Memoire Online - Evaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

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+ Du Père Créateur, pour avoir été avec nous tout au long de ces années et avoir rendu possible l'achèvement de ce travail

+ Du Directeur de l'École des Sciences de la Santé de l'Université Catholique d'Afrique Centrale (ESS-UCAC), le Pr NKOUM Benjamin Alexandre pour avoir déployé ses ressources afin que nous puissions concilier la pratique à la formation théorique reçue durant ses trois années

+ De tout le personnel administratif et d'appuis de l'ESS-UCAC, pour n'avoir ménagé aucun effort dans l'accomplissement de leurs devoirs pour le bien de notre formation

+ De Mme YANKWA Sylvie, Mme DIWANDJA Solange et Mme ATEBA Pulchérie, nos responsables de classe durant ce cycle de formation, pour nous avoir accueilli, enseigné, coordonné et pour avoir contribué à grande échelle à notre développement professionnel et social

+ De M. ASSOUMOU Parfait et à la Fédération des Mouvements d'Apostolat de l'ESS-UCAC, pour la disponibilité et la revitalisation de notre foi catholique

+ De M. EBONDA Normand Davy et Mme SAHA Esther, pour toute la disponibilité, l'intérêt et le suivi portés à notre travail

+ De M. TOKAM, chef service du laboratoire du CMC-AGH de Mimboman et toute son équipe pour les enseignements, le soutien et l'intérêt portés à ce travail

+ De M. MABOU NOUKI Yvan, pour l'accompagnement durant ces années, la disponibilité et l'intérêt porté à ce travail

connaissances au sein du campus dans son grand ensemble, pour le soutien débordant + De ma grande famille, pour le soutien, la protection et les prières

+ De mes précieux parents sans qui tout ceci n'aurait été possible, mes frères, et soeurs pour l'amour sans limite et les encouragements débordants

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Tableau 2 : Limites de qualité pour les paramètres bactériologiques des eaux 11

Tableau 3 : Références de qualité pour les paramètres bactériologiques des eaux 11

Tableau 4 : Présentation du matériel, consommables, réactifs et équipements pour l'analyse 23

Tableau 5 : Répartition de la population suivant la situation socio-professionnelle 40

Tableau 7 : Sources d'approvisionnement en eau utilisées par la communauté de Ngoa-Ékélé

Tableau 8 : Distribution de sources de pollution selon le point d'approvisionnement 42

Tableau 9 ; Méthodes de traitement des eaux employées par les populations à domicile 44

Tableau 12 ; Germes isolés par source et selon que l'eau soit traité ou pas 46

Tableau 13 : Récapitulatif des germes retrouvés dans les points d'échantillonnage des eaux 46 Tableau 14 : Récapitulatif du dénombrement bactérien des eaux de la localité de Ngoa-ékélé

47
Tableau 15 : Récapitulatif des problèmes répertoriés concernant les eaux Ngoa-ékélé et

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Figure 18 : Aspect de quelques milieux Sélénite après incubation durant 24h à 37°C 34

Figure 19 : Aspect d'une micro gallérie API 20E après incubation durant 24h à 37°C 34

Figure 20 : Résultat d'identification des entérobactéries avec le logiciel APIDENT 34

Figure 24 : Proportion des facteurs de pollution dans la localité de Ngoa-ékélé 43

Figure 25 : Proportion des habitants qui traitent l'eau de manière individuelle 44

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RESUME

L'eau représente l'élément constitutif majoritaire du corps d'un être vivant. Elle est estimée à 60% dans la composition de ce dernier avec une consommation minimale de 1,5L/Jr. Pour cela, Il incombe qu'elle soit de bonne qualité sanitaire pour ainsi évoquer sa potabilité, ceci dans l'optique d'éviter que les populations soient sujets à diverses maladies d'origine hydrique. Des études ont permis d'établir que la pollution hydrique était la cause d'une mortalité qui s'élève d'années en années chez les populations des pays en voie de développement. À ce propos, il a été important pour nous, de savoir quel est le réel profil bactériologique des eaux consommées dans de telles zones. C'est ainsi que notre recherche a porté sur " L'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé ". Il s'agit d'une étude descriptive type transversale qui a été basée sur des collectes d'eau de consommation dans cette localité au niveau de deux sources et cinq puits, associée à la détermination du profil bactériologique de ces eaux. Cette détermination s'est faite par une méthode de dénombrement directe, la filtration sur membrane et l'identification grâce à l'usage de milieux spéciaux et des galeries miniaturisées API 20^E couplé à l'usage du logiciel APIDENT version 2.0 pour la nomenclature des espèces. Les facteurs de pollution et les pathologies associées à ces eaux ont été recensés par usage d'un questionnaire soumis à 53 participants. Les données ont été recueillies par le logiciel CSPro et traitées par les logiciels Excel et SPSS. Les résultats obtenus ont révélé que sur les sept points d'eau étudiés, les sources regorgent de Klebsiella oxytoca et entérocoques, les puits regorgent de Klebsiella gr. 47, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes et entérocoques. Ce qui traduit à 67% la répartition du genre Klebsiella et à 33% la répartition du genre Enterobacter dans les eaux de la localité s'agissant des coliformes. La présence des entérocoques équivaut à 100% car retrouvés dans tous les échantillons testés. Des facteurs majeurs justifiant l'existence de ces germes dans les eaux ont pu être associés, notamment les latrines, les rigoles puis les dépotoirs retrouvés à proximité des points d'eau. L'étude a pu associer le non traitement des eaux par les populations à ces facteurs environnementaux. Les maladies hydriques affectant les consommateurs et pouvant être associées au profil bactérien existant ont été recensées révélant la parution au sein de la population étudiée de la fièvre typhoïde et paratyphoïde à 48,39%, les gastro-entérites et la dysenterie à 22,58%, puis les infections de la peau à 6,45%. En somme, les eaux de la localité de Ngoa-ékéléé s'avèrent impropres à la consommation.

Mots clés: eau, évaluation, potabilité, pollution, profil bactériologique, Yaoundé

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ABSTRACT

Water represents the major constituent element of the body of a living being. It is estimated at 60% in the composition of the latter with a minimum consumption of 1.5L / Jr. For this, it is incumbent that it is of good sanitary quality to thus evoke its potability, this in order to avoid that the populations are subject to various water-borne diseases. Studies have established that water pollution is the cause of mortality which rises from year to year among populations in developing countries. In this regard, it was important for us to know the real bacteriological profile of the water consumed in these countries. This is how our research focused on "The bacteriological evaluation of drinking water from the populations of Ngoa-Ekélé in Yaoundé". This is a descriptive cross-sectional study which was based on collections of drinking water in this locality at two sources and five wells, associated with the determination of the bacteriological profile of these waters. This determination was made by a direct enumeration method, membrane filtration and identification thanks to the use of special media and API 20E miniaturized galleries coupled with the use of the APIDENT version 2.0 software for the nomenclature of species. The pollution factors and pathologies associated with these waters were identified using a questionnaire submitted to 53 participants. The data were collected by CSPro software and processed by Excel and SPSS software. The results obtained revealed that at the seven water points studied, the springs were full of Klebsiella oxytoca and enterococci, the wells were full of Klebsiella gr. 47, Klebsilla pneumoniae, Enterobacter aerogenes and enterococci. This translates to 67% the distribution of the genus Klebsiella and to 33% the distribution of the genus Enterobacter in the waters of the locality speaking of coliforms. The distribution of enterococci is equivalent to 100% because they are found in each sample tested. The major factors justifying the existence of these germs in the water turned out to be: the latrines, the ditches and then the dumps found near the water points. The study was able to link the non-treatment of water by the populations to these environmental factors. Water-borne diseases affecting consumers and which may be associated with the existing bacterial profile have been identified, revealing the appearance in the population studied of typhoid and paratyphoid fever at 48.39%, gastroenteritis and dysentery at 22.58%. , followed by 6.45% skin infections. In short, the waters of the locality of Ngoa-ékéléé are found to be unfit for consumption.

Keywords: water, evaluation, drinkability, pollution, bacteriological profile, Yaoundé

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INTRODUCTION

Dans le monde entier et pour chaque individu, l'eau occupe une place de choix, car non seulement rentre dans la constitution du corps humain mais aussi dans l'assouvissement des besoins élémentaires (usage domestique, usage corporel, usage dans les industries agro-alimentaires) pour ne citer que ceux-là. « L'eau est un droit fondamental. Sans eau, il est impossible de survivre » affirme Henrietta Fore, la directrice générale du Fond des nations unies pour l'enfance (UNICEF). En 2010, l'Organisation des Nations Unies (ONU) a reconnu que « le droit à l'eau potable et à l'assainissement est un droit de l'Homme, essentiel à la pleine jouissance de la vie et à l'exercice de tous les droits de l'Homme ». Le droit de l'Homme à l'eau signifie que chacun, sans discrimination, « a droit à un approvisionnement suffisant, physiquement accessible et à un coût abordable, d'une eau potable et de qualité acceptable par les usagers personnels et domestiques, qu'il s'agisse de boisson, d'assainissement individuel, de lavage de linge, de préparation des aliments ou d'hygiène personnelle et domestique », rapporte l'ONU sur son site internet. Cependant, les ressources en eaux dans les pays en voie de développement s'avèrent rares et de qualité sanitaire douteuse. Face à cette situation, notre intérêt s'est porté sur une évaluation bactériologique de ces eaux de consommation au Cameroun et principalement ville de Yaoundé, localité de Ngoa-ékélé. Notant l'existence d'une pléthore de bactéries pouvant se retrouver dans les eaux, à l'instant des entérobactéries, coliformes et entérocoques pour ne citer que ceux-là, nous avons ainsi envisagé de ressortir les différents facteurs favorisant la présence de bactéries, d'identifier les bactéries présentes dans les eaux de consommation de cette localité et de déterminer les pathologies causées par les bactéries présentes dans ces eaux sur la population. Dans la suite des écrits, nous vous présenterons tout d'abord la problématique qui se dégage de cette étude, ensuite une revue de la littérature en rapport à notre thématique, puis la méthodologie employée pour parvenir à nos objectifs et les résultats obtenus accompagnés de discussion.

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CHAPITRE I : PROBLEMATIQUE DE L'ETUDE

L'accès à une eau de boisson saine est une condition indispensable à la santé, un droit de l'homme essentiel et une composante clé des politiques efficaces de protection sanitaire. L'importance de l'eau, de l'assainissement et de l'hygiène pour la santé et le développement transparaît dans les conclusions d'une série de forums politiques internationaux. Parmi les plus récents, figure notamment l'adoption des Objectifs de développement durable par les pays en 2015 incluant une cible et des indicateurs pour la sécurité sanitaire de l'eau de boisson. En outre, l'Assemblée générale des Nations Unies a déclaré en 2010 qu'une eau de boisson sûre et saine et l'assainissement étaient un droit de l'homme essentiel à la pleine jouissance de la vie et à l'exercice de tous les droits de l'homme. Ces engagements sont conformes à un soutien de longue date, notamment l'adoption par l'Assemblée générale des Nations Unies des Objectifs du Millénaire pour le développement en 2000 et la proclamation de la période 2005 - 2015 Décennie internationale d'action sur le thème « L'eau source de vie ». L'accès à une eau de boisson saine influe également de manière importante sur la santé et le développement aux niveaux national, régional et local. Pour certaines régions, il a été démontré qu'investir dans l'approvisionnement en eau et l'assainissement pouvait déboucher sur un bénéfice économique net, dans les cas où la réduction des effets sanitaires préjudiciables et des coûts des soins de santé fait plus que compenser ces dépenses. Cette constatation s'applique aux infrastructures d'approvisionnement en eau de grande ampleur comme au traitement de l'eau à domicile. L'expérience a également montré que les interventions visant à améliorer l'accès à une eau saine, qu'elles soient dans le cadre des zones rurales ou urbaines, bénéficient particulièrement aux plus démunis et peuvent constituer une composante efficace des stratégies de réduction de la pauvreté. (OMS | Directives de qualité pour l'eau de boisson: Quatrième édition intégrant le premier additif, s. d.)

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C'est de tout ce qui précède, que s'enracine « L'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Eélé », thème et raison d'être de notre étude.

L'accès à l'eau a toujours été une préoccupation majeure pour l'Homme. Aujourd'hui, la principale difficulté n'est pas l'accès à l'eau mais plus précisément l'accès à l'eau potable. En effet, ceci s'explique compte tenu du fait que l'eau peut être le véhicule d'un très grand nombre d'agents pathogènes rejetés dans le milieu extérieur par les matières fécales humaines ou animales.

