H. (2023) explique qu'après confirmation d'une anémie (hématies ? 3500/mm3, hémoglobine ? 12 g/dl et hématocrite ? 37%), seul le calcul du volume globulaire moyen (VGM) oriente vers les types d'anémie incriminée :

Faure E. et Labrèze L. (2001) complètent en disant qu'on peut isoler trois grandes classes d'anémie :

- Les anémies normocytaires, normochromes régénératives et non régénératives.

Ces sont les anémies dues (i)à la carence du fer, (ii) aux maladies inflammatoires et (iii) aux Hémoglobinopathies. Elles se traduisent par un volume globulaire moyen et une teneur corpusculaire moyenne en hémoglobine abaissés.

· L'anémie ferriprive (ou anémie par carence martiale) est due à une carence de réserve du fer dans l'organisme. Le fer étant un élément central, il intervient dans la synthèse de l'hémoglobine.Ainsi donc, les globules rouges fabriqués pendant le manque en fer seront hypochromes et de petite taille.

· L'anémie inflammatoire : appelée aussi anémie des maladies chroniques,l'anémie inflammatoire est la conséquence d'une carence martiale associée à un syndrome inflammatoire chronique : le syndrome inflammatoire provoque une augmentation de l'activité de l' hepcidine par le biais de l'élévation de l'interleukine-6. L'anémie inflammatoire n'est donc pas une vraie anémie ferriprive, car le fer est présent ; mais pas disponible, c'est une anémie fonctionnelle. Car le fer est en réserve en quantité suffisante ; mais il n'est pas libéré pour être utilisé dans la biosynthèse de l'hémoglobine (Makombani, 2023).

· L'anémie hémoglobinique ou thalassémique : ce sont les anémies dues à un défaut de synthèse de l'hémoglobine, souvent une thalassémie. Avec une délétion des chaînes peptides, la quantité de l'hémoglobine synthétisée est trop petite dans les globules rouges d'où les petites tailles de globules rouges.

Ce sont des anémies dont les globules rouges sont de grande taille ou de grand volume (VGM supérieur à 100fL).La macrocytose des globules rouges est due à une mauvaise transformation des acides nucléiques dans les globules rouges : un défaut de division cellulaire des précurseurs érythroblastiques.

Elle est due à une carence de vitamine B9(folate) ou de vitamine B₁₂ (les chobalamines). Elle est aussi appelé anémie mégaloblastique à cause de la déficience de la division cellulaire chez les érythroblastes due à l'avitaminose B9. Ce qui conduit à la formation des mégaloblastes (processus de division non subit ou bloqué). En effet, la vitamine B12 est précurseur de la vitamine B9 qui intervient dans la conversion de l'ARN à ADN dans les érythroblastes.

Une macrocytose non-mégaloblastique est suspectée chez les patients présentant une anémie macrocytaire lorsque les examens excluent un déficit en vitamine B₁₂ ou en folate.

Les macro-ovalocytes (de gros globules rouges ovales) observés sur un frottis et la courbe de distribution des volumes des globules rouges élargie typique de l'anémie mégaloblastique classique peuvent être absents. Dans la macrocytose non-mégaloblastique, la moelle n'est pas mégaloblastique, mais dans les maladies du foie avancées et dans les myélodysplasies des précurseurs mégaloblastoïdes des globules rouges sont présents avec une chromatine nucléaire dense qui diffère du type fibrillaire fin habituellement observé dans les anémies mégaloblastiques. Ce sont des anémies qui sont dues à une autre cause que l'avitaminose B₁₂ et B₉. Par exemple, un cas d'alcoolisme chronique inhibe le processus érythropoiëtiqueen provoquant l'augmentation de la membrane cellulaire conduisant à la formation des codocytes.

Ce sont des anémies dont le volume de globules est normal (VGM=80 - 100fL).Ces cas sont manifestes dans les hémorragies et les hémolyses(perte ou destruction de globules rouges).Seule l'ictère différencie l'hémolyse de l'hémorragie : elle est manifeste dans l'hémolyse et non dans l'hémorragie.

Biologiquement, le dosage de l'haptoglobine et de la bilirubine marque la différence entre les hémorragies internes et les hémolyses. Quand il y a hémolyse, l'haptoglobine se fixe à l'hémoglobine pour transporter celle-ci au site de dégradation. Ceci révélé que l'hyper hémolyse entraînera une forte consommation d'haptoglobine(diminution de son taux sanguin). Par ailleurs, la forte concentration de l'hème conduira à la forte concentration de la bilirubine dans le sang. En somme le taux sanguin d'haptoglobine et de la bilirubine sont respectivement abaissé et élevé lors des hémolyses alors de ces taux sont normaux dans les hémorragies.