L'eau est au coeur du développement durable et est essentielle au développement socio-économique, à la production d'énergie et des aliments, à la santé des écosystèmes et à la survie de l'humanité. Alors que la population mondiale augmente, il est essentiel qu'un équilibre soit établi afin que les communautés aient suffisamment d'eau pour leurs besoins. Au niveau humain, la question de l'eau ne peut pas être considérée indépendamment de celle de l'assainissement. Elles sont essentielles pour réduire le fardeau au niveau mondial des maladies liées au manque d'eau potable et améliorer la santé, l'éducation et la productivité économique des populations rapporte (ONU, 2018). Malheureusement cette eau est d'autant plus précieuse à la vie humaine qu'elle est le véhicule et voie de dissémination de nombreux microorganismes (bactéries, virus, parasites) qui induisent des maladies au sein des populations. Nous savons que ces affections à l'instar des gastroentérites, choléra, dysenterie, fièvre typhoïde (...) liées à l'eau causent des maladies et des décès partout dans le monde, surtout dans les pays en voie de développement. L'OMS déclare que dans les pays en voie de développement, 4/5 de toutes les maladies sont causées par l'eau. Ceci est la cause de 3,4 millions de décès chaque année notamment des enfants.

Au Cameroun, les pouvoirs publics multiplient les efforts pour améliorer l'accès à eau potable. Malgré cela, le taux d'accès à l'eau potable atteint à peine 33% selon une étude et l'approvisionnement en eaux de consommation se présente sous différentes formes (sources, forages, pompes, rivières et puits) pour la grande majorité et varie en fonction de différentes zones d'habitation. En 2015, le gouvernement camerounais a signé avec la société générale de France et la société import-export des États-Unis, deux conventions de financement d'un montant total de 36,110 millions de francs CFA dédiés au projet d'alimentation en eau potable

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de la ville de Yaoundé et ses environs. Ce projet devait accroitre la production en eau à Yaoundé de 300.000 mètres cube par jour.

Dans la localité de Ngoa-Ekélé, la population étant dense et les ressources en eau ne couvrant pas les besoins avec une nature en terme de qualité inconnue, il est primordial d'étudier ou évaluer le degré de potabilité des points d'approvisionnement en eau existants afin de pouvoir contribuer à améliorer les conditions de vie des populations c'est-à-dire, contribuer à réduire dans la mesure d'une pollution bactérienne existante, les problèmes de santé que rencontreraient les habitants et consommateurs d'eau de la localité ainsi que le taux de mortalité qu'occasionne les maladies causées par l'eau polluée.

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CHAPITRE II : REVUE DE LA LITTERATURE

I. DEFINITIONS DES CONCEPTS

Eau de consommation : est un terme réglementaire qui couvre les eaux de distribution publique destinée à des diverses utilisations.

Eau potable : est une eau que l'Homme peut boire sans risque de tomber malade car possède des caractéristiques microbiologiques, chimiques et physiques répondant aux directives de l'OMS ou aux normes nationales relatives à la qualité de l'eau de boisson.

Évaluation : est une fonction qui consiste à présenter le contenu d'un élément en précis en comparaison à une base légale spécifique pour la mesure de la performance des résultats.

Limites de qualité : valeurs de numération obligatoires à respecter scrupuleusement

Pollution : est une dégradation de l'environnement par l'introduction dans l'air, l'eau ou le sol de matière accidentelle ou non, d'éléments n'étant pas présent naturellement dans le milieu, entrainant ainsi une perturbation de l'écosystème pouvant nuire aux entités présentes aux alentours.

Profil bactériologique : c'est une représentation des micro-organismes de types bactériens pouvant être présents dans un milieu de manière naturelle ou non.

Références de qualité : valeurs indicatives à satisfaire, établies à des fins de suivi des installations de production et de distribution d'eau et d'évaluation des risques pour la santé des personnes, elles constituent en fait un premier niveau d'alerte.

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II. GÉNÉRALITES SUR L'EAU

L'eau recouvre à peu près les trois quarts de la surface terrestre. Elle existe dans l'atmosphère et sous la terre. Elle est principalement dans les océans mais on la retrouve aussi dans les rivières, les lacs, la neige et les glaciers. Par ailleurs, nous retrouvons au-delà de 99 % de l'eau potable dans les glaciers, les champs de glace ou sous terre.

Cette section distique entre les différents types d'eau qui constituent l'approvisionnement mondial et canadien; là où il se trouve et combien nous en avons. Parmi ceux-ci :

? L'eau de surface : sur terre, dans les cours d'eau, les lacs ou les terres humides, ? Les eaux souterraines : omniprésentes dans le sous-sol dans les interstices des particules de roches et de sol, ou dans les crevasses et fissures des roches,

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? L'eau atmosphérique : présente dans l'atmosphère soit en tant que solide (neige, glace), liquide (pluie) ou gaz (brouillard, brume)

La pollution « thermique », conséquence du déversement dans le milieu aquatique de quantités considérables d'eau utilisées pour le refroidissement des centrales thermiques ou nucléaires, peut faciliter le développement d'amibes libres, pathogènes pour les baigneurs, surtout en période de faibles débits (étiage), en plus de modifier l'équilibre biologique des eaux au regard des espèces piscicoles.

La pollution radioactive est celle qui inquiète le plus la population, or elle est, et de très loin, la plus faible. Cette inquiétude est liée en particulier à une méconnaissance des différents types de rayonnements et de leur dangerosité.

La pollution chimique est probablement la plus fréquente, très largement répandue et très diverse. Il s'agit d'abord de contaminations par des composés inorganiques, par exemple : sodium, nitrates, phosphates, métaux lourds (plomb, mercure, cadmium)...

La pollution microbiologique est très importante. Son origine est avant tout d'origine fécale, due aux déjections humaines et animales, au travers des eaux usées plus ou moins bien maîtrisées. Les microorganismes de pollution fécale des eaux sont des bactéries susceptibles de provoquer des troubles gastro-intestinaux (salmonelles, shigelles, E. coli, vibrion cholérique...), des virus (entéro-virus de type poliovirus, coxackie et echovirus, virus de l'hépatite A, corona et rota-virus, virus de Norwalk et assimilés...) responsables, selon les cas, de gastro-entérites, hépatites ou syndromes neuro-méningés.

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4. MALADIES ASSOCIÉES À LA CONSOMMATION D'UNE EAU NON POTABLE DU POINT DE VUE BACTERIOLOGIQUE

Parmi les maladies d'origine hydrique associées à des pathogènes de type bactérien, les maladies suivantes ont été consignées dans ce tableau :

Micro-organismes	Affections
Aeromonas spp	Gastro-entérites, Syndromes cholériques
Campylobacter jejuni/C. coli	Gastro-entérites
Clostridium perfringens	Indicateur de contamination fécale peu spécifique de gastro-entérites
Escherichia coli, entéropathogènes, entérotoxiques, entéroinvasifs	Gastro-entérites et syndromes cholériformes, Indicateur de contamination fécale
Enterococcus spp	Aucune en relation avec l'eau. Indicateur de contamination fécale
Légionella pneumophila	Pneumopathie, fièvre (in-halation d'aérosols)
Leptospira spp	Leptospirose ictérohémorragique
Pseudomonas aeruginosa	Infections cutanées , suppuratives ou éruptives, surinfections, pneumopathies
Salmonella	Fièvres typhoïdes typhiques et para- typhiques
Salmonella typhimurium, S. enteritidis	Gastro-entérites, infections systémiques
Shigella dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei	Gastro-entérites et dysenterie
Vbrio cholerae, Vibrio spp	Gastro-entérites et cholera , infections cutanées
Yersinia enterolitica	Gastro-entérites
Staphylococcus aureus	Infections cutanées suppuratives, indicateur de contamination de proximité

(L'analyse de l'eau - 10e éd. - Jean Rodier,Bernard Legube,Nicole Merlet, s. d.)

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Le traitement des eaux a pour but de détruire tous les organismes nocifs qui sont présents dans l'eau pour la rendre propre à la consommation. On note entre autre les procédés suivant :

Aération : La méthode de l'aération, en mettant l'eau en contact étroit avec l'air, augmente la teneur en oxygène de l'eau. Cela permet d'éliminer les substances volatiles, telles que l'acide sulfurique et le méthane, qui ont un effet sur le goût et l'odeur, de réduire la teneur de l'eau en dioxyde de carbone, et d'oxyder les minéraux dissous dans l'eau, tels que le fer et le manganèse, de façon à ce qu'ils puissent être éliminés par sédimentation et filtration.

Filtration : Un filtre permet de décontaminer l'eau en bloquant physiquement les particules et en les séparant de l'eau qui le traverse. Les filtres à membrane fonctionnent avec des mécanismes de décontamination semblables à ceux des autres filtres. Ils peuvent être très performants en bloquant des organismes encore plus petits tels que les virus. Les filtres à usage domestique peuvent être confectionnés dans des récipients en argile, métal ou plastique. Concernant les filtres en céramique, l'eau passe lentement à travers un filtre en céramique ou un filtre à bougie. Durant ce processus, les particules en suspension sont séparées de l'eau de façon mécanique.

Ébullition : L'ébullition est une méthode très efficace de désinfection de l'eau, mais cette méthode nécessite beaucoup d'énergie. L'eau doit être portée à ébullition à gros bouillons. En plus du coût important de la source d'énergie nécessaire pour faire bouillir l'eau, cette méthode de désinfection a le défaut de changer le goût de l'eau. Ceci peut être amélioré en aérant l'eau, en la secouant vigoureusement dans un bidon fermé après refroidissement.

Désinfection chimique : De nombreux produits chimiques peuvent désinfecter l'eau mais le produit le plus souvent utilisé est le chlore. Avec un dosage approprié, le chlore élimine la plupart des virus et bactéries, mais certaines espèces de protozoaires (notamment le cryptosporidium) sont résistantes au chlore. Il existe plusieurs sortes de chlore pour une utilisation à domicile ; sous forme liquide, en poudre ou en pastilles.

Désinfection solaire (procédé SODIS) : Les rayons ultraviolets du soleil ont la capacité de détruire les pathogènes présents dans l'eau. Pour cela, il faut remplir des

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récipients en plastique transparent de un ou deux litres avec de l'eau claire et les exposer à la lumière directe du soleil. La période de temps nécessaire pour détruire les pathogènes varie selon la transparence du récipient, l'intensité de la lumière du soleil et la clarté de l'eau. Laisser l'eau refroidir et secouer vigoureusement avant utilisation. (05_traitement_eau_boisson_urgence.pdf, s. d.)

III. NORMES DE POTABILITE BACTÉRIOLOGIQUE SUR LES EAUX DE CONSOMMATION

La qualité bactériologique est évaluée par la recherche de bactéries témoins de contamination fécale. Ces germes montrent que des micro-organismes pathogènes (comme les staphylocoques, les salmonelles, les entérovirus...) peuvent aussi s'introduire dans le réseau hydrologique. Leur présence dans l'eau révèle donc un manque de fiabilité des équipements (défaut des captages, dysfonctionnement ou absence des installations de traitement, insuffisance dans l'entretien des ouvrages). Le risque principal est l'apparition de troubles intestinaux (comme des gastro-entérites par exemple) d'autant plus importants que les contaminations sont fréquentes et massives. (Syndicat de la Faye - Qualité de l'eau > Normes de l'eau, s. d.)

? Les eaux de distribution doivent respecter scrupuleusement les valeurs consignées dans ce tableau :

Tableau 2 : Limites de qualité pour les paramètres bactériologiques des eaux

Tableau 3 : Références de qualité pour les paramètres bactériologiques des eaux

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C'est une représentation des micro-organismes de types bactériens pouvant être présents dans un milieu de manière naturelle ou non. Nous avons tenu à circonscrire pour cette étude, l'identification des germes constituants les indicateurs de la limite qualité des eaux de boisson puis certains constituants la référence qualité au moyen de la filtration sur membrane. Quelques indications sont fournies concernant certains micro-organismes que l'on peut retrouver dans les eaux. (Syndicat de la Faye - Qualité de l'eau > Normes de l'eau, s. d.)

Escherichia coui : l'apparition de cette bactérie dans l'eau indique la présence éventuelle de micro-organismes pathogènes. C'est la principale bactérie du groupe des coliformes fécaux. Ces derniers sont des indicateurs d'une contamination d'origine fécale car ils apparaissent toujours en grande quantité dans les déjections animales et humaines. C'est pour cela que les coliformes fécaux constituent un bon test de contamination des eaux par des matières fécales. Certaines souches d'Escherichia coli sont pathogènes pour l'homme et peuvent provoquer des troubles intestinaux ressemblant à une gastro-entérite, au choléra ou à la dysenterie.