3 CHAPITRE2ÈME :

APPROCHE MÉTHODOLOGIQUE

2.1. DESCRIPTION DU TERRAIN D'ÉTUDE

2.1.1. Description de la Zone de santé de Beni

L'histoire de la zone de santé de Beni au Nord-Kivu remonte à la période coloniale belge, lorsque la région était administrée par l'État indépendant du Congo. À l'époque, la mission catholique avait établi une station sur le site de l'actuelle ville de Beni, qui servait de base pour l'évangélisation et les soins de santé.

Après l'indépendance du Congo en 1960, la zone de santé de Beni a été créée pour desservir la population de la région. Cependant, le système de santé a été gravement affecté par les conflits armés et l'instabilité politique qui ont marqué l'histoire du Congo depuis cette période.

Dans les années 1990, la région de Beni a été touchée par une vague de violences interethniques et de massacres perpétrés par des groupes armés. Cette situation a rendu les soins de santé encore plus difficiles à dispenser, car les travailleurs médicaux étaient souvent pris pour cibles et les infrastructures de santé étaient souvent détruites.

Plus récemment, la zone de santé de Beni a été le théâtre d'une épidémie de virus Ebola en 2018-2019, qui a fait plus de 2000 morts. Les autorités de santé ont travaillé d'arrache-pied pour contenir la propagation de la maladie, mais ont souvent été confrontées à des obstacles logistiques et sécuritaires. (Levin J. et al.,2020)

2.2. POPULATION D'ÉTUDE ET ÉCHANTILLONNAGE

En référence des notes de cours de statistique, KABUNGA P., (2021), définit la population étant la totalité d'observations individuelles appartenant à une aire définitivement spécifiée, limitée dans le temps et dans l'espace et pour lesquelles on voudrait tirer des conclusions. Tandis qu'un échantillon est l'ensemble d'un certain nombre d'observations individuelles sélectionné dans une population. Par contre, l'échantillonnage est l'opération qui consiste à prélever un certain nombre d'éléments de l'échantillon dans l'ensemble d'éléments qu'on veut observer (population).

Pour notre étude, la population prise en compte est celle des sujets anémiques ayant été consultés pour contrôle et ceux hospitalisés dans les institutions sanitaires de la Zone de Santé de Beni ; notre échantillon est de 47 sujets anémiques prélevés dans les sites ci-après :

2.3. MÉTHODE ET TECHNIQUES D'ANALYSE

Selon GRAWITZ M. (1984), la méthode est constituée de l'ensemble des opérations intellectuelles par lesquelles une discipline cherche à atteindre les vérités qu'elle poursuit, les démontre et les vérifie. Par contre, la technique c'est un moyen d'atteindre un but, mais qui se situe au niveau des faits ou des étapes pratiques.

Selon KIRERE (2018), dans les notes de cours d'IRS, il clarifie en disant que la méthode consiste à un procédé, une voie, une façon, un moyen par lequel le chercheur passe pour aboutir au résultat de recherche. Tandis que les techniques sont des moyens précis pour atteindre un résultat partiel, à un niveau et à un moment donné de la recherche.

Par ailleurs, pour approfondir, GRAWITZ M. renchérit que la méthode est constituée de l'ensemble des opérations intellectuelles par lesquelles une discipline cherche à atteindre les vérités qu'elle poursuit, les démontre et les vérifie. Par contre, la technique c'est un moyen d'atteindre un but, mais qui se situe au niveau des faits ou des étapes pratiques. En termes simples, les techniques ne sont qu'une voie d'atteinte de la méthode utilisée.

Le recueil du sang capillaire et du sang veineux sont deux Techniques de prélèvement utilisés pour le prélèvement de notre échantillon.

2.3.1. Techniques de prélèvement

- Piquer la veine en prenant soin de tourner le biseau de l'aiguille vers le haut ;

- Placer le morceau d'ouate sec sur l'endroit de la piqûre jusqu'à l'arrêt du saignement.

- Récolter une goutte du sang sur la lame porte objet puis faire un étalement mince.

Il convient de noter que chez les nourrissons de moins de 6 mois, nous avons piquer sur le talon ou sur le gros artérielle.

· Déposer une petite goutte de sang à 1 cm du bord de la lame porte-objet à l'aide d'un tube capillaire ;

· Placer le bord de la lame à roder en contact avec la lame, puis entrer en contact avec la goutte de sang (incliner la lame à roder à 45°) ;

· Pousser la lame à roder rapidement, régulièrement, et sans trop appuyer, tout en gardant la même inclinaison

· Soulever progressivement la lame à roder, en fin d'étalement. Le frottis doit s'arrêter à environ 1 ou 2 cm de l'autre extrémité de la lame.

o Le May-Grunwald (éosine-bleu de méthylène) fixe les frottis par son alcool méthylique et colore les éléments acidophiles et les granulations spécifiques des leucocytes.