Entérocoques : ils appartiennent à la famille des streptococcacae, ce sont les hôtes normaux de l'intestin, ils ne sont pas considérés comme pathogènes mais peuvent provoquer des infections localisées. Leur recherche, associée à celle des coliformes fécaux (Escherichia coli), constitue un bon indice de contamination fécale. Ils dénotent donc la présence éventuelle de micro-organismes pathogènes. Parmi les entérocoques, on peut citer les streptocoques fécaux dont la recherche est faite pour juger de l'efficacité d'un traitement de désinfection. Leur forte résistance aux agents désinfectants en fait également des représentants de la contamination virale car leur résistance est comparable à celle des virus. Enfin, leur meilleure résistance dans les eaux que les coliformes met en évidence une pollution plus ancienne.

Bactéries coliformes (coliformes totaux) : les bactéries coliformes sont présentes dans les matières fécales mais se développent également dans les milieux naturels (sols, végétation,

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eaux naturelles). Ce ne sont donc pas des bactéries d'origine strictement fécale. Ces entérobactéries, très répandues, sont des micro-organismes de l'intestin jouant un rôle dans les phénomènes digestifs. Elles sont également trouvées au niveau de la cavité buccale, des organes génitaux et des voies aériennes supérieures. La présence d'un petit nombre de coliformes totaux dans les eaux souterraines non traitées n'a qu'une signification réduite sur le plan sanitaire. En général, l'absence des coliformes ne signifie pas que l'eau ne présente pas de risque pathogène car les kystes de certains parasites sont plus résistants à la désinfection que les coliformes. Lorsque des coliformes totaux sont détectés dans les eaux de distribution, une recherche d'Escherichia coui et d'Entérocoques est engagée. Certaines espèces de coliformes sont pathogènes, mais excepté Escherichia coui, les espèces pathogènes véhiculées par l'eau sont sans réel impact sanitaire.

Bactéries sulfito-réductrices y compris les spores : micro-organismes anaérobies sporigènes, ces germes ont la particularité de développer une forme de résistance : les spores. Ils se retrouvent dans les matières fécales, les sols et les rivières. Les plus fréquents sont les Clostridium perfringens qui se retrouvent uniquement dans les fèces mais en bien moins grand nombre qu' Escherichia coui. Leurs spores les rendent résistants à l'action des désinfectants et notamment du chlore et leurs permettent de survivre dans l'eau beaucoup plus longtemps que les coliformes. Leur présence ne signifie pas forcément un dysfonctionnement du système de désinfection. Par contre, cela montrera un dysfonctionnement du traitement de filtration et de clarification, lorsqu'il existe. L'absence de spores dans une nappe souterraine ou une nappe alluviale peut être un signe d'efficacité de la filtration naturelle. Il est particulièrement important de prêter attention à ce paramètre pour les eaux superficielles.

Germes aérobies revivifiables : appelés aussi germes totaux, ils n'ont pas d'effets directs sur la santé, mais sous certaines conditions ils peuvent générer des problèmes dans les systèmes de dialyse. Une faible valeur des germes totaux est le témoin de l'efficacité du traitement et de l'intégrité du système de distribution (pas de stagnation de l'eau, entretien efficace...). Leur trés grande sensibilité en fait un signal d'alarme, avant apparition des bactéries sulfito-réductrices et des coliformes. Leur présence en grand nombre est le signe d'une dégradation de la qualité de l'eau, soit à la ressource, soit dans le réseau. Les bactéries d'origine résiduaire (environnementale) sont dénombrées à 22°C sur une période de 72 heures d'incubation, et les bactéries d'origine intestinale (humaine ou animale) à 37°C sur une période d'incubation de 24 heures. L'ancien décret n° 89-3 du 3 janvier 1989, relatif aux eaux destinées à la consommation humaine, fixait la limite des germes totaux à 100 / mL pour les germes aérobies

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revivifiables à 22°C et à 20 / mL pour les germes aérobies revivifiables à 37°C et ceci pour les eaux non désinfectées. Pour les eaux qui sont traitées, les limites étaient respectivement de 20 / mL et de 2 / mL.

? Quelques germes pathogènes (OMS | Directives de qualité pour l'eau de boisson: Quatrième édition intégrant le premier additif, s. d.)

Campylobacter : Les Campylobacter spp. sont des bâtonnets spiralés incurvés à Gram négatif, micro-aérophiles (besoin d'une faible teneur en oxygène) et capnophiles (besoin d'une teneur élevée en dioxyde de carbone), dotés d'un seul flagelle polaire dépourvu de gaine. Les Campylobacter spp. comptent parmi les agents de gastro-entérite aigüe les plus importants dans le monde. Des approvisionnements en eau de boisson contaminés ont été identifiés comme étant une source importante de flambées de campylobactériose. La détection de flambées et de cas en lien avec l'eau est en augmentation. E. coli (ou les coliformes thermotolérants) est un indicateur approprié de la présence/absence de Campylobacter spp. dans les approvisionnements en eau de boisson.

Klebsiella : Les Klebsiella spp. sont des bacilles non mobiles, à Gram négatif, qui appartiennent à la famille des Enterobacteriaceae. Le genre Klebsiella comprend plusieurs espèces, notamment K. pneumoniae,K. oxytoca, K. planticola et K. terrigena. Les Klebsiella spp. ingérés avec l'eau de boisson ne sont pas considérés comme une source de maladies gastro-intestinales dans la population générale. Les Klebsiella spp. détectés dans l'eau de boisson sont généralement présents dans des biofilms et il est peu probable qu'ils représentent un risque sanitaire. Ces bactéries sont relativement sensibles aux désinfectants et leur pénétration dans les réseaux de distribution peut être évitée par un traitement approprié. Klebsiella est un coliforme et peut être détecté par les tests habituels utilisés pour les coliformes totaux.

Enterobacter sakazakii : Bactérie mobile, en forme de bâtonnet, à Gram négatif, non sporulante, qui a été observée comme contaminant dans les préparations pour nourrissons. Les Enterobacter spp. sont biochimiquement similaires à Klebsiella ; cependant, contrairement à Klebsiella, Enterobacter est ornithine positif. Enterobacter sakazakii s'est avéré plus résistant au stress osmotique et hydrique que d'autres membres de la famille des Enterobacteriaceae. La maladie provoquée par E. sakazakii chez des nourrissons a été mise en lien avec la consommation de préparations commerciales non stériles pour nourrissons.

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Salmonella : Les Salmonella spp. appartiennent à la famille des Enterobacteriaceae. Ce sont des bacilles mobiles à Gram négatif qui ne fermentent pas le lactose, mais la plupart produisent du sulfure d'hydrogène ou des gaz issus de la fermentation des glucides. La transmission, impliquant le plus souvent S. typhimurium, a été associée à la consommation d'eau souterraine contaminée et à des approvisionnements en eaux de surface contaminés. Lors d'une flambée de maladie associée à un approvisionnement d'eau de pluie communal, les excréments d'oiseaux ont été désignés comme étant la source de la contamination. Les Salmonella spp. sont relativement sensibles à la désinfection. Escherichia coli (ou les coliformes thermotolérants) est généralement un indicateur fiable pour les Salmonella spp. dans les approvisionnements en eau de boisson.

Shigella : Les Shigella spp. sont des bacilles à Gram négatif, non sporulants, non mobiles de la famille des Enterobacteriaceae, qui peuvent se multiplier en présence ou en absence d'oxygène. Comme ces organismes ne sont pas particulièrement stables dans des environnements aqueux, leur présence dans l'eau de boisson indique une contamination fécale humaine récente. Les données disponibles sur leur prévalence dans les approvisionnements en eau peuvent être sous-estimées car les techniques de détection généralement utilisées sont relativement peu sensibles et peu fiables. La lutte contre Shigella spp. dans les approvisionnements en eau de boisson est d'une importance particulière pour la santé publique en raison de la gravité de la maladie que ces bactéries provoquent. Les Shigella spp. sont relativement sensibles à la désinfection.

Vibrio : Les Vibrio spp. sont de petites bactéries incurvées (en forme de virgule), à Gram négatif, avec un seul flagelle polaire. La transmission est principalement due à une contamination de l'eau résultant d'un assainissement insuffisant mais celui-ci n'explique pas totalement la récurrence saisonnière et d'autres facteurs doivent intervenir. La présence des sérotypes pathogènes V. cholerae O1 et O139 dans les approvisionnements en eau de boisson est un problème d'importance majeure pour la santé publique et elle peut avoir des conséquences économiques dans les communautés affectées. Vibrio cholerae est très sensible aux procédés de désinfection. Pendant la distribution. Vibrio cholerae O1 et non O1 ont été détectés en l'absence d'E. coli dans l'eau de boisson.

Yersinia : Le genre Yersinia est classé dans la famille des Enterobacteriaceae et comprend sept espèces. Les Yersinia spp. sont des bacilles à Gram négatif qui sont mobiles à 25 °C mais pas à 37 °C. Bien que la plupart des Yersinia spp. détectés dans l'eau soient

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probablement non pathogènes, des données indiquent que, dans certaines circonstances, la transmission de Y. enterocolitica et de Y. pseudotuberculosis à l'homme peut se produire à partir d'eau de boisson non traitée. Les déchets humains ou animaux sont la source la plus vraisemblable de Yersinia spp. pathogènes.

IV. METHODES DIAGNOSTIQUES POUR L'ANALYSE BACTERIOLOGIQUE DE L'EAU

L'analyse bactériologique proprement dite se pratique selon deux types de méthodes : les méthodes de dénombrement direct par comptage de colonies isolées après ensemencement sur ou dans un support nutritif solide et les méthodes de dénombrement indirect, par calcul statistique après répartition de l'inoculum dans un milieu de culture liquide. Quel que soit le type de méthodes employé, le résultat de la numération n'est toujours qu'une approximation du nombre réel de germes présents dans l'échantillon analysé. De nombreuses causes d'erreur peuvent en effet influer sur le résultat, par exemple l'homogénéisation, la réalisation des suspensions mères et des dilutions, la qualification du manipulateur. De plus, la précision des techniques bactériologiques est faible : elles donnent une valeur qui se range à l'intérieur d'un intervalle de confiance plus ou moins large. Pour pallier cette incertitude et pour tenir compte de la sensibilité variable du consommateur, les normes bactériologiques imposées sont telles que la limite de sécurité n'est pas dépassée même si le nombre de germes trouvé est sous-estime par rapport à la valeur réelle. (Méthodes usuelles d'analyse bacteriologique pour le contrôle sanitaire courant des eaux de mer et des coquillages, s. d.)

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L'inoculum est réparti dans un certain nombre de tubes contenant un milieu de culture liquide. La présence de la bactérie ou du groupe de bactéries recherchées se manifeste par une réaction caractéristique. Un tube est considéré comme étant positif lorsqu'il est le siège de cette réaction caractéristique. On postule alors qu'il contenait à l'origine au moins un germe recherché. Une évaluation quantitative n'est possible qu'en jouant sur les volumes de la prise d'essai et en prenant comme hypothèse que les germes sont repartis de façon homogène dans l'inoculum : si l'ensemencement porte par exemple sur 10,1 et 0,1 ml d'inoculum dans trois tubes de milieu liquide, et si le germe recherche est présent seulement dans le premier de ces tubes, il y a au moins un germe dans 10 ml d'inoculum, mais il n'y en a pas dans 1 ou 0,1 ml. Si l'unité de volume d'expression du résultat est de 100 ml, il s'ensuit que le nombre de germes est compris entre 10 et 100 dans 100 ml d'inoculum. Afin d'affiner le dénombrement, plusieurs tubes par serie sont ensemencés avec le même inoculum. Pour couvrir une gamme assez étendue de numérations, susceptibles de convenir à la plupart des besoins en hygiène conchylicole on est parfois amené à faire varier les volumes ensemencés par tube, le nombre de series et l'échelonnement des dilutions décimales. D'ordinaire on répète l'ensemencement du même inoculum dans 3~4 ou 5 tubes d'une même serie.et on utilise trois séries dans lesquels les inoculums sont respectivement de 10 ml, 1 ml et 0,1 ml.

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CHAPITRE III : METHODOLOGIE

Il s'agit d'une étude non expérimentale, descriptive type transversale car, elle met au centre de sa réalisation une évaluation qui aura fonction de présenter le contenu réel en terme de germes présents dans les eaux de la localité, en comparaison à une base légale spécifique (les normes sur la qualité de l'eau de boisson) pour la mesure de la performance des résultats qui, permettront dans ce cas d'établir ou pas la potabilité d'un plan de vue bactériologique des eaux consommées par les populations de Ngoa-Ekélé.

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3.1 Technique d'échantillonnage ou de recrutement / Nombre de participants requis ou souhaités

La technique d'échantillonnage utilisée pour cette étude est probabiliste de convenance. Nous avons pris les variables qui ont constituées nos participantes tel qu'ils se sont présentés à nous et tel que la répartition géographique nous aura permis. La taille de l'échantillon a été calculée par la formule de Lorenz : N= P.Q.Zà² / d² avec P : présence supposée= 67% ; Q=1-P : degré de précision=5% ;Zà : niveau de précision désirée=1,96 ; d : précision acceptable 5% . Selon la Banque Africaine de Développement, l'utilisation de l'eau de la camerounaise des eaux par la population au Cameroun est de 33 %, il reste 67 % de la population qui utiliseraient sources, forages, pompes et puits afin de combler leurs besoins en eau. Ce qui nous donne le nombre de participants de notre population d'étude établi à 53 individus de la localité.

3.2 Critères de sélection des participants

? Critères d'inclusion : sont à considérer pour cette étude les éléments suivants, les points d'eau (sources, forages, pompes et puits) de la localité où les populations viennent s'abreuver, tout individu de ladite localité faisant valoir de façon volontaire, son approbation à participer à notre étude.

? Critères d'exclusion : sont exclus de cette étude, les points d'eau dont l'accès est refusé au grand public, toute personne vivant dans la localité mais qui ne consomme pas les eaux de la localité, toute personne d'âge inférieure à 18ans, toute personne faisant valoir son droit de retrait de participation à notre étude qu'importe le moment avant divulgation des résultats et toute personne dont on aurait eu à perdre ses données.

3.3 Modalités de recrutement

Pour cette étude, nous effectuons des descentes en journée au niveau des points d'eau d'intérêt de la localité et nous soumettions le questionnaire à tout individu inclut précédemment qui sera présent lors de notre échantillonnage sur les sites et tout individu de la localité rencontré dans leur domicile pendant nos descentes sur le terrain. Au final nous avons obtenus 53 questionnaires remplis par 53 participants de la localité.

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Matériel : Solution hydro alcoolique, récipient d'eau, marqueur, papier, stylo, glacière contenant des glaçons

Après s'être nettoyé les mains, le récipient est tenu de telle sorte que l'eau de source puisse s'écouler dans ce dernier jusqu'à ce qu'il soit rempli. Par la suite, ce récipient est fermé hermétiquement et étiqueté pour être rangé dans une glacière. La figure ci-après représente notre premier point d'échantillonnage de la localité.

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Matériel : savon, solution de décontamination, une éponge, récipient d'eau, marqueur, papier, stylo, glacière contenant des glaçons

Après avoir décontaminé le saut qui sert à recueillir l'eau au niveau du site ainsi que nos mains, l'eau est recueillie dans le puits à l'aide de ce saut et par la suite, elle est transvasée dans notre récipient que nous fermions hermétiquement. Pour clore, l'étiquetage de l'échantillon est effectué et il est rangé dans la glacière. Les figures ci-après représentent nos points d'échantillonnage complémentaires à la source.

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a. PRESENTATION DU MATERIEL ET CONSOMMABLES, DES REACTIFS ET DES EQUIPEMENTS UTLISÉS POUR L'ANALYSE

Pour l'analyse de nos échantillons, nous avons eu recours à l'usage du matériel, consommables, réactifs et équipements consignés dans ce tableau.

Tableau 4 : Présentation du matériel, consommables, réactifs et équipements pour

Matériel et consommables	Réactifs	Équipements
Stylo	Eau distillée	Distillateur
Papier format	Milieux EMB, BEA, Eau	Autoclave
Marqueur permanant	peptonnée, Sélénite,	Incubateur
Burette graduée	Hektoen, Kliger	Réfrigérateur
Ballon à fond plat	Violet de gentiane	Balance
Boites de pétri	Lugol	Vacupum
Tube en verre de culture	Alcool-acétone	Microscope
Membranes filtrantes	Fuschine	Ordinateur
Échantillon d'eau	Huile à immersion	Minuteur
Pince	Disques d'oxydase
Bec bunsen	Péroxyde d'hydrogène
Gaz	Galérie miniaturisée API 20^E
Anse	Huile de paraffine
Pipette pasteur	Chlorure ferrique
Lame porte-objet	VP1-VP2
Papier absorbant	Réactif de KOVACK'S
Tubes à hémolyse	Solution de décontamination
Conteneurs de déchets

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C'est la technique de concentration la plus utilisée au laboratoire pour ce qui est de l'analyse des eaux. Le plus généralement, on procède à une filtration sur membranes en esters de cellulose, de porosité 0,22 ìm ou 0,45 ìm, susceptibles de retenir les bactéries. Après filtration de l'eau à étudier, la membrane est déposée sur un milieu gélosé approprié. Ceci permet aux colonies de coliformes de se développer préférentiellement au cours d'une incubation de 18 à 24 heures, et sous un aspect suffisamment caractéristique pour autoriser un diagnostic présomptif. Celui-ci peut d'ailleurs être confirmé par des repiquages judicieux. Son domaine d'application privilégiée est les eaux claires ne contenant pas de matières en suspension susceptibles de colmater : eaux d'alimentation, de surface et de baignade claires. (L'analyse de l'eau - 10e éd. - Jean Rodier,Bernard Legube,Nicole Merlet, s. d.)

Le dispositif dans son ensemble comporte les éléments suivants : Un entonnoir-réservoir cylindrique ou conique, en acier inoxydable ou plastique à usage unique, de taille variable généralement de 50 à 500 mL, gradué. Ce réservoir est destiné à être appliqué exactement sur la surface plane, cylindrique, du support métallique lui servant de base. Un support métallique formant une sorte de cuvette conique dont le bord supérieur reçoit une plaque poreuse (généralement de 50 mm de diamètre) destinée à supporter une membrane filtrante de même diamètre. La partie inférieure de la cuvette est prolongée par un tube creux, muni d'un robinet, permettant le passage d'une aspiration par trompe à vide et l'évacuation du liquide filtré. Un dispositif d'assemblage des deux pièces précédentes, variable selon le modèle d'appareil (collier de serrage, pince amovible, clip, etc.) permet de solidariser réservoir et support et d'assurer l'étanchéité, en évitant toute fuite du liquide contenu dans le réservoir. Un matériel de liaison supportant l'ensemble de cet appareil de filtration et le reliant à un dispositif d'obtention du vide. Dans sa version la plus simple, représentée sur le schéma, il consiste en une fiole à vide en verre, de capacité suffisante pour éviter des vidanges trop fréquentes de l'eau filtrée (5 litres par exemple), reliée à une trompe à eau ou une pompe à vide par l'intermédiaire d'un flacon de garde, muni d'un manomètre. Dans des dispositifs plus complexes, la fiole à vide est remplacée par une rampe supportant plusieurs appareils de filtration. La face supérieure du support métallique et la plaque poreuse au contact avec la

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face supérieure de la membrane sont généralement stérilisées à la flamme. Le réservoir peut être stérilisé de la même façon. Directement au contact des eaux analysées, son flambage doit être particulièrement soigné ; le refroidissement est alors relativement long, d'où l'avantage des entonnoirs à usage unique. Les membranes filtrantes utilisées sont généralement constituées par des esters de cellulose ; le diamètre des pores est généralement de 0,45 ìm (parfois de 0,22 ìm). Un quadrillage en surface facilite les dénombrements bactériens.

Flamber la face supérieure (plaque poreuse) de l'appareil. Fermer le robinet du support et mettre en marche la pompe à vide. Prélever une membrane stérile en la saisissant par son bord extérieur, avec une pince flambée et refroidie ; la déposer sur la plaque poreuse. L'entonnoir-réservoir flambé et refroidi est placé au-dessus de la membrane. Installer le dispositif de fixation (dans certains modèles d'appareils, ce dispositif, toujours prévu, est inutile, l'adhérence du réservoir sur la membrane étant suffisante). Agiter soigneusement le flacon d'eau à analyser et verser l'eau, stérilement, dans le réservoir jusqu'au repère (50 ou 100 mL selon l'appareil et selon le type d'analyse pratiquée). Ouvrir le robinet du support suffisamment pour laisser l'eau s'écouler lentement sous l'action du vide. Si le contenu du réservoir correspond à la prise d'essai nécessaire, rincer avec de l'eau stérile (40 à 50 mL) dès la filtration terminée. Sinon, fermer le robinet à ce moment-là, remplir à nouveau le réservoir avec de l'eau à analyser, et rincer lorsque tout l'échantillon a été filtré. Dès que la membrane paraît sèche, fermer le robinet, enlever le dispositif de fixation et, avec la pince à creuset, le réservoir. Prélever la membrane avec une pince flambée en la saisissant par son extrême bord, et l'introduire sur le milieu de culture choisi ou lui faire subir le traitement selon la méthode utilisée parmi celles qui seront décrites ultérieurement. Lorsque le volume d'échantillon à filtrer est important, et que la teneur en matières en suspension n'est pas négligeable, la membrane peut être colmatée avant l'utilisation complète de la prise d'essai nécessaire à analyser. Plusieurs membranes devront donc être successivement utilisées. Remarques - Un matériel permettant de filtrer au lieu même de prélèvement l'échantillon à étudier est commercialisé. La membrane peut alors être placée sur un milieu de transport et transférée après retour au laboratoire sur un second milieu constituant le milieu d'inoculation définitif. - La membrane peut également être immédiatement placée sur le milieu définitif et aussitôt incubée dans les conditions particulières pour sélectionner les catégories de germes que l'on veut étudier. Utiliser pour cela, des incubateurs pouvant fonctionner dans un véhicule.

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La membrane après la filtration peut être déposée sur la surface d'une gélose. Les bactéries retenues à la surface sont nourries à travers la membrane par les pores de celle-ci. Dans le cas des eaux d'alimentation ou des eaux de surface de bonne qualité, il n'y a généralement aucune difficulté à filtrer 100 mL. La sensibilité est donc, dans ce cas, 100 fois supérieure à celle obtenue normalement par incorporation en gélose, 20 fois à celle-ci lorsque l'inoculum peut exceptionnellement être porté à 5 mL. Pour de telles eaux, des volumes plus importants peuvent souvent être filtrés. Les avantages de cette méthode sont : absence de choc thermique, différenciation plus aisée des colonies, possibilité de repiquage. En outre, la filtration permet de séparer les bactéries du milieu analysé, donc des éventuels inhibiteurs contenus dans ce milieu. Néanmoins, il n'est pas possible, sur la surface des membranes (généralement de 50 mm de diamètre), de dénombrer valablement plus de 80 à 100 colonies car, au-delà, les phénomènes de confluence et surtout de compétitions sont considérés comme importants. Il convient donc dans ce cas d'effectuer des dilutions. De plus, la présence abondante de matières insolubles dans l'échantillon filtré (fin dépôt minéral, plancton, etc.) peut colmater les pores, faire obstacle au passage des nutriments et donner ainsi des résultats erronés par défaut. Le support utilisé pour la membrane peut être soit une gélose pour isolement, le plus souvent sélective en vue de la mise en évidence de germes ou de groupes de germes déterminés ; soit un tampon absorbant imprégné de solution nutritive. Le dépôt de la membrane sur la gélose ou le tampon absorbant doit être fait avec le plus grand soin, sans permettre à des bulles d'air de séparer en quelque point que ce soit la membrane de son support. Pour cela, saisir la membrane par une pince à son extrême bord, la mettre en contact par l'extrémité opposée avec le support nutritif ; puis la dérouler, en quelque sorte, sur celui-ci, ce qui assure progressivement le contact. L'expression des résultats se fait sous forme d'un nombre d'unités formant colonies (UFC).

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c. ALGORITHMES DE RECHERCHE DES COLIFORMES, DES ENTEROCOQUES ET DES SALMONELLES

Mise en culture de la
membrane filtre de
notre échantillon dans
milieu EMB à 37°C
pour 24h

Réalisation test de
catalase et test
d'oxydase, obtention
catalase+ et oxydase-

Mise en culture de la
membrane filtre de
notre échantillon
dans le milieu BEA à
37°C pendant 24h

En cas de croissance,
on note le virage du
milieu au noir et le
Gram présente des
cocci Gram+ en
chenette

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Mise en culture de la
membrane filtre de notre
échantillon dans le milieu
eau peptonnée pour le
préanrichissement à 37°C
pendant 24h

Mise en cuture du
bouillon d'enrichissement
dans le milieu Hektoen
par la méthode des
quadrans, isolement de
colonies à 37°C après
24h

Identification des
salmonelles par mise en
culture de l'inoculum à
l'aide du milieu Kliger à
37°C pour 24h

Lorsque les échantillons parviennent au laboratoire, la prise du pH, la description de la couleur et de la turbidité sont réalisées. Par la suite, la filtration des échantillons (eaux) est réalisée grâce au dispositif de pompe prévu à cet effet. Chaque échantillon est filtré individuellement selon les proportions indiquées en fonction du germe qu'on souhaite isolé dans un milieu. Ainsi, 100ml d'eau sont filtrés autour de la flamme en ayant au préalable aseptisé tous les entonnoirs à la flamme et la membrane filtrante est déposée dans le milieu EMB pour le dénombrement des coliformes en particulier Escherichia coui. Il en est de même pour la membrane suivante qui est mise dans le milieu BEA pour le dénombrement des entérocoques. Les boites sont étiquetées et mise à l'étuve à 37 °C pour 24h. Puis, 1000ml d'eau sont filtrés pour la recherche des salmonelles et la membrane est introduite à l'aide de la pince dans un tube pour culture contenant de l'eau peptonnée. Le tube est mis à l'étude à 37°C pour 24h. La figure ci-après présente le dispositif de filtration employée pour nos échantillons dans l'environnement de travail.