2.3.2. Dosage d'hémoglobine par l'HemoCue

Le principe de l'Hemocue repose sur le concept de photométrie, qui consiste à mesurer l'absorbance de la lumière par une substance. Dans le cas de l'Hemocue, il utilise une méthode de photométrie de transmission. L'appareil comporte une petite cuvette jetable qui contient l'échantillon de sang à analyser.

- Préparation de l'appareil : allumez l'Hemocue et vérifiez que l'écran d'affichage fonctionne correctement. Assurez-vous que l'appareil est calibré et que les piles sont suffisamment chargées.

- Préparation de l'échantillon de sang : obtenez un échantillon de sang capillaire en utilisant une lancette stérile pour percer la peau du doigt ou une autre partie du corps. Essuyez la première goutte de sang avec un coton stérile. Remplissez ensuite la cuvette de l'Hemocue avec suffisamment de sang pour qu'elle soit remplie.

- Insertion de la cuvette : Insérez délicatement la cuvette remplie de sang dans la fente prévue à cet effet de l'appareil. Assurez-vous que la cuvette est correctement positionnée et qu'elle est bien en contact avec les parties internes de l'appareil.

- Lecture des résultats : l'Hemocue effectue automatiquement la mesure de l'absorbance de la lumière par l'échantillon de sang. Il convertit ensuite ces mesures en une valeur d'hémoglobine, qui est affichée sur l'écran de l'appareil. Notez la valeur affichée, qui est exprimée en grammes par décilitre (g/dl) ou en millimoles par litre (mmol/l) selon les unités utilisées par l'appareil.

- Élimination de la cuvette : Retirez soigneusement la cuvette utilisée de l'Hemocue et jetez-la selon les protocoles de sécurité et d'élimination des déchets biomédicaux.

2.3.3. Numération de globules rouges

Le sang est dilué dans un liquide approprié. On compte les hématies au microscope, dans une cellule hématimètre, et on calcule le nombre par millimètre cube.

- À l'aide d'une micropipette, aspirer 20 micro litres du sang dans un flacon contenant 3980 micro litres d'eau physiologique

- La dilution est de 1/200 c'est-à-dire le volume du soluté est de 20 ìl et celui du solvant est de 3980.

- Fixer avec soin la lamelle à la cellule en exerçant une pression suffisante ;

- Bien mélanger le sang dilué. À la pipette Pasteur remplir une chambre de la cellule, en prenant garde de ne pas dépasser la partie lignée.

- Mettre la cellule sur la platine du microscope. Utiliser l'objectif 10X (oculaire 6X ou 10X) ;

- Les hématies sont comptées dans une zone de 0.2mm3, en utilisant les carrés A, B, C, D et E (du grand carré central).

- Le nombre d'hématies comptés dans les cinq petits carrés du grand carré central est multiplié par 10 000.

2.3.4. Mesure de l'hématocrite

- Placer l'extrémité (cerclé de rouge) du tube capillaire hépariné dans la goutte de sang. Le sang pénètre dans le tube capillaire. Le laisser se remplir environ aux ¾.

- Boucher avec la cire molle l'autre extrémité du tube (celle qui n'a pas touché le sang). Vérifier qu'elle est complètement bouchée sur 2 mm environ. Si on ne dispose pas de cire molle ou de pâte à modeler, fermer cette extrémité du tube en la chauffant avec prudence au-dessus de la flamme d'une lampe à alcool. Laisser refroidir en position horizontale.

- Déposer les tubes capillaires dans une des rainures numérotées du plateau du Centrifugeur, en s'assurant que chaque numéro correspond à celui de l'échantillon.

- L'extrémité bouchée à la cire (ou à la flamme) doit être sur le pourtour extérieur du plateau.

- Après la centrifugation, les tubes contiennent 3 couches :(i) en haut, une colonne de plasma ;(ii) au milieu, un très petit disque formé par les globules blancs, (iii) au fond, une colonne de globules rouges.

C'est exactement au sommet de cette colonne de globules rouges que se lit la fraction de volume érythrocytaire sur une table de lecture.

4 CHAPITRE3ÈME

PRÉSENTATION DES DONNÉES ET INTERPRÉTATION DE RÉSULTATS

4.1.1 3.1. Présentation des données

Dans ce tableau, il ressort que 26 cas, soit 55,3% sont de sexe féminin et 21cas soit 44,7% sont de sexe masculin, le sex-ratio est de 0,8.