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Figure 10 : Dispositif de filtration de l'eau dans l'environnement d'analyse

Les milieux de culture sont sortis de l'étuve après 24h d'incubation. La description des colonies avec dénombrement par UFC pour 100ml est réalisée pour chaque milieu de chaque échantillon filtré et renseignée sur la fiche de paillasse. Sur EMB, les colonies sont roses d'aspect visqueux, de taille égale à 5um et d'autres sont rouges de plus petite taille en fonction de chaque échantillon. Sur BEA, les colonies sont de très petite taille, d'aspect noir et transparente pour certaine en fonction de l'échantillon d'eau filtré. Dans le tube de culture, l'on observe le milieu qui est devenu trouble tirant vers le blanc pour certains échantillons. De ce bouillon, 1ml est prélevé et introduit dans un tube de culture contenant du milieu sélénite et remis à l'étuve pour 24h à 37°C. Les figures ci-après présentent les aspects de ces différentes croissances en fonction des milieux.

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Par la suite, des frottis sont réalisés sur lame porte-objet à l'aide de colonies isolées prises individuellement sur dans chaque milieu, additionnées à de l'eau distillée stérile. Ces frottis sont colorés au Gram. La lecture microscopique est effectuée après séchage des lames. Les lames des colonies roses et rouges sur EMB présentes des bacilles Gram-, celle des colonies noires et transparentes prises sur BEA présentes des cocci à Gram+. Les figures ci-après illustrent les lames suite à la coloration de Gram.

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En continuité, des tests de catalase et d'oxydase sont réalisés pour une colonie isolée de chaque échantillon pour chacun des milieux utilisés. Les bactéries possédant une chaîne respiratoire complète sont dotées d'un cytochrome oxydase. La mise en évidence de cette oxydase est effectuée en présence d'une solution aqueuse à 1% de chlorhydrate de diméthylparaphénylène diamine qui forme un complexe violet au contact de cette enzyme. Les colonies sont prélevées à l'aide d'une pipette Pasteur. Placer un disque d'oxydase sur une lame propre et stérile. À l'aide d'une pipette Pasteur (il est strictement interdit d'utilisé l'anse de platine pour ne pas fausser le résultat) une goutte de suspension bactérienne pure est déposée sur " un disque oxydase", celui-ci contient de l'oxalate de diméthyl paraphénylène diamine. Les bactéries oxydase-positives donnent rapidement une coloration violette foncée ; dans le cas contraire, il n'y a pas de coloration.

Certaines bactéries ont la faculté de dégrader le peroxyde d'hydrogène (H2O2). En présence d'une bactérie productrice de catalase, on observe à partir d'H2O2 une libération d'oxygène gazeux selon la réaction : H2O2 donne H2O + 1/2O. La méthode consiste à prélever une colonie du germe à étudier (ex. les staphylocoques pour les Gram + et les entérobactéries pour les Gram -) sur l'extrémité d'une anse de platine que l'on plonge ensuite dans une goutte d'eau oxygénée (à l'aide d'une pipette Pasteur). Le dégagement de bulles gazeuses signe la présence de l'enzyme.(Denis et al., 2012)

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Les tests de catalase effectués sur les colonies roses et rouges sur EMB sont tous positifs et ceux d'oxydase négatifs. Les tests de catalase effectués sur les colonies noires et transparentes de BEA sont tous négatifs et oxydase positifs. Les figures suivantes illustrent des résultats de catalase et d'oxydase de certains échantillons.

Pour clore cette journée, des suspensions bactériennes sont réalisées à l'aide de l'eau distillée stérile et de colonie isolée prise individuellement dans chaque milieu EMB de chaque échantillon à l'aide d'une anse, autour de la flamme. Suivant le principe d'utilisation de la mini galerie APÏ 20^E, après l'avoir étiqueté, la suspension est prélevée à l'aide d'une micropipette et mise dans les 20 puits constituant la mini galerie de façon à remplir jusqu'au bas inférieur de l'orifice d'ouverture, les puits des caractères biochimiques ONPG, TDA, IND, GLU, MAN, INO, SOR, RHA, SAC, MEL, AMY et ARA uniquement à l'aide de cette suspension sans bulle d'air. De façon à remplir totalement l'orifice des puits des caractères biochimiques CIT, VP, et GEL uniquement à l'aide de la suspension. De façon à remplir jusqu'au bas inférieur de l'orifice d'ouverture des puits des caractères biochimiques ADH, LDC, ODC, H2S et URE à l'aide de cette suspension à laquelle on rajoutera de l'huile de paraffine jusqu'au niveau du haut supérieur de l'orifice d'ouverture de ces puits afin de créer l'anaérobiose. Les galeries sont ainsi constituées pour chaque colonie sur EMB de chaque échantillon et mises à l'incubateur à 37°C pour 24h. La figure ci-après illustre la mini galerie remplie avant son incubation.

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Les milieux en tube incubés sont sortis après 24h et à l'aide d'une anse, des ensemencements par la technique des cadrans sont réalisés dans des géloses Hektoen pour chaque échantillon à l'aide des bouillons sélénite obtenus. Ces géloses sont étiquetées et mises à l'incubateur pour 24h à 37°C. Les mini galeries sont sorties également après 24h et la lecture est lancée. Pour chaque galerie, une lecture avant révélation est réalisée et au moins trois caractères se doivent d'être positifs pour que la révélation puisse être effectuée, sinon ré-incubation de la galerie à 37°C pour 24h. La révélation est faite pour les caractères biochimiques TDA, IND et VP respectivement à l'aide des réactifs suivants : chlorure ferrique, VP1-VP2 et réactif de Kovack's. La réaction dure 10min pour la TDA, 5min pour IND et VP puis, puis la lecture est réalisée. Cette lecture est basée sur le virement de couleur ou pas observable au niveau du puits de chaque caractère. Les résultats de lecture sont exprimés en positif ou négatif pour chaque caractère, et consignés dans le calepin du kit API 20^E puis, présentés au final après séparation des caractères en groupe de 3 et 2, en un des groupes de chiffre qui constitue le nombre qui permet d'identifier spécifiquement le germe isolé lors de la culture. Cette identification a été réalisé à l'aide du logiciel APIDENT version 2.0 sur un ordinateur de marque DELL. Certaines souches n'ont pas été identifiables. Les figures ci-après illustrent l'aspect des milieux sélénites après incubation, une galerie après incubation et un résultat d'identification fournie par le logiciel APIDENT.

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Figure 18 : Aspect de quelques milieux Sélénite après incubation durant 24h à 37°C

Figure 19 : Aspect d'une micro gallérie API 20E après incubation durant 24h à 37°C

Figure 20 : Résultat d'identification des entérobactéries avec le logiciel APIDENT

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Les géloses Hektoen sont sorties après 24h et des suspensions sont de nouveau réalisées à l'aide des colonies isolées sur ce milieu pour chaque échantillon. Par le suite à l'aide de suspension des différentes colonies isolées sur Hektoen en fonction des échantillons, des ensemencements sont réalisés sur milieu Kliger, milieu solide coulé en pente pour l'identification des germes en partant du suppositoire qu'il s'agisse des salmonelles. À l'aide d'une anse, la suspension d'un échantillon unique est prélevée et une piqure centrale dans le culot de la pente est réalisée puis, au niveau de la pente, des stries longitudinales sont effectuées en sortant du tube. Les tubes sont étiquetés, fermés de moitié et mis à l'incubateur pour 24h à 37°C. Les figures ci - après illustrent le milieu Kliger après ensemencement et l'aspect des colonies sur milieu Hektoen après 24h d'incubation à 37°C.

Les milieux sont sortis après 24h et la description de chacun est effectuée et consignée dans la fiche de paillasse. Principe de la production d'H2S, la mise en évidence de la production d'H2S se fait grâce à la présence de thiosulfate de sodium et de citrate ferrique (fer III). En effet, chez une souche dite H2S +: Le thiosulfate est réduit en anaérobiose en H2S. L'H2S ainsi formé se combine au citrate de fer présent pour former un précipité de sulfure de fer noir. Principe de la lecture de la fermentation des glucides, le milieu de Kligler

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contient 2 glucides: glucose et lactose (10 fois plus de lactose que de glucose). Les entérobactéries utilisent d'abord le glucose et ensuite, éventuellement le lactose. La production de gaz se traduit par l'apparition de bulles au niveau du culot, ou encore par la formation d'une poche qui décolle complètement le milieu du fond du tube. (Denis et al., 2012)

La production de gaz est visible de par la fragmentation de la gélose initialement stable en un bloc lors de l'ensemencement. Certains culots de pente sont à présents jaunes, c'est la marque de l'utilisation du glucose par les bactéries tandis que d'autres reste oranges. Certaines pentes prennent la couleur jaune qui marque l'utilisation du lactose par les bactéries pendant que d'autres demeurent de couleur orange. Aucune production de H2S n'a été observable pour les échantillons testés, du fait de l'absence de points noirs dans le milieu. L'identification des germes isolés pour tous les échantillons testés n'aura permis de détecter des salmonelles dans les échantillons. Les figues ci-après illustrent les milieux Kliger après incubation lorsqu'il y'a utilisation de lactose et glucose par la bactérie.

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Lors de la préparation des milieux de culture employés pour les analyses, les milieux autoclavables ont bien été autoclavés et leurs coulages se sont faits dans les boites de pétri et dans les tubes de culture autour de la flamme. Suite aux préparations des milieux, des tests de stérilité, de fertilité et de spécificité ont été réalisés pour chaque milieu avant utilisation et leur conservation s'est faite entre 2 et 8°C au réfrigérateur pendant deux semaines.

Lors du processus d'analyse, toutes les manipulations effectuées ces jours ont été effectuées dans le respect des principes d'asepsie indiqués pour ces dernières, ce sont : la décontamination de la surface de travail avant et après chaque manipulation, la stérilisation avant passage de chaque échantillon des accessoires du Vacupum pour la filtration et la réalisation de celle-ci autour de la flamme, la stérilisation des tubes où ont été réalisées les suspensions, le travail permanent autour de la flamme pour ne citer que ceux-là. Les algorithmes d'identification des gerles établies ont scrupuleusement été suivis.

L'analyse de nos échantillons a pris forme dès la base sur la méthode de la filtration sur membrane avec dénombrement après incorporation de la membrane en milieu solide et isolement des salmonelles après usage de la membrane filtre en milieu liquide. Cependant, cette méthode ne permet d'isoler que certains germes (coliformes, entérocoques, salmonelles) tout en excluant la possibilité d'en isoler d'autres. Il serait approprié de concilier d'autres méthodes d'analyse pour s'assurer à plus grande échelle d'isoler la quasi-totalité des germes à

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rechercher dans les eaux de boisson, ce sont : la méthode par incorporation en milieu liquide pour l'isolement des bactéries sulfito-réductrices, la méthode utilisant le NPP Pour l'isolement de Vibrio cholerae et bien d'autres.

Les difficultés rencontrées durant cette collecte ont été présentes à plusieurs niveaux, déjà au niveau de l'obtention d'autorisations administratives de collecte pour effectuer la collecte d'échantillon et pour la réalisation des enquêtes auprès des populations de la localité de Ngoa-Ékélé, puis lors de l'achat et rassemblement du matériel du fait de la rareté de

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certains produits. Aussi, quelques difficultés au départ en rapport à l'utilisation du dispositif de pompe, en rapport à l'analyse en elle-même. La plus grande difficulté s'est portée sur l'analyse statistique des résultats de nos analyses.