Age	Effectif	%
0 à 12 ans	12	25,5
13 à 20 ans	26	36,2
21 et plus	18	38,3
Total	47	100,0

Au regard de ce tableau, nous constatons que la classe modale des sujets anémiques se situe entre 13 ans et 20ans avec 26 cas, soit 36%.

Tableau 3. Réparation des patients selon les résultats du VGM (Type d'anémie)

Type d'anémie	Masculin (44,7%)		Féminin (55,3%)		Total des types d'anémie
	ni	%	ni	%	Ni	%
Microcytaire	12	36,4	21	63,6	33	70,2
Macrocytaire	3	50	3	50	6	12,8
Normocytaire	6	75	2	15	8	17,0

Cetableau révèleque 33 cas, soit 70,2% (dont 36,4% de masculins et 63,6% de féminins), ont une anémie microcytaire ;6 cas soit 12,7% (dont 50% des masculins et 50% des féminins)ont une anémie macrocytaireet8 cas soit 17,0% (dont 75% des masculins et 15% des féminins) ont une anémie normocytaire.

Tableau 4. Répartition des patients selon les anomalies de forme en fonction des résultats du VGM

Forme	Type d'anémie
	Microcytaire (VGM < 80fl)		Normocytaire (80fl >VGM > 100fl)		Macrocytaire (VGM > 100fl)		Total
	Ni	%	Ni	%	ni	%	ni	%
Annulocyte	5	10	1	10	4	40	10	21,3
Cellule cible	14	73,7	4	21,1	1	5,2	19	40,4
Poikinocyte	1	100	0	0,0	0	0,0	1	2,1
Ovalocyte	2	66,7	1	33,3	0	0,0	3	6,4
Echinocyte	8	72,7	2	18,2	1	9,1	11	23,4
Dacryocyte	3	100	0	0,0	0	0,0	3	6,4

À l'issu de ce tableau, l'on remarque que les cellules cibles, les echinocytes et les annulocytes sont majoritaires chez les anémiques. En rapport avec les types d'anémies, ces cellules sont réparties en :

(i) 19 cas de cellules cible, soit 40,4% (dont 73,7% des cas sont manifestes dans les anémies microcytaire, 21,1% dans les anémies normocytaires et 5,2% dans les anémies macrocytaires),

(ii) 11 cas des echinocytes soit 23,4% (dont 72,7% se retrouvent dans les anémies microcytaires, 18,2% dans les anémies normocytaires et 9,1% dans les anémies macrocytaires) ;

(iii) 10 cas des annulocytes, soit 21,3%, (dont 50% sont concentrés dans les anémies microcytaires, 10% dans les anémies normocytaires et 40% dans les anémies macrocytaires) ;

(iv) 3 cas d'ovalocytes, soit 6,4%, (dont 66,7% se retrouvent dans les anémies microcytaires et 33,3% dans les anémies normocytaires)

(v) 3 cas des dacryocytes, soit 6,4%, tous étant dans les anémies microcytaires

(vi) 1 cas les poikilocytessoit 2,1%, qu'on retrouve chez les anémies microcytaires.

4.1.2 3.2. Discussion

Dans la pratique au laboratoire, nous avions constaté que tous les sujets anémiques (100%) avaient des globules rouges anormaux, d'une manière ou d'une autre, dans leur sang. Autrement dit, bien qu'il y avait des hématies de forme normale, il ne manquait point des hématies anormales. Alors que Balikwisha S. (2017), dans son travail, avait trouvé 43,8% des cas avec globules rouges normaux et 56,2% présentant des hématies avec formes anormales. Alors que Bony Nicaise F. (1997), dans son travail en Algérie, avait trouvé des anomalies de globules rouges chez 96% des sujets anémiques.

Nos résultats montrent que les formes anormales des globules rouges les plus retrouvées chez les anémiques sont les cellules cible (40,4%), les echinocytes (23,4%) et les annulocytes (21,3%). Ce qui ne corrèlent pas avec les résultats de Bony Nicaise F. qui prouvent que les anomalies de forme dominantes sont par les ovalocytes (58 %) et les echinocytes (51 %). Mais pour les annulocytes, nos résultats correspondent à ceux de Bony Nicaise F. qui a trouvé 23 %.

Les résultats de nos enquêtes prouvent 70,3%, ont une anémie microcytaire ; 17,0% ont une anémie normocytaire et 12,7% ont une anémie macrocytaire. Ces données sont conformes à ceux deKazadi, M., et coll. (2009) qui ont trouvé que l'anémie microcytaire chez 72,5% des patients, normocytaire chez 26,9% et macrocytaire chez 1,2%.