Comme limites de notre étude, il est à noter qu'elle offre des résultats qui ne donnent pas une connaissance globale sur la qualité bactériologique des eaux de consommation de la ville de Yaoundé et encore moins du Cameroun, du fait qu'elle ne concerne qu'une petite portion de la ville en elle-même. À cela s'ajoute le fait que la recherche, de par les ressources disponibles n'a pu rendre possible l'isolement de toutes les bactéries impliquées dans les survenues maladies d'origine hydrique qui ne cessent d'être des problèmes de santé publique et qui constituent des références qualité pour les eaux. Aussi nous n'avons pu analyser les eaux des points différents des sources et puits de la localité mentionnés dans ce travail, notamment les forages, pompes et rivières du fait qu'il a été impossible de les répertorier.

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CHAPITRE IV : RESULTATS ET DISCUSSION

1) PRÉSENTATION SOCIO-DÉMOGRAPHIQUE DE LA POPULATION ET DES POINTS D'ÉCHANTILLONAGE

L'évaluation bactériologique des eaux de consommations de la localité de Ngoa-Ékélé a nécessité une participation active de la population concernée lors d'enquêtes effectuées sur le terrain. La détermination de la taille minimale de cette population à questionner a été définie à 53partcipants. Les tableaux ci-dessous donnent une caractérisation globale de ladite population en fonction de la catégorie socio-professionnel des participants, de leur sexe et de leur l'âge.

Tableau 5 : Répartition de la population suivant la situation socio-professionnelle

Employé/ ouvrier qualifié		Compte propre		Chômeur		Étudiant(e)		Élève
7		7		2		32		5

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Ce tableau indique que la population est fortement représentée par les étudiants.

Le tableau suivant donne une répartition de cette population suivant le sexe et l'âge. Tableau 6 : Répartition de la population suivant le sexe et l'âge

		18-24	25-31	32-38	39 et plus
Sexe	Homme	21	11	3	1	36
	Femme	9	4	1	3	17
Total		30	15	4	4	53

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Ce tableau indique que notre population est dominée par le sexe masculin et se retrouve plus dans la tranche d'âge comprise entre 18-24, avec pour sens le fait qu'elle soit à la base plus estudiantine qu'autre chose.

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Pour cette étude, les points d'échantillonnage des eaux de consommation étudiés exclusivement ont été des sources et des puits. Le tableau ci-après récapitule les points d'approvisionnement les plus utilisé dans la communauté de Ngoa-Ékélé.

Tableau 7 : Sources d'approvisionnement en eau utilisées par la communauté de Ngoa-

Source	Source1	47,11%
Source	Source2	34,62%
Puits	Puit1	2,88%
	Puit2	4,81%
	Puit3	4,81%
	Puit4	3,85%
	Puit5	1,92%
Total		100,00%

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Ce tableau démontre que parmi les sept (7) points trouvés, les plus utilisés par la population sont les deux sources, ce qui est dû non seulement à l'emplacement de ces derniers mais également à la qualité de l'eau à priori définie par les consommateurs. Ces sources sont utilisées pour effectuer presque tous les activités quotidiennes (Consommation buccale, usage corporel, usage domestique).

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2) ILLUSTRATION DES FACTEURS FAVORISANT LA PRÉSENCE DE BACTÉRIES DANS LES EAUX DE NGOA-ÉKÉLÉ

L'environnement correspond à l'ensemble de tout ce qui nous entoure. Il est à noter que celui dans lequel les points d'eau étudiés se retrouvent, présente divers éléments qui, pour la plupart contribue à dégrader un tant soit peu leur qualité. Le tableau ci-après présente en gros la distribution de ces facteurs de pollution environnementaux par point d'approvisionnement en eau concerné selon les avis de la population.

Tableau 8 : Distribution de sources de pollution selon le point d'approvisionnement

Point d'eau		Sources de pollution recensées à proximité de la source d'approvisionnement

S1	Latrines		Dépotoir	Champ	Rigole	Eaux stagnantes	Points de lessive et vaisselle	Industrie
S2	Latrines		Dépotoir	Champ	Rigole	Eaux stagnantes	Points de lessive et vaisselle	industrie
P1	Latrines		Dépotoir	/	Rigole	Eaux stagnantes	/	/
P2	Latrines		dépotoir	Champ	Rigole	Eaux stagnantes	/	/
P3	Latrines		Dépotoir	Champ	/	/	/	/
P4	Latrines		Dépotoir	champ	/	/	/	/
P5	Latrines		/	/	Rigole	/	/	/

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Ce tableau indique que les points d'eau de la localité se retrouvent à proximité de diverses sources de pollution avec la plus représentée étant les latrines, car présentes de part et d'autre dans l'environnement.

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La figure ci-dessous donne une répartition en termes de pourcentage de ces facteurs de pollution environnementaux, en rapport à leur proximité vis-à-vis de l'ensemble des points d'échantillonnage.

Figure 24 : Proportion des facteurs de pollution dans la localité de Ngoa-ékélé

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Cette figure présente les latrines comme le facteur de pollution dominant dans la localité par observation flagrante de la population concernée. À cela s'ajoute les rigoles, occupant la deuxième place et en cohésion avec le 1^er, compte tenu du fait que de ces latrines fortement répandus dans la localité les voies d'évacuation employées pour la majeure sont les rigoles nécessitant des couts moindres. Ce qui vient expliquer à suffisance la parution des dépotoirs comme 3^e facteur de pollution le plus marqué de la localité.

À ces facteurs d'ordre environnemental, l'étude a permis de ressortir un autre facteur qui favorise la présence des germes isolés dans les eaux de consommation de cette localité. Ce facteur fait référence au non traitement des eaux par les populations avant usage personnel ou encore au niveau des sites d'approvisionnement eux-mêmes.

La figure suivante donne un aperçu global sur la proportion d'habitants qui traiteraient leur eau avant consommation dans la communauté de Ngoa-Ekélé.

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Figure 25 : Proportion des habitants qui traitent l'eau de manière individuelle

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Il s'avère que la grande majorité de la population ne traite pas de l'eau depuis chez eux avant usage, après approvisionnement depuis le site, faute de connaissances à propos, soit par manque financier. Néanmoins, les procédés de traitement employés par la portion de la population traitant leurs eaux, ont pu être consignées dans le tableau ci-après en ressortant le pourcentage d'utilisation de chaque procédé.

Tableau 9 ; Méthodes de traitement des eaux employées par les populations à domicile

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Il en ressort que la méthode la plus utilisée au niveau individuelle, est la chloration avec un pourcentage de réalisation de 59,1% auprès des populations qui traitent leur eau dans la localité de Ngoa-ékélé. Ceci pourrait s'expliquer de par le cout réduit et l'accessibilité facile à ce produit. Toutefois, l'usage fréquent demeure une interrogation et le respect des

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proportions une énigme. Le tableau ci-après présente la fréquence de traitement de ces eaux par les consommateurs pratiquant une méthode de traitement quelconque.

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

Ce tableau indique que la moitié de la population qui traite leurs eaux avant usage, le fait à une fréquence non déterminée, soit de manière anarchique. Ce qui ne contribue pas réellement à réduire considérablement les pathogènes présents à long terme et encore moins les affections hydriques à l'exemple des gastro-entérites. Lors de l'enquête effectuée auprès des populations, d'aucun ont mentionné l'existence d'un dispositif de filtre existant au niveau du point S1 de la source et l'absence de ce dispositif au niveau du point S2. Les utilisateurs d'eau de puits / propriétaires ont révélé qu'ils effectuent des désinfections de l'eau de leurs puits à fréquence irrégulière pour la plupart par usage du chlore. Le tableau ci -après présente ces méthodes en pourcentage de réalisation obtenu auprès des populations.

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

L'utilisation du dispositif de filtration s'applique à la source S1 et les procédés de désinfections chimiques au niveau des puits.

De tout ce qui précède, il en découle que les points utilisées seraient traités pour certains et pour d'autres pas, accusant ainsi la forte probabilité de pollution bactérienne dans

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d'autres plus que d'autres en fonction de leur proximité aux agents polluants également. Le tableau ci-dessous fait ressortir à nouveau la proportion de germes isolés par points en précisant s'ils sont traités, qu'importe à quelle fréquence ou pas.

Tableau 12 ; Germes isolés par source et selon que l'eau soit traité ou pas

							État du point d'eau
Germes recherchés		*Escherichia coui*		Entérocoques Bactéries coliformes

Source1	0/ 100ml		1/ 100ml		09/ 100ml	Eau traitée
Source2	0/ 100ml		4/ 100ml		20/ 100ml	Eau non traitée
Puit1	0/ 100ml		150/ 100ml		1000/ 100ml	Eau traitée
Puit2	0/ 100ml		300/ 100ml		200/ 100ml	Eau non traitée
Puit3	0/ 100ml		10/ 100ml		1000/ 100ml	Eau traitée
Puit4	0/ 100ml		100/ 100ml		700/ 100ml	Eau non traitée
Puit5	0/ 100ml		200/ 100ml		100/ 100ml	Eau non traitée

La source1 présente moins de germes relativement aux autres, cela peut être dû au fait que cette source soit traitée sur le long terme par le dispositif de filtration implanté, par contre la source2 n'est pas traitée selon les informations recueillies dans la communauté. Les puits quant à eux traités ou pas, présentent plus de germes en leur sein contrairement aux sources ceci pourrait s'expliquer par le fait qu'ils sont moins aménagés que les sources.

À l'ensemble de ces facteurs réunis, les répercutions les plus visibles sont à l'heure actuelle les troubles intestinaux que causent ces microorganismes invisibles à l'oeil nus et mal connus par les habitants de Ngoa-ékélé présents dans les eaux consommées par ces derniers.

3) IDENTIFICATION DES GERMES BACTÉRIENS PRÉSENTS DANS LES EAUX DE CONSOMMATION DE NGOA-ÉKÉLÉ

Après réalisation d'une série d'analyses des eaux échantillonnées auprès des points connus, les résultats bactériologiques suivants ont été obtenus et consignés dans les tableaux ci-après :

Tableau 13 : Récapitulatif des germes retrouvés dans les points d'échantillonnage des

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	Sur EMB	Sur BEA	Sur Kliger
Puits 1 (P1)	Klebsiella oxytoca	Entérocoques	Souche non identifiable
Puits 2 (P2)	Souche non identifiable	Entérocoques	Souche non identifiable
Puits 3 (P3)	Klebsiella gr.47	Entérocoques	Souche non identifiable
Puits 4 (P4)	Klebsiella penumoniae	Entérocoques	Souche non identifiable
Puits 5 (P5)	Enterobacter aerogenes	Entérocoques	Souche non identifiable
Source 1 (S1)	Klebsiella gr.47	Entérocoques	Souche non identifiable
Source 2 (S2)	Enterobacter aerogenes	Entérocoques	Souche non identifiable

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-ékélé à Yaoundé

Ce tableau indique que les genres bactériens impliqués dans la contamination des points d'eau de la localité de Ngoa-ékélé se révèlent être du genre klebsiella, du genre Enterobacter et du genre Enterococus. À l'exemple des entérocoques (streptocoques fécaux) retrouvés dans ces points d'eau, leur présence pourrait s'expliquer par la présence et la proximité à chaque point d'eau, de points de pollution tels que les latrines dans l'environnement. Notons qu'ils sont des marqueurs de contamination d'origine fécale de même que Escherichia coli non répertorié ici. Ce qui permet de comprendre à suffisance pourquoi les entérocoques sont présents pour chaque point d'eau testé. Pour ce qui est des coliformes, le genre Klebsiella est présent spécifiquement au niveau des points P1, P3, P4 et S1 et le genre Entérobacter présent spécifiquement au niveau des points P5 et S2 vu qu'étant des entérobactéries, ils ont pu se retrouver via les excréments libérés dans les latrines à proximité des points d'eau. Il est important de faire mention que ces genres appartiennent au même groupe d'entérobactéries avec des similitudes à l'exception prêt que Klebsiella est immobile et Enterobacter mobile.

À cela il a été défini une répartition du dénombrement bactérien qui a été effectué en comparaison aux normes établies concernant la qualité d'une eau de consommation. Ce dénombrement a été consigné dans le tableau ci-après :

Tableau 14 : Récapitulatif du dénombrement bactérien des eaux de la localité de Ngoa-

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Germes recherchés		Escherichia coli Entérocoques Bactéries coliformes

Normes	0 / 100ml		0/ 100ml	0/ 100ml
S1	0/ 100ml		1/ 100ml	09/ 100ml
S2	0/ 100ml		4/ 100ml	20/ 100ml
P1	0/ 100ml		150/ 100ml	1000/ 100ml
P2	0/ 100ml		300/ 100ml	200/ 100ml
P3	0/ 100ml		10/ 100ml	1000/ 100ml
P4	0/ 100ml		100/ 100ml	700/ 100ml
P5	0/ 100ml		200/ 100ml	100/ 100ml

Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-ékélé à Yaoundé

Il s'avère que les eaux de la localité ne respectent pas les limites et références établies quant à la qualité d'une eau de consommation selon l'OMS ou encore selon le Syndicat des eaux de la Faye, ce qui les rendent impropres à la consommation humaine avec pour impératifs que des procédés de traitement soient appliqués afin d'éradiquer de tels germes.