Il en est de même pour les résultats rapportés par Bony Nicaise F. qui a trouvé 61 % des patients qui présentent une anémie microcytaire, 25% des patients, une anémie normocytaire et 14% des patients, une unémie macrocytaire.

4.1.3 3.3. Conclusion

Notre travail a porté sur "l'étude de formes de globules rouges chez les sujets anémiques". Il a été réalisée dans la Zone de santé de Beni d'avril à Août 2023. Nous avions pu prélevé des échantillons de sang chez 47 personnes anémiques dans différentes structures sanitaires (HGR Beni, CS Madrandele et le CH Emmanuel d'Alzon.

Après analyses de tous les échantillons au laboratoire du CS Madrandele, nous trouvé les résultats ci-après :

Nos enquêtés sont répartis en 55,3% de sexe féminin et 44,7% sont de sexe masculin. D'où, le sex-ratio est de 0,8.

Au regard de types d'anémies, nous avions constaté que 70,2% (dont 36,4% de masculins et 63,6% de féminins), ont une anémie microcytaire ; 12,8% (dont 50% des masculins et 50% des féminins) ont une anémie normocytaire et 17,0% (dont 75% des masculins et 15% des féminins) ont une anémie macrocytaire.

Il s'avère impérieux de noter que tous les sujets anémiques présentent des formes anormales des globules rouges :100% de nos enquêtés présentent des anomalies. Ces résultats corrèlent avec ceux de Bony Nicaise F. qui, dans ses recherches, avait trouvé 96% des cas d'anomalies de globules rouges chez les sujets anémiques.Dans nos résultats, ces anomalies se retrouvent dans chaque catégories d'anémies, réparties en :

- 40,4% de cellules ciblesdont 73,7% des cas sont manifestes dans les anémies microcytaire, 21,1% dans les anémies normocytaires et 5,2% dans les anémies macrocytaires),

- 23,4% des echinocytesdont 72,7% se retrouvent dans les anémies microcytaires, 18,2% dans les anémies normocytaires et 9,1% dans les anémies macrocytaires ;

- 21,3% cas des annulocytesdont 50% sont concentrés dans les anémies microcytaires, 10% dans les anémies normocytaires et 40% dans les anémies macrocytaires ;

- 6,4% d'ovalocytes, dont 66,7% se retrouvent dans les anémies microcytaires et 33,3% dans les anémies normocytaires.

- 6,4%des dacryocytessont tous constatés seulement dansles anémies microcytaires.

- 2,1% des poikinocytesont été retrouvéseulement chez les anémies microcytaires.

Les résultats ci-hautaffirment notre hypothèse stipulant que les cellules cibles, les echinocytes et les annulocytes sont les anomalies morphologiques de globules rouges les plus fréquentes en cas des anémies. De surcroît, les anémies microcytaires sont les plus retrouvées chez les sujets anémiques, ensuite les anémies normocytaires et les anémies macrocytaires.

3.4. RECOMMANDATIONS

· Mettre à disposition des ressources suffisantes pour le dépistage précoce et le diagnostic précis de l'anémie, y compris des équipements de laboratoire et des professionnels de la santé qualifiés.

· Élaborer et mettre en oeuvre des plans de sensibilisation à l'anémie auprès de la population, en mettant l'accent sur les facteurs de risque, les symptômes, les complications potentielles et les méthodes préventives.

· Collaborer avec d'autres institutions de santé pour mettre en place des programmes de dépistage régulier de l'anémie dans les populations vulnérables, en particulier les enfants et les femmes enceintes.

· Se faire dépister régulièrement pour détecter l'anémie, en particulier si vous présentez des symptômes tels que fatigue accrue, essoufflement et pâleur.

· Adopter une alimentation équilibrée et variée, riche en fer, vitamine B12 et acide folique, pour prévenir l'anémie.

· S'informer sur les facteurs de risque de l'anémie, tels que les maladies chroniques, les carences nutritionnelles, les menstruations abondantes et les infections parasitaires, afin de prendre des mesures préventives appropriées.

· De faire recherche continue sur notre étude qui a permis de mettre en évidence des formes particulières de globules rouges chez les sujets anémiques en zone de santé de Beni. Il est donc recommandé de poursuivre la recherche dans ce domaine afin d'approfondir la compréhension des mécanismes sous-jacents à ces variations et d'explorer de potentielles nouvelles approches thérapeutiques.

RÉFÉRENCE BIBLIOGRAPHIQUE

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TABLE DE MATIERE