4) DÉTERMINATION DES PATHOLOGIES CAUSÉES PAR LES GERMES PRÉSENTS DANS LES AUX DE NGOA-ÉKÉLÉ SUR LA POPULATION

D'après l'étude réalisée dans la communauté de Ngoa-Ekele, un certain nombre de maladies a été relevé chez les individus enquêtés, la figure ci- après permet d'illustrer ces dernières.

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Source : Enquête sur l'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-ékélé à Yaoundé

Cette figure indique que les plaintes d'affections présentes chez la population s'articulent autour de : la Fièvre typhoïde et paratyphoïde, les Gastro-entérites, la Dysenterie. Ces maladies-là occupent une très grande proportion parmi les maladies dont seraient victimes les individus de la localité. Ceci pourrait s'expliquer par le fait que, les populations en consommant des eaux contenant des coliformes et entérocoques sans traitement approprié avant usage seraient en contact direct avec les agents pathogènes induisant de ce fait des maladies spécifiques à la consommation d'une eau non potable présentées ci-dessus. Notons qu'idéalement une recherche de ces bactéries pour chaque individu serait plus conséquente dans l'interprétation de ces résultats, néanmoins l'étude aura tenu compte des apports de nos participants à avis cohérents. Coliformes induisant des gastroentérites, infections de la peau et dysenterie bacillaire et Entérocoques induisant des gastroentérites. Puis fièvre typhoïde et paratyphoïde faisant suite à la présence des Salmonelles dans ces eaux à une époque / moment remontant avant notre étude sur le terrain.

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Pour étudier la liaison existant entre les facteurs de pollution et les germes isolés, il nous suffit d'étudier la liaison qu'il existe entre les germes isolés et le type de source d'approvisionnement puisque la qualité d'eau d'un point d'approvisionnement dépend de ces derniers.

H0 : La présence de pathogènes est conséquente du type de source d'approvisionnement

H1 : La présence de pathogènes ne dépende pas du type de source d'approvisionnement.

nij: effectif observé de la j^ème germe (en unité par millilitres) du i^ème source d'approvisionnement

mij: effectif théorique de la j^ème germe (en unité par millilitres) du i^ème source d'approvisionnement.

Z suit la loi de khi-deux à á=5% (niveau de confiance 95%) et à 5 degré de liberté

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S1 ou S2	5	29	34
P1	150	1000	1150
P2	300	200	500
P3	10	1000	1010
P4	100	700	800
P5	200	100	300
Total	765	3029	3794

Source (1 ou 2)	26010	102986
Puit1	879750	3483350
Puit2	382500	1514500
Puit3	772650	3059290
Puit4	612000	2423200
Puit5	229500	908700

Alors avec un risque de 5% de se tromper, on accepte l'hypothèse qu'il y a une liaison entre les germes isolés et le type de source, et par conséquence, il y a une forte liaison entre les germes retrouvés au niveau de chaque point d'échantillonnage et les facteurs de pollution qui les avoisinent.

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À la suite de tout ce qui précède, il est à noter que la caractérisation de notre population a permis de relever la prédominance des étudiants avec la tranche d'âge la plus représentée étant celle de 18 à 24ans , ceci pourrait s'expliquer par le fait qu'à la base cette localité est réputée pour sa population étudiante plus que tout autre chose compte tenue de la présence des plusieurs institutions universitaires dans les environs avec les âges royalement représentés avoisinant 18 à 24ans pour ce qui est des étudiants. Cette caractérisation aura également permis de relayer la prédominance du sexe masculin dans notre population, ce qui s'expliquerait par la poursuite habituelle des grandes études par les individus masculins que ceux du sexe féminin. Par ailleurs, la caractérisation de points d'eau de la localité, points d'échantillonnage pour la réalisation de notre évaluation bactériologique aura permis de faire mention du fait que, les points les plus utilisés dans cette localité seraient les sources pour usage diverses suivis des puits. Le sens de cette utilisation viendrait de la facilité d'accès aux sources et la mise à disponibilité en tout temps, toute heure sans forme de restriction pour n'importe quel individu. Aussi, elle viendrait du fait que le plus grand nombre des consommateurs décèlent en ces eaux de sources « natures » plus de potabilité que les eaux provenant des puits.

Par la suite de nombreux facteurs pouvant justifier l'existence du profil établit précédemment ont pu transparaitre notamment, de la présence des latrines, rigoles, dépotoirs, champs, eaux stagnantes etc... à proximité des points d'eau disponibles au sein de la localité. Notons que le facteur à prédominance dans le volet environnemental est la présence des latrines avec un pourcentage de répartition dans la localité défini à 26%, suivit de la présence des rigoles avec 24% ou les excréments de ces latrines sont déversés pour la grande majorité. Cette survenue à prédominance des latrines prend tout son sens en comparaison à l'étude de (Mpakam et al., s. d.) portant sur l'étude des facteurs de pollution des ressources en eau en milieu urbain : cas de Bafoussam (Ouest-Cameroun) qui permet de soutendre l'idée selon laquelle, la contamination est influencée par le degré d'aménagement et la distance qui les sépare des latrines et en gros, la distance séparant les points de pollution présents dans un environnement de même que les points d'eau. À ces facteurs environnementaux, l'étude aura permis de relayer le soucis du non traitement des eaux par les populations avant usage, que ce soit depuis le site ou individuellement, ceci compte tenu du fait que 62% de la population ne traite pas leur eau. Cet élément transparait ici comme un potentiel facteur justifiant / pouvant permettre d'expliquer l'existence et le maintien d'un tel profil. Notons que parmi les 38% de la population traitant leur eau dans la population, la moitié effectue ce traitement à des fréquences non déterminables voir discontinues réduisant de ce fait les effets souhaités quant

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à l'usage du traitement des eaux. Ceci pourrait s'expliquer par faute de connaissances ou de moyens financiers des habitants de cette localité qui sont pour la majorité de simples étudiants à revenus pratiquement inexistants.

Les analyses en laboratoire ont permis de déterminer le profil bactériologique des eaux de consommation de cette localité, avec la présence des coliformes et entérocoques dans 100ml d'eau filtré pour chaque échantillon, avec leurs présences justifiées par le fait qu'il s'agisse de germes de contamination fécale qui, découleraient probablement de la présence des facteurs de pollution énumérés plus haut à l'instar des latrines. Il est à noter que les genres bactériens isolés dans ces eaux pour ce qui est des coliformes sont : le genre klebiella avec 67% et le genre Enterobacter avec 33% de représentation lors des isolements et identifications réalisées. Concernant les entérocoques, répartition après isolement à 100% car présents dans chaque échantillon testé. De par les résultats obtenus après les analyses effectuées sur les eaux il ressort que les paramètres bactériologiques recherchés durant cette étude présentent une non-conformité relative aux valeurs indicatives des normes de potabilité établies par le syndicat des eaux de la Faye et des normes internationales de l'OMS. Ces résultats des analyses bactériologiques ont montré que les eaux de puits étaient toutes contaminées par la plupart des germes recherchés, de même que l'a démontré (Soncy et al., 2015) dans l'évaluation de la qualité bactériologique des eaux de puits et forage à Lomé, Togo. Elles sont fortement contaminées par les germes de contamination fécale. La contamination des eaux de la localité, suite à un dénombrement sur filtration membranaire a induit 100% de non-conformité soit aucun point ne présentant des valeurs en dessous de celles fixées par les critères d'évaluation permettant de statuer sur la potabilité d'une eau de consommation.

À la suite de ce profil bactériologique établi pour ce qui est des eaux de consommations de la localité de Ngoa-ékélé puis des facteurs justifiant ce profil qui ont pu être ressortis, relayons que la survenue de maladies hydriques sur la population s'est faite marquée lors de nos enquêtes suites aux informations et peintes des participants consommateurs avec comme indications générales que la fièvre typhoïde et paratyphoïde sévit à 48,39% dans la population, les gastro-entérites et la dysenterie à part égale, soit 22,58% chacune , et les infections de la peau à 6,45%.

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POPULATIONS DE NGOA-ÉKÉLÉ À YAOUNDÉ

CONCLUSION GENERALE

Parvenus au terme de ce travail ayant porté sur « l'évaluation bactériologique des eaux de consommation de la localité de Ngoa-ékélé à Yaoundé » avec pour objectif principal de contribuer à la réduction des maladies hydriques au sein de la localité, il en ressort que nombreux facteurs de pollution des eaux existent au sein de celle-ci, notamment ceux liés à l'environnement d'une part notamment la proximité des latrines, rigoles et dépotoirs par rapport aux points d'approvisionnement en eaux et d'autre par l'inaction de l'Homme en ce qui concerne le traitement de ces eaux avant usage collectif ou individuel. De ces nombreux facteurs et suite aux analyses effectuées, un profil bactérien de ces eaux de consommation a pu être établi, c'est ainsi qu'il comprend des coliformes du genre Klebsiella et du genre Enterobacter, des entérocoques avec absence marquée d'Escherichia coui. Toutefois, un tel profil indique que les eaux de cette localité sur le plan qualité, ne respectent pas les normes établies en rapport aux eaux de consommation qui, impliquent l'absence des entérocoques et des coliformes dans 100ml d'eau filtrée au préalable. En droite ligne existentielle de ce profil, en ressort diverses maladies hydriques survenant à prédominance dans la localité et dont sont victimes les consommateurs, notamment: la fièvre typhoïde et paratyphoïde, les gastroentérites, la dysenterie et des infections de la peau. Suite à tout cela et de part certains tests spécifiques, l'hypothèse de recherche établie a pu être validée, indiquant ainsi que les eaux de la localité de Ngoa-ékélé regorgent des pathogènes bactériens résultant de la présence d'un ensemble des facteurs de pollution développés dans le travail, qui partagent l'environnement avec les points d'eau. Les eaux examinées dans la localité de Ngoa-ékélé sont de qualité impropre pour les paramètres bactériologiques étudiés, du fait de la présence d'une pléthore de facteurs induisant ou justifiant l'existant et/ou le maintien du profil bactériologique établie. Ceci dit, leurs consommations présentent de sérieux risques pour la santé humaine, induisant la survenue de diverses maladies dans la population consommatrice. Face à toutes ces observations, de nombreux problèmes ont pu transparaitre et des suggestions dans l'optique d'améliorer, rectifier ou éradiquer leurs survenus ont été soumises pour appréciation et / ou amélioration afin de pouvoir contribuer efficacement à la réduction des maladies hydriques au sein de Ngoa-ékélé à Yaoundé.

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POPULATIONS DE NGOA-ÉKÉLÉ À YAOUNDÉ

Tableau 15 : Récapitulatif des problèmes répertoriés concernant les eaux Ngoa-ékélé et
suggestions proposées

L'existence et la proximité des foyers de pollution par rapport aux points d'approvisionnement en eaux de la localité	Effectuer la sensibilisation et l'éducation de la population sur les dangers et répercutions de la consommation d'une eau non potable	Les autorités - les organismes de santé communautaire - les éducateurs
	Mettre sur pieds des mesures d'action d'hygiène communautaire régulières	Les populations
	Construction des latrines à distance réglementaire des points d'eaux	Les populations
	Évacuation des excréments par des services spécialisés et non dans les rigoles	Les populations
Le non traitement des eaux avant usage collectif ou individuel	Effectuer la sensibilisation et l'éducation de la population sur les bienfaits du traitement des eaux avant usage	Les autorités - les organismes de santé communautaire - les éducateurs
	Effectuer des formations sur le traitement / désinfection des eaux de manières simples, efficaces et accessibles à tous	Les organismes de santé communautaire - les éducateurs
	Effectuer des dons au sein de la communauté	Les autorités
La présence d'un profil bactérien	Effectuer la désinfection des eaux depuis les points	Les autorités - les populations
La présence d'un profil bactérien	Effectuer des contrôles qualités régulièrement	Les autorités - les éducateurs
Les maladies recensées	Se faire dépister et suivre un bon traitement	Les populations
	Bonne hygiène de l'eau à consommer	Les populations

Comme perspectives, nous tenons à confronter les résultats obtenus à ceux d'une étude similaire au sein de la localité, qui userait d'une autre méthode et à étendre cette recherche à l'étendu de la ville de Yaoundé puis toutes les villes du Cameroun.

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05_traitement_eau_boisson_urgence.pdf. (s. d.). Consulté 21 avril 2021, à l'adresse

Denis, F., Bingen, E., Martin, C., Ploy, M.-C., & QUENTIN, R. (2012). Bactériologie médicale. Elsevier Masson.

Hartemann, P. (2013). Eau de consommation, risque, santé. Sciences Eaux Territoires, Numéro 10(1), 14?21.

Mpakam, H. G., Kenmogne, G. R. K., Tatiétsé, T. T., Maire, E., Boeglin, J., & Ekodeck, G. E. (s. d.). Étude des facteurs de pollution des ressources en eau en milieu urbain: Cas de Bafoussam (Ouest-Cameroun). 27.

Soncy, K., Djeri, B., Anani, K., Eklou-Lawson, M., Adjrah, Y., Karou, D. S., Ameyapoh, Y., & Souza, C. de. (2015). Évaluation de la qualité bactériologique des eaux de puits et de forage à Lomé, Togo. Journal of Applied Biosciences, 91, 8464-8469-8464?8469. https://doi.org/10.4314/jab.v91i1.6

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ANNEXES

Annexe 1 : CLAIRENCE ÉTHIQUE

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Annexe 2 : autorisation de recherche du sous-préfet de Yaoundé 3

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Annexe 3 : Notice d'information

INVITATION À PARTICIPER AU PROJET DE RECHERCHE PORTANT SUR L'EVALUATION BACTERIOLOGIQUE DES EAUX DE CONSOMMATION DES POPULATIONS DE NGO EKELE A YAOUNDE

Cette recherche pour laquelle votre participation est sollicitée porte sur l'évaluation physico-bactériologique des eaux de consommation (sources, forages, pompes, rivières, puits) du quartier à Yaoundé. Elle vise à déterminer le profil bactériologique des eaux de consommation dans le quartier de Ngoa Ekélé à Yaoundé.

Un profil bactériologique qualifie un ensemble d'éléments bactériens se retrouvant dans un milieu quelconque.

Établir le profil bactériologique des eaux consommées par les populations de Ngoa Ekélé. Pouvoir identifier en définissant à quelle proportion, les bactéries présentes dans les eaux de consommation de la localité et déterminer les facteurs favorisant la présence de ces derniers puis les pathologies causées par ces eaux dans la population.

Les renseignements donnés dans cette notice d'information visent à vous aider à comprendre exactement ce qu'implique votre éventuelle participation à la recherche et à prendre une décision éclairée à ce sujet. Nous vous demandons donc de lire le formulaire de consentement attentivement et de poser toutes les questions que vous souhaitez. Vous pouvez prendre tout le temps dont vous avez besoin avant de prendre votre décision.

Votre participation à ce projet de recherche consiste à remplir un questionnaire et à créer une disponibilité pour la collecte de leurs eaux de consommation.

Le bénéfice direct que vous pourrez tirer de la participation à cette recherche est de savoir si vous êtes victime d'une contamination liée à l'utilisation de votre eau

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Les données recueillies par cette étude sont soumis à l'exigence de confidentialité. Les résultats de la recherche, qui pourront être diffusés sous forme d'articles, de rapport de recherche ou de communications à des congrès scientifiques, ne permettront pas de vous identifier.

Les données recueillies seront conservées sur support de communication (numérique et imprimé) et conservées sur support numériques sécurisés. Aucun nom ne sera porté, seul des numéros seront attribués aux différents échantillons

Les données seront détruites après la publication finale du rapport de recherche et des articles; elles ne seront pas utilisées à d'autres fins que celles décrites dans le présent document. Participation volontaire

Votre participation à cette étude se fait sur une base volontaire. Vous êtes entièrement libre de participer ou non et de vous retirer en tout temps sans préjudice et sans avoir à fournir d'explications.

Pour obtenir de plus amples renseignements ou pour toute question concernant ce projet de recherche, vous pouvez communiquer avec TCHAMDA TAYO Laurel Kévine par courriel à l'adresse suivante" laureltchamda@gmail.com"ou au téléphone "691533656"

Cette recherche est approuvée par le comité d'éthique de la recherche l'École des Sciences de la Santé de l'Université Catholique d'Afrique Centrale. Un certificat de conformité éthique portant le numéro (n*****) a été émis le (******)

Pour toute question ou plainte d'ordre éthique concernant cette recherche, vous devez communiquer avec le secrétaire permanent du comité d'éthique de l'École des Sciences de la Santé, par téléphone au numéro ********* ou par courrier électronique***********. Université Catholique d'Afrique Centrale (UCAC)

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Annexe 4 : Formulaire de consentement éclairé

Moi, TCHAMDA TAYO Laurel Kévine m'engage à procéder à cette étude conformément à toutes les normes éthiques qui s'appliquent aux projets comportant la participation de sujets humains.

Je soussigné, , confirme avoir lu et compris la notice
d'information au sujet du projet «L'évaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa Ekélé» J'ai bien saisi les conditions, les risques et les bienfaits éventuels de ma participation. On a répondu à toutes mes questions à mon entière satisfaction. J'ai disposé de suffisamment de temps pour réfléchir à ma décision de participer ou non à cette recherche. Je comprends que ma participation est entièrement volontaire et que je peux décider de me retirer en tout temps, sans aucun préjudice.

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Annexe 5 : Questionnaire

^{Les informations collectées au cours de cette
enquête sont strictement confidentielles au terme de la loi N°91/023
du 16}

^{décembre 1991 sur les recensements et
enquêtes statistiques qui stipule en son article 5 que} « ^{les renseignements individuels}

^S0Q1	^{d'ordre économique ou financier figurant sur tout questionnaire d'enquête statistique ne peuvent en aucun cas être utilisés à} ^{des fins de contrôle ou de répression économique} ».
^S0Q2	^Localité:

	^{SECTION 0} : ^{RENSEIGNEMENTS GÉNÉRAUX} ^{Endroit exact:}	\|__\|__\|
	^{Numéro du questionnaire}
	^Sexe : ^1=Homme ; ^2=Femme
^S0Q3 ^S0Q5	^Âge
^S0Q4		\|__\|

^S0Q6	^{1= Employé/ouvrier qualifié} ; ^{2= Compte propre} ^{3= Chômeur} ; ^{4= Étudiant(e)} __________________________________ ^{SECTION 1} : ^{CONNAISSANCE SUR L'UTILISATION DES EAUX} ^{Autres (à préciser)}	\|__\| \|____\|
	^{Source d'approvisionnement (les deux les plus utilisées) en eau} :
^S1Q1	^{S1= Source1} ; ^{S2= Source2} ; ^P1= Puit1 ; ^{P 2= Puit2} ; ^{P3= Puit3} ; ^P4= Puit4 ; ^{P5= Puit5} ;	\|____\|
^S1Q3	^{À quelle fin utilisez-vous cette eau} ? ^{1= Usage corporelle} ; ^{2= Consommation buccale} ;
S1Q2	^{3= Usage domestique} ; ^{4= Autres (à préciser)}	\|__\|

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1Q41	Si oui, lesquelles (vous pouvez sélectionner plusieurs) ? Eaux stagnantes ; Latrines ; Dépotoir 1= Oui Champ ; 2= Non Industrie ; Rigole ; Points de lessive et vaisselle ; Autres (à préciser)		\|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\|

S1Q5	Êtes-vous habituellement sujets aux maladies suivantes (vous pouvez sélectionner plusieurs) ? Gastro-entérites Fièvre typhoïde et paratyphoïde Cholera 1= Oui Dysenterie 2= Non Shigellose 3= Refus TIAC Infections de la peau Autres (à préciser)		\|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\| \|__\|

S1Q6	L'eau du point d'approvisionnement est-elle souvent traitée ? 1= oui ; 2= Non (si non aller à S1Q8) ; 3=Ne sais pas (si ne sais pas aller à S1Q8)		\|__\|
S1Q61	Si oui, quel est le moyen est utilisé pour cela au niveau du point même (Les deux les plus utilisés) ? 1= Désinfection chimique ; 2= Utilisation d'un dispositif de filtration ; 3= Autres (à préciser)	\|__\| \|__\|

S1Q62	Quelle est la fréquence de ce traitement au niveau du point ? 1= Semaine ; 2= mois ; 3= année ; 4= ne sais pas	\|__\|
S1Q7	A votre niveau ou de manière personnelle, traitez-vous habituellement l'eau depuis chez vous ? 1= Oui 2= Non (si non fin du questionnaire)	\|__\|
S1Q71	Si oui, quel est le moyen que vous utilisez pour le traitement de cette eau ? (Les deux les plus utilisés) 1= Ébullition ; 2= chloration ; 3= Aération 4= Rayons UV ; 5= Filtration aux chandelles de céramique 6= Autres (à préciser)	\|__\| \|__\|
S1Q72	Quelle est la fréquence de ce traitement ? 1= Par Jour ; 3=Par Semaine ; 3= Fréquence Non déterminée	\|__\|

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Annexe 6 : Généralités sur les milieux de culture utilisés

Milieu de culture	Principe	Usage	Aspect après usage
Gélose EMB	Le principe repose sur l'aptitude des entérobactéries à fermenter ou non le lactose et/ou le saccharose. Le milieu est rendu inhibiteur vis-à-vis des autres bactéries par l'éosine et le bleu de méthylène.	Isolement et dénombrement des entérobactéries (Escherichia coui)	Présence de colonies rondes, de couleur rose à rouge et muqueuses.
Gélose BEA	La présence d'azoture de sodium inhibe les bactéries Gram-et de la bile de boeuf inhibe les bactéries Gram+, à l'exception des streptocoques du groupe D. Cette différenciation est basée sur leur capacité à hydrolyser l'esculine qui occasionne le virage du milieu au noir.	Isolement et identification des entérocoques et streptocoques du groupe D	Présence de colonies noires à bords éclaircis faisant virer le milieu en noir
Eau peptonnéé	La tryptone apporte le carbone, l'azote, lez vitamines et les minéraux nécessaires à la croissance des bactéries. Le chlorure de sodium maintient la balance osmotique du milieu.	Pré-enrichissement en vue de la recherche des salmonelles dans les aliments.	Trouble du milieu
Bouillon sélénite	La sélectivité de ce milieu vis-à-vis des salmonelles est basée sur la présence du sélénite qui inhibe les	Enrichissement sélectif en vue de la recherche des salmonelles.	Trouble du milieu avec changement de coloration tirant à l'orangé

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	bactéries Gram + et la part desz germes fécaux Gram - à l'exception de ces derniers.
Gélose hektoen	La sélectivité de ce milieu est	Isolement des	Présence de
	basée sur la présence de sels biliaires, de BBT et de fuschine acide qui inhibe les bactéries gram +, E coli dans une moindre mesure, les proteus et les campylobactères. La différenciation des entérobactéries est basée sur leur capacité à fermenter différents sucres :le lactose, le saccharose et la salicine. Une différenciation supplémentaire reposant sur la production d'hydrogène sulfuré est possible grâce à la présence de thiosulfate et de citrate de fer. Elle se traduit par des colonies à centre noir.	Salomonelles et Shigelles	colonies rondes, de petite taille et de couleur orangée
Gélose Kliger	Il s'applique sur l'aptitude	Identification des	Fragmentation de
	des entérobactéries à fermenter ou non le lactose et le glucose avec ou sans production de gaz ou de sulfure d'hydrogène.	salmonelles	la gélose, virement de couleur au jaune du culot et/ou de la pente, possible points noirs dans la gélose.

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Annexe 7 : Principe coloration de gram

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Annexe 8 : Informations sur la galerie api 20e

API 20^E est un système d'identification standardisé pour l'identification des Enterobacteriaceae et autres bacilles à Gram négatif non fastidieux, comportant 21 tests biochimiques miniaturisés, ainsi qu'une base de données. Le coffret de 25 tests comprend : 25 galeries API 20^E, 25 boites d'incubation, 25 fiches de résultats, 1 barrette de fermeture et 1 notice.

Le système API® BioMérieux (Appareillage et Procédé d'Identification) est une version miniaturisée et standardisée des techniques biochimiques conventionnelles pour l'identification des bactéries. Lorsqu'une suspension bactérienne de densité convenable est répartie dans les différentes alvéoles qui composent la micro galerie (contenant de substrats déshydratés), les métabolites produits durant la période d'incubation se traduisent par des changements de couleur spontanés ou révélés par addition de réactifs. Elle permet l'identification d'une centaine de bacilles à Gram négatif dont les Entérobactéries. Elle comprend 20 tests biochimiques. La lecture se fait suivant un tableau de lecture et l'identification obtenue par, un catalogue analytique ou un logiciel d'identification.

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3.1 Technique d'échantillonnage ou de recrutement / Nombre de participants requis ou

